本文關(guān)鍵詞：Neuregulin-1對(duì)冠狀動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞功能的影響

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【摘要】：摘要內(nèi)容目的檢測(cè)Neuregulin-1因子處理對(duì)冠狀動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞增殖、遷移、存活和蛋白表達(dá)的影響。方法選用第3-6次傳代的人冠脈平滑肌細(xì)胞(HCASMC),當(dāng)培養(yǎng)的細(xì)胞鋪滿瓶底的90%左右或者長(zhǎng)成融合單層后即可加入Neuregulin-1(NRG-1,下同)進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。依據(jù)不同濃度NRG-1處理正�；蛉毖毖跖囵B(yǎng)條件下的HCASMC進(jìn)行實(shí)驗(yàn)分組。運(yùn)用MTT法檢測(cè)不同濃度的NRG-1對(duì)HCASMC增殖影響,Transwe1124孔板法檢測(cè)不同濃度的NRG-1對(duì)HCASMC遷移影響；Hoechst 33342核染色法檢測(cè)NRG-1對(duì)HCASMC凋亡率的影響；Western blot檢測(cè)正常培養(yǎng)條件下NRG、ErbB2/3/4、磷酸化ErbB2受體、磷酸化ErbB3受體、磷酸化ErbB4受體以及缺血缺氧條件下促血管生成因子-1(Ang-1)、促血管生成因子-2(Ang-2)和血管內(nèi)皮生成因子(VEGF)在HCASMC中的表達(dá)水平。結(jié)果1、HCASMC生長(zhǎng)特點(diǎn)：培養(yǎng)的HCASMC為貼壁細(xì)胞,形態(tài)呈成纖維樣的長(zhǎng)梭形、桿狀或者蚯蚓型；缺血缺氧條件下形態(tài)比較瘦長(zhǎng),數(shù)量減少,生長(zhǎng)緩慢,易成團(tuán),細(xì)胞碎片較多。2、正常培養(yǎng)時(shí),HCASMC表達(dá)ErbB2/3/4、不表達(dá)NRG；加入NRG-1處理后的HCASMC磷酸化ErbB2/3/4增加(P0.05),加入抑制劑后磷酸化ErbB2/3/4的表達(dá)減少(P0.05)；3、不同濃度的NRG-1對(duì)HCASMC增殖影響結(jié)果不同,10ng/mlNRG-1組促進(jìn)HCASMC增殖的作用最明顯[(0.314±0.044)(0.239±0.044),OD值,下同,P0.05],在加入抑制劑后,這種促進(jìn)增殖的作用是受到抑制的[(0.188±0.039)(0.314±0.044),P0.05)]；在加入抑制劑的50ng/mlNRG-1組,促進(jìn)HCASMC增殖作用不明顯[(0.227±0.045)(0.239±.0441),P0.05)]。4、不同濃度的NRG-1對(duì)HCASMC遷移影響結(jié)果不同,在9H內(nèi),10ng/ml組促進(jìn)HCASMC遷移的作用最明顯[(32.2±5.9)個(gè)(25士3.8)個(gè),P0.05],在加入抑制劑后,這種促進(jìn)增殖的作用是受到抑制的[(17.1±4.5)個(gè)(32.2±5.9)個(gè),P0.05],在加入抑制劑的50ng/ml NRG-1組,促進(jìn)HCASMC遷移作用不明顯[(21.7±4.9)個(gè)(25±3.8)個(gè),P0.05]。5、在熒光顯微鏡下,Hoechst 33342使缺血缺氧作用24H后的HCASMC凋亡細(xì)胞容易辨認(rèn),核固縮、發(fā)亮、碎裂、成團(tuán)即為凋亡細(xì)胞,而細(xì)胞生長(zhǎng)數(shù)量也明顯減少,和對(duì)照組比較,缺血缺氧HCASMC凋亡率(凋亡率=凋亡細(xì)胞數(shù)/細(xì)胞總數(shù)%)增加[(12.417±3.5)%(4.841±1.1)%,P0.05)]；在加入NRG-1處理后的NRG-1組的細(xì)胞凋亡率,較缺血缺氧組明顯降低[(6.720±1.3)%(12.417±3.5)%,P0.05)]；與NRG-1+抑制劑組比較,NRG-1降低凋亡率的作用被抑制[(6.720+1.3)%(11.368±2.4)%,P0.05)]。6、缺血缺氧時(shí),HCASMC表達(dá)VEGF、Ang-1較對(duì)照組增加(P0.05),加入100ng/ml的NRG-1處理后,VEGF、Ang-1的表達(dá)較缺血缺氧組增加(P0.05),加入抑制劑后的NRG-1+抑制劑組,VEGF、Ang-1的表達(dá)減少(P0.05),而對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組的Ang-2表達(dá)暫無(wú)明顯差異(P0.05)。結(jié)論1、HCASMC表達(dá)ErbB2/3/4、不表達(dá)NRG, NRG-1干預(yù)后,能促進(jìn)HCASMC磷酸化ErbB2/3/4的表達(dá),說(shuō)明NRG-1可激活并增強(qiáng)NRG/ErbB信號(hào)通路；2、不同濃度的NRG-1干預(yù)對(duì)HCASMC增殖的影響不同,濃度為10ng/ml的NRG-1能明顯促進(jìn)HCASMC增殖,可以推測(cè),合適濃度的NRG-1通過(guò)促進(jìn)HCASMC的增殖,從而促進(jìn)其在冠脈血管生成發(fā)揮作用；3、不同濃度的NRG-1干預(yù)對(duì)HCASMC遷移的影響不同,濃度為10ng/ml的NRG-1能明顯促進(jìn)HCASMC遷移,可以推測(cè),合適濃度的NRG-1通過(guò)促進(jìn)HCASMC的遷移,從而促進(jìn)其在冠脈血管生成發(fā)揮作用。4、缺血缺氧時(shí),NRG-1對(duì)HCASMC凋亡產(chǎn)生影響,主要為降低HCASMC的凋亡率,從而保護(hù)HCASMC。5、缺血缺氧時(shí)NRG-1能促進(jìn)HCASMC表達(dá)VEGF、Ang-1,從而促進(jìn)冠脈血管生成。
【關(guān)鍵詞】：neuregulin-1(NRG-1) 人冠脈平滑肌細(xì)胞 增殖 遷移 凋亡
【學(xué)位授予單位】：廣西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R54
【目錄】：

