本文關(guān)鍵詞：乙琥胺治療老年性耳聾的實(shí)驗(yàn)性研究

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【摘要】：目的觀察乙琥胺對(duì)老年性耳聾小鼠模型NOD/LtJ小鼠的耳聾保護(hù)作用,并探討乙琥胺延緩小鼠聽力損失的可能機(jī)制。方法①將耳聾小鼠模型NOD/LtJ小鼠隨機(jī)分為乙琥胺治療組與對(duì)照組,在小鼠3周齡時(shí),治療組小鼠給予每天200 mg/kg乙琥胺灌胃治療,對(duì)照組給予同劑量的PBS對(duì)照治療。分別在小鼠生后第4、6、8周檢測(cè)兩組小鼠的聽性腦干反應(yīng)(ABR)與畸變產(chǎn)物耳聲發(fā)射(DPOAE)對(duì)比觀察兩組小鼠的聽力變化②在第8周取兩組小鼠耳蝸進(jìn)行耳蝸基底膜鋪片,觀察兩組小鼠耳蝸基底膜毛細(xì)胞掉落情況。③同樣取第8周兩組小鼠耳蝸,通過免疫熒光技術(shù)對(duì)比觀察兩組小鼠耳蝸毛細(xì)胞內(nèi)凋亡蛋白Caspasse-3含量變化。④通過實(shí)時(shí)定量熒光PCR技術(shù)檢測(cè)兩組小鼠第8周耳蝸內(nèi)凋亡基因caspasse-3的表達(dá)。結(jié)果1.連續(xù)對(duì)照比較兩組小鼠click聲ABR值可見兩組小鼠聽力閾值都呈現(xiàn)增長(zhǎng)趨勢(shì),但乙琥胺治療組小鼠比對(duì)照組小鼠ABR值增長(zhǎng)緩慢且閾值低。在第8周測(cè)得治療組小鼠純音8、16、32kHz頻率ABR值均低于對(duì)照組,差異有顯著性(P0.05)。2.在第8周測(cè)試治療組與對(duì)照組小鼠的DPOAE值,可見在低頻刺激聲17672Hz前,測(cè)得兩組小鼠DPOAE值差異不明顯(P0.05)。而在高頻24990Hz時(shí),測(cè)得兩組DPOAE值差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。3.在用乙琥胺治療NOD/LtJ小鼠5周后觀察治療組小鼠與對(duì)照組小鼠耳蝸毛細(xì)胞脫落情況,可見在耳蝸基底膜頂環(huán)與中環(huán),兩組小鼠外毛細(xì)胞脫落都較少,未見內(nèi)毛細(xì)胞脫落。而在基底膜底環(huán)中,兩組小鼠外毛細(xì)胞均有脫落,但治療組小鼠較對(duì)照組小鼠脫落的毛細(xì)胞數(shù)目明顯減少。4.在用乙琥胺治療NOD/LtJ小鼠5周后處死兩組小鼠后觀察兩組小鼠耳蝸毛細(xì)胞中凋亡相關(guān)蛋白Caspasse-3的變化,可見治療組中小鼠的內(nèi)、外毛細(xì)胞中Caspasse-3蛋白的熒光信號(hào)弱于對(duì)照組中Caspasse-3蛋白的熒光信號(hào)。5.用rt-PCR方法定量檢測(cè)乙琥胺治療5周后檢測(cè)治療組小鼠與對(duì)照組小鼠耳蝸中凋亡相關(guān)基因mRNA的含量,結(jié)果顯示治療組caspasse-3 mRNA含量較對(duì)照組減少,差異有顯著性(P0.05)。結(jié)論本實(shí)驗(yàn)通過對(duì)乙琥胺治療組NOD/LtJ小鼠與對(duì)照組小鼠的聽力功能檢測(cè)、耳蝸基底膜毛細(xì)胞的組織學(xué)觀察以及相關(guān)凋亡基因表達(dá)的檢測(cè),認(rèn)為乙琥胺有保護(hù)耳聾小鼠聽力功能的作用,且主要是通過抗凋亡途徑來延緩小鼠聽力損失的進(jìn)展。
【關(guān)鍵詞】：乙琥胺 老年性耳聾 小鼠模型 凋亡 Caspasse-3
【學(xué)位授予單位】：濱州醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R764.43
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本文編號(hào)：1004393