本文關(guān)鍵詞：穴位與心肌注射干細(xì)胞對(duì)急性心肌梗死大鼠心功能與細(xì)胞因子的影響

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【摘要】：目的:通過(guò)穴位注射骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞與心肌注射骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)急性心肌梗死的大鼠進(jìn)行治療,并對(duì)比這兩種注射移植方法對(duì)心功能的改善程度以及觀察兩種骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植的手段對(duì)血管細(xì)胞黏附因子-1(VCAM-1)、遲發(fā)抗原-4(VLA-4)、基質(zhì)衍生因子1α(SDF-1α)、基質(zhì)衍生因子1α受體(CXCR4)等細(xì)胞因子的表達(dá)影響。尋找出一條通過(guò)應(yīng)用細(xì)胞移植的方法治療急性心肌梗死的新型、高效的治療措施。材料與方法:本實(shí)驗(yàn)選用的動(dòng)物為清潔級(jí)SD大鼠。其中清潔級(jí)SD大鼠體重為:100g±10g,主要用于本實(shí)驗(yàn)的細(xì)胞培養(yǎng);清潔級(jí)雄性SD大鼠體重為:250g±10g,主要用于本實(shí)驗(yàn)的動(dòng)物造模。先將60只清潔級(jí)雄性SD大鼠進(jìn)行隨機(jī)分組,分為:假手術(shù)組、模型組、心肌注射干細(xì)胞組以及穴位注射干細(xì)胞組,每組各15只(假手術(shù)組是指將大鼠開(kāi)胸后,對(duì)左冠狀動(dòng)脈前降支只穿線(xiàn),不進(jìn)行結(jié)扎。其意義在于排除動(dòng)物在實(shí)驗(yàn)因造模過(guò)程引起的反應(yīng))。分組完成后,通過(guò)采用對(duì)左冠狀動(dòng)脈前降支結(jié)扎的方式來(lái)制備急性心肌梗死的模型,具體方法如下:在距離大鼠胸骨左緣的第3肋間0.5cm處,用剪子縱向做一個(gè)長(zhǎng)約1.5cm的組織切口,并用血管鉗將肋間外肌和其周?chē)⒃诘男⊙苋繆A閉,同時(shí)利用小彎鑷于第3肋骨兩側(cè)的肋間隙里穿入雙股結(jié)扎線(xiàn),并沿結(jié)扎線(xiàn)的兩側(cè)鈍性分離開(kāi)肋間肌肉組織,并在第3肋骨的兩頭結(jié)扎肋間動(dòng)脈,再?gòu)膬蓚?cè)結(jié)扎線(xiàn)中央剪斷第3肋骨并向右輕拉使得視野充分暴露,然后將臟層胸膜與心包膜打開(kāi),把胸腺組織分離出來(lái),從左心耳和肺動(dòng)脈圓錐之間找到與心肌表面循行且與心大靜脈走向一致的左冠狀動(dòng)脈前降支(LAD)并應(yīng)用規(guī)格為720的無(wú)創(chuàng)縫合針在左心耳根部下方大約2mm處實(shí)行無(wú)創(chuàng)縫合,并穿過(guò)心臟肌層輪廓,在肺動(dòng)脈圓錐旁拿出細(xì)針。然后觀察心電圖變化,待其恢復(fù)穩(wěn)定15分鐘后,在心臟表面結(jié)扎部位應(yīng)用一條長(zhǎng)約0.5cm、寬約1.5cm的軟棉線(xiàn)在血管上面用活結(jié)結(jié)扎左冠狀動(dòng)脈前降支(其中假手術(shù)組只穿線(xiàn)但不進(jìn)行結(jié)扎),當(dāng)觀察到心電監(jiān)護(hù)示Ⅱ?qū)?lián)ST段呈弓背向上抬高,而且心臟表面的相應(yīng)區(qū)域顏色變暗時(shí)表明急性心肌梗死造模的操作完成。各組給藥途徑不同,心肌干細(xì)胞移植組:當(dāng)急性心肌梗死的大鼠造模成功72小時(shí)以后立即進(jìn)行第二次開(kāi)胸手術(shù),在直視下于心肌壞死區(qū)域選取六個(gè)點(diǎn),并應(yīng)用微量注射器均勻地將1×1010/l的干細(xì)胞培養(yǎng)液1.2ml移植在心肌內(nèi),當(dāng)觀察到相應(yīng)心肌局部隆起呈丘樣時(shí),則說(shuō)明干細(xì)胞移植成功。穴位注射干細(xì)胞組:在當(dāng)急性心肌梗死大鼠造模成功以后72小時(shí)立即對(duì)雙側(cè)心俞穴、至陽(yáng)穴、膻中穴四個(gè)穴位內(nèi)注入干細(xì)胞培養(yǎng)液0.3ml(1×1010/l),穴位移植即完成。骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植完成4周后開(kāi)始觀察大鼠的心功能改變、細(xì)胞因子(VCAM-1、VLA-4、SDF-1α、CXCR4)的表達(dá)情況以及干細(xì)胞移植的安全性。其中,心功能改變主要觀察指標(biāo)包括:腦利鈉肽(BNP)、左室舒張末期的容積(LVEDV)、左室收縮期末期的容積(LVESV)、左室短軸縮短率(FS)以及左心室射血分?jǐn)?shù)(LVEF)。