• 個(gè)人簡(jiǎn)歷3-5
• 中英文縮略表5-6
• 中文摘要6-9
• 英語(yǔ)摘要9-14
• 前言14-15
• 實(shí)驗(yàn)材料15-20
• 實(shí)驗(yàn)方法20-35
• 結(jié)果35-44
• 討論44-54
• 結(jié)論54-55
• 參考文獻(xiàn)55-64
• 綜述64-84
• 參考文獻(xiàn)75-84
• 致謝84

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中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 徐正云,任國(guó)珍,馬愛群;干細(xì)胞分化為平滑肌細(xì)胞參與血管病變[J];中國(guó)心血管雜志;2005年03期

2 武曉靜,黃嵐,趙剛,晉軍,張波,宋明寶,蔣世忠;內(nèi)皮細(xì)胞表型改變對(duì)平滑肌細(xì)胞表型轉(zhuǎn)換及遷移的作用[J];高血壓雜志;2003年05期

3 王春;許燦新;郭紫芬;李君牧;羅迪賢;廖端芳;李凱;;無(wú)或低血清條件下高壓培養(yǎng)促進(jìn)平滑肌細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)[J];中南醫(yī)學(xué)科學(xué)雜志;2011年02期

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5 劉貴生,卞紅磊,武惠珍,李淑榮,雷建章;消化道平滑肌細(xì)胞間的機(jī)械連接和通訊連接[J];電子顯微學(xué)報(bào);2002年05期

6 鄧R，

本文編號(hào)：964417