本文關(guān)鍵詞：枸杞蛋白酶解液對SHR大鼠的降壓效果研究

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【摘要】：目的:高血壓是心血管疾病發(fā)病的最重要危險因素之一。對血壓的控制是降低心腦血管疾病的發(fā)病率、致殘率和死亡率的有效措施。血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)抑制肽是通過影響腎素-血管緊張素系統(tǒng)和激肽釋放酶-激肽系統(tǒng)而調(diào)節(jié)機體血壓的。合成的血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)抑制劑是目前用于治療高血壓的重要藥物,食物蛋白源性ACE抑制肽因其安全性高成為活性肽研究領(lǐng)域的熱點。本實驗通過堿提酸沉法,從枸杞中提取枸杞蛋白,并利用蛋白酶分解所得枸杞蛋白酶解液,觀察其對自發(fā)性高血壓大鼠的降壓效果,為制備天然枸杞ACE抑制肽和臨床防治高血壓病提供理論依據(jù)。方法:選取10-11周齡,體重240-280g的雄性高血壓大鼠(SHR)40只和正常Wistar-Kyoto(WKY)大鼠8只,經(jīng)適應(yīng)性喂養(yǎng)1W后,根據(jù)所測基礎(chǔ)血壓及體重,按隨機數(shù)字隨機分為6組(每組8只),分別為:WKY正常對照組、陽性對照組、陰性對照組、低劑量組(枸杞蛋白酶解液40mg/kg)、中劑量組(枸杞蛋白酶解液80mg/kg)和高劑量組(枸杞蛋白酶解液100mg/kg)。實驗組經(jīng)灌胃給予不同濃度的枸杞蛋白酶解液,陰性對照組和WKY正常對照組灌胃給予相應(yīng)劑量的蒸餾水,陽性對照組灌胃給予10mg/kg卡托普利。各組動物每日灌胃1次,實驗周期為9W,實驗期內(nèi)各組動物自由進食飲水。采用無創(chuàng)多通道尾動脈測壓實驗系統(tǒng)于每周在固定時間測量大鼠清醒狀態(tài)下的尾動脈SBP、DBP和心率,每次測血壓3次,取3次測定的平均值為該測試點的血壓和心率值。比較各組大鼠血壓變化,同時觀察大鼠的毛色、激惹度、飲水量等。飼養(yǎng)結(jié)束后,戊巴比妥鈉麻醉,腹主動脈取血,采用酶聯(lián)免疫吸附法測定大鼠血漿中血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)的含量,Real-time PCR法比較WKY、SHR大鼠心臟和腎臟組織中ACE、AT1R、ACE2和MasR mRNA的表達水平。結(jié)果:(1)大鼠的一般行為觀察:實驗期間,WKY組的大鼠鼠毛有光澤,雙眼靈活有神,行動敏捷,對周圍變化反應(yīng)靈敏;SHR大鼠鼠毛無光澤且飲水量多,同時在提尾或捉持頸部時,抵抗劇烈、尖叫、暴跳,同籠大鼠頻繁打斗、咬人等攻擊性。SHR大鼠經(jīng)兩周治療后,精神狀態(tài)好轉(zhuǎn),毛發(fā)逐漸有光澤。(2)大鼠進食量、體重及心率變化:SHR大鼠的進食量均明顯高于WKY(P0.05),但SHR大鼠間進食量無明顯差異(P0.05)。實驗前,各組大鼠的體重,兩兩比較差異無顯著性(P0.05)。實驗結(jié)束時,與WKY相比,SHR大鼠各組的體重均明顯下降(P0.05),但各組之間心率無統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05)。(3)大鼠臟器質(zhì)量與臟器系數(shù):與WKY組相比較,各組SHR大鼠心臟系數(shù)、腎臟系數(shù)和肝臟系數(shù)均明顯升高(P0.05);但肺臟系數(shù)和脾臟系數(shù)無統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05)。(4)枸杞蛋白酶解液對SHR大鼠血壓的影響:實驗開始時,SHR大鼠各組血壓均明顯高于WKY組(P0.05),但SHR大鼠各組間無明顯差異(P0.05)。實驗結(jié)束時,與陰性對照組相比較,陽性對照組、低劑量組、中劑量組和高劑量組大鼠血壓明顯降低。(5)枸杞蛋白酶解液對SHR大鼠血漿AngⅡ含量的影響:與WKY組比較,陰性對照組和高劑量組的AngⅡ含量均顯著升高;與陰性對照組比較,低劑量組和陽性對照組的AngⅡ含量均顯著下降(P0.05);中、高劑量組的AngⅡ含量均無明顯差異(P0.05)。(6)WKY、SHR大鼠腎臟組織中ACE、AT1R、ACE2和MasR mRNA的表達水平:與WKY組(1.000±0.085)相比,陰性對照組(2.624±0.631)、中劑量組(2.287±1.716)和高劑量組(2.396±0.632)大鼠腎臟中ACEmRNA表達水平均顯著升高(P0.05);與陰性對照組相比(2.624±0.631),陽性對照組(1.230±0.540)和低劑量組(1.260±0.643)ACEmRNA表達水平均顯著降低(P0.05);與WKY組相比,SHR大鼠腎臟中ACE2mRNA表達水平均顯著下降(P0.05),與陰性對照組(0.427±0.085)相比,陽性對照組(0.659±0.134)和低劑量組(0.601±0.134)ACE2mRNA表達水平均顯著升高(P0.05);ATIR受體,Mas受體mRNA表達分別與ACE、ACE2mRNA表達趨勢基本一致,但沒有顯著性差異(P0.05)。結(jié)論:1、枸杞蛋白酶解液對SHR有一定程度的降壓作用。2、枸杞蛋白酶解液可能通過調(diào)節(jié)ACE-AngII-AT1通路和ACE2-Ang(1-7)-Mas通路的平衡達到降壓效果。
【關(guān)鍵詞】：枸杞蛋白 酶解液 ACE抑制肽 降血壓
【學(xué)位授予單位】：寧夏醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R544.1
【目錄】：

• 摘要4-6
• ABSTRACT6-10
• 中英文縮略詞表10-12
• 前言12-16
• 材料與方法16-26
• 1 實驗材料16-17
• 2 研究方法17-26
• 研究結(jié)果26-41
• 1 大鼠一般情況26-29
• 2 大鼠血壓29-35
• 3 枸杞蛋白酶解液對SHR血漿AngⅡ含量的影響35-36
• 4 大鼠心臟、腎臟組織中ACE，，AT1R，ACE2和MasR mRNA表達的實時熒光定量PCR分析36-41
• 討論41-46
• 結(jié)論46-47
• 參考文獻47-54
• 綜述54-63
• 參考文獻58-63
• 致謝63-64
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文64-65
• 個人簡歷65

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本文編號：929550