本文關(guān)鍵詞：替普瑞酮對大鼠視網(wǎng)膜興奮性損傷模型HSF1表達(dá)的影響

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【摘要】：目的：通過向大鼠玻璃體腔注射N-甲基-D-天冬氨酸(N-Methyl-D-aspartic acid,NMDA)制作視網(wǎng)膜興奮性損傷模型,觀察替普瑞酮(geranylgeranylacetone,GGA)對熱休克轉(zhuǎn)錄因子1(heat shock transcription factor1,HSF1)表達(dá)的影響,從而進(jìn)一步明確GGA誘導(dǎo)熱休克蛋白70(heat shock protein70,HSP70)表達(dá)的機(jī)制。 方法：將48只健康清潔級(jí)Wistar大鼠隨機(jī)平均分為4組：分別為正常對照組、實(shí)驗(yàn)對照A組、實(shí)驗(yàn)對照B組以及實(shí)驗(yàn)組。正常對照組不行任何處理；實(shí)驗(yàn)組腹腔內(nèi)注射GGA(800mg/Kg),實(shí)驗(yàn)對照A組、實(shí)驗(yàn)對照B組腹腔注射等量溶劑(10%DMS0)。腹腔注射后1h實(shí)驗(yàn)對照B組和實(shí)驗(yàn)組的每只大鼠隨機(jī)抽取一只眼,將2μ1NMDA(80mmol/L)注入玻璃體腔內(nèi),做好標(biāo)記；實(shí)驗(yàn)對照A組隨機(jī)取一只眼行玻璃體腔穿刺并注射等量PBS。實(shí)驗(yàn)組及實(shí)驗(yàn)對照組于玻璃體腔穿刺后2h處死大鼠,正常對照組于實(shí)驗(yàn)開始后1h全部處死。HE染色觀察視網(wǎng)膜形態(tài)學(xué)變化,采用RT-PCR分析視網(wǎng)膜中HSFlmRNA的表達(dá),免疫組織化學(xué)染色方法檢測P-HSF1-Ser326蛋白的表達(dá)。 結(jié)果：HE染色顯示：正常對照組大鼠視網(wǎng)膜組織層次完整清晰,細(xì)胞形態(tài)規(guī)則,染色均勻；實(shí)驗(yàn)對照A組與正常組相比,視網(wǎng)膜組織結(jié)構(gòu)、神經(jīng)節(jié)細(xì)胞數(shù)目及形態(tài)無明顯差別；實(shí)驗(yàn)對照B組大鼠較正常組大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)纖維層水腫,視神經(jīng)節(jié)細(xì)胞胞漿內(nèi)出現(xiàn)空泡樣變性,內(nèi)核層、外核層排列疏松,但視神經(jīng)節(jié)細(xì)胞數(shù)目及視網(wǎng)膜厚度未見明顯變化；實(shí)驗(yàn)組大鼠視網(wǎng)膜損傷較實(shí)驗(yàn)對照B組明顯減輕。RT-PCR結(jié)果顯示：實(shí)驗(yàn)對照A組較正常對照組大鼠視網(wǎng)膜中HSFlmRNA的表達(dá)無明顯差別；實(shí)驗(yàn)對照B組HSFlmRNA的表達(dá)量較前兩組明顯增加；實(shí)驗(yàn)組較正常對照組mRNA表達(dá)量增加,較實(shí)驗(yàn)對照B組無明顯差別。免疫組織化學(xué)染色顯示：正常對照組及實(shí)驗(yàn)對照A組視神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層、內(nèi)核層及光感受器細(xì)胞層的內(nèi)節(jié)只見微量的棕黃色顆粒沉積；實(shí)驗(yàn)對照B組視神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層、內(nèi)核層、光感受器細(xì)胞層內(nèi)節(jié)的棕黃色顆粒表達(dá)量較正常對照組及實(shí)驗(yàn)對照A組明顯增加；實(shí)驗(yàn)組視網(wǎng)膜各層均可見大量棕黃色顆粒沉積陰性對照組均未見明顯陽性染色。 結(jié)論：1、成功建立大鼠視網(wǎng)膜興奮性損傷模型： 2、在興奮性損傷模型中,GGA能于視網(wǎng)膜全層激活HSFl的活性,激活HSF1為GGA誘導(dǎo)視網(wǎng)膜表達(dá)HSP70的有效機(jī)制。
【學(xué)位授予單位】：青島大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R774.1

【參考文獻(xiàn)】

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中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前2條

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本文編號(hào)：1202755