發(fā)布時間：2017-11-13 10:09

  本文關(guān)鍵詞：壓力損傷后小梁細胞中BACE1的表達變化

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【摘要】：目的：探索不同壓力條件下小梁細胞中BACE1的表達情況,以期為青光眼病理過程中的房水循環(huán)障礙發(fā)病機制提供新的實驗依據(jù)。 方法：對人來源的小梁細胞進行體外培養(yǎng)并建立加壓模型,分別用20mmHg、40mmHg、60mmHg、80mmHg四個壓力點加壓培養(yǎng)2h,繼而常規(guī)培養(yǎng)條件下分別存活Oh、12h、24h、48h;在24只雄性SD大鼠中隨機選擇20只眼前房加壓注射生理鹽水至110mmHg維持60min建立雙眼高眼壓模型,分別存活6h、12h、Id、3d、7d,另外4只眼前房穿刺作為對照組；采集人眼標本3只,分別來自于急性眼外傷所致眼高壓和慢性開角型青光眼眼高壓患者的眼球,并已征得患者同意。收集各組培養(yǎng)細胞及小梁網(wǎng)組織冰凍切片,行臺盼藍染色檢測細胞的活性率,H-E染色觀察細胞組織結(jié)構(gòu)與形態(tài),BACE1、FN、 LN、NSE、Ⅷ因子免疫化學(xué)染色檢測。 結(jié)果：1、免疫化學(xué)染色顯示人眼小梁細胞NSE、FN、LN染色呈陽性表達,Ⅷ因子染色呈陰性表達。20mmHg、40mmHg壓力培養(yǎng)時,HE染色結(jié)果顯示細胞形態(tài)結(jié)構(gòu)與對照組相比變化不大,臺盼藍染色顯示細胞的存活率與對照組相比沒有太大變化,但是當壓力升高到60mmHg與80mmHg時,HE染色可見部分細胞的細胞壁皺縮,輪廓模糊且胞漿內(nèi)出現(xiàn)少量空泡,臺盼藍染色顯示細胞死亡率明顯上升。免疫化學(xué)染色顯示LN的表達在加壓的初始階段逐漸增高,但是在壓力升高到40mmHg時,隨著壓力的增高和存活時間的延長,LN的表達開始下調(diào),壓力增加到80mmHg,存活48h時,LN降低十分明顯；而BACE1的表達則呈現(xiàn)表達逐漸增強的趨勢。2、正常大鼠眼球的小梁組織可見較強的帶型LN免疫陽性產(chǎn)物,但未見BACE1的免疫陽性表達或僅有少量的表達,高眼壓損傷后6h、12h組可見LN的免疫表達減弱,小梁組織外層可見明顯的BACE1免疫陽性表達,高眼壓損傷后1d開始至7d,LN的免疫表達進一步降低,BACE1的表達則逐漸增強。3、人慢性開角型青光眼眼球的小梁網(wǎng)組織中可見明顯的BACE1免疫陽性產(chǎn)物,急性眼外傷致眼壓過高的眼球小梁網(wǎng)組織中,僅有少量的BACE1陽性表達。 結(jié)論：隨著壓力的增加及存活時間的延長,小梁細胞形態(tài)和功能進行性受損,與此同時BACE1表達出現(xiàn)上調(diào),提示BACE1的表達上調(diào)可能與小梁細胞損傷的發(fā)生有關(guān)。圖11個,參考文獻63篇
【學(xué)位授予單位】：中南大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R775

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前6條

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本文編號：1180205