細(xì)胞因子的表達(dá)主要觀察指標(biāo)包括:血管細(xì)胞黏附因子-1(VCAM-1)、遲發(fā)抗原-4(VLA-4)、基質(zhì)衍生因子1α(SDF-1α)、基質(zhì)衍生因子1α受體(CXCR4)。移植安全性指標(biāo)主要觀察大鼠的血常規(guī)、肝功能、腎功能等相應(yīng)指標(biāo),并間接反映移植骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞后的安全性問(wèn)題。結(jié)果:1.從心功能測(cè)定的結(jié)果變化來(lái)看,穴位注射干細(xì)胞組與心肌注射干細(xì)胞組均表現(xiàn)出對(duì)心功能具有改善趨勢(shì),兩組與模型組進(jìn)行比較結(jié)果顯示:血漿BNP水平、左心室舒張末期容積(LVEDV)、左心室收縮末期容積(LVESV)、左室短軸縮短率(LVFS)以及左心室射血分?jǐn)?shù)(LVEF)等指標(biāo)均有所改善,并且有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);同時(shí)心肌注射干細(xì)胞組和穴位注射干細(xì)胞組之間進(jìn)行比較,雖有數(shù)值差異,但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。2.從相關(guān)細(xì)胞因子的表達(dá)結(jié)果變化來(lái)看,穴位注射干細(xì)胞組與心肌注射干細(xì)胞組均表現(xiàn)出細(xì)胞因子的表達(dá)能力增加,兩組與模型組進(jìn)行比較結(jié)果顯示:血管細(xì)胞黏附因子-1(VCAM-1)、遲發(fā)抗原-4(VLA-4)、基質(zhì)衍生因子1α(SDF-1α)、基質(zhì)衍生因子1α受體(CXCR4)等指標(biāo)均有所增加,并且有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);而心肌注射干細(xì)胞組與穴位注射干細(xì)胞組之間進(jìn)行比較,雖有數(shù)值差異,但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。3.從安全性指標(biāo)的觀察結(jié)果來(lái)看,穴位注射干細(xì)胞組與心肌注射干細(xì)胞組對(duì)比模型組的血常規(guī)、肝功能、腎功能等指標(biāo)均無(wú)明顯變化,無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);同時(shí)心肌注射干細(xì)胞組和穴位注射干細(xì)胞組之間進(jìn)行比較也無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:1.實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)證實(shí),穴位注射干細(xì)胞與心肌注射干細(xì)胞對(duì)于大鼠急性心肌梗死的心功能均具有改善作用。2.實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)證實(shí),穴位注射干細(xì)胞與心肌注射干細(xì)胞對(duì)于大鼠急性心肌梗死的血管細(xì)胞黏附因子-1(VCAM-1)、遲發(fā)抗原-4(VLA-4)、基質(zhì)衍生因子1α(SDF-1α)、基質(zhì)衍生因子1α受體(CXCR4)四種細(xì)胞因子的表達(dá)均具有增強(qiáng)作用。3.實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)證實(shí),穴位注射干細(xì)胞與心肌注射干細(xì)胞的治療方法從血常規(guī)、肝功、腎功影響的角度來(lái)說(shuō)均具有一定的安全性。
【關(guān)鍵詞】：骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 穴位注射 心肌注射 急性心肌梗死 細(xì)胞因子
【學(xué)位授予單位】：遼寧中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類(lèi)號(hào)】：R542.22
【目錄】：

• 摘要4-7
• Abstract7-11
• 英文縮略語(yǔ)11-12
• 前言12-15
• 材料與方法15-23
• 實(shí)驗(yàn)結(jié)果23-28
• 討論28-33
• 結(jié)論33-34
• 本研究創(chuàng)新性的自我評(píng)價(jià)34-35
• 參考文獻(xiàn)35-38
• 附錄 綜述38-48
• 參考文獻(xiàn)45-48
• 個(gè)人簡(jiǎn)介48-49
• 在學(xué)期間科研成績(jī)49-50
• 致謝50

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本文編號(hào)：849817