本文關(guān)鍵詞：多層面驗(yàn)證共培養(yǎng)微環(huán)境誘導(dǎo)法誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞心肌樣分化

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【摘要】：目的:為了多層面探討共培養(yǎng)微環(huán)境誘導(dǎo)法定向誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCs)心肌樣分化的可行性。方法:取第3代MSCs與原代心肌細(xì)胞(CMs)進(jìn)行共培養(yǎng)。在顯微鏡下觀察誘導(dǎo)1周后的MSCs形態(tài)學(xué)變化,用免疫熒光和實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)分別檢測(cè)誘導(dǎo)的MSCs中心肌肌鈣蛋白I(cTn I)、α-肌動(dòng)蛋白(α-actin)、Nkx-2.5和GATA-4的基因表達(dá)變化情況。采用超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜(UPLC-MS/MS)分別檢測(cè)誘導(dǎo)組和對(duì)照組的代謝產(chǎn)物。結(jié)果:誘導(dǎo)1周后的MSCs形態(tài)呈心肌樣改變,cTn I、α-actin、Nkx-2.5和GATA-4的基因表達(dá)均明顯升高,正交最小偏二乘法判別分析(OPLS-DA)模型顯示誘導(dǎo)的MSCs代謝物向CMs轉(zhuǎn)變趨勢(shì)明顯。通過(guò)多元和單元統(tǒng)計(jì)分析篩選差異變量,根據(jù)一級(jí)質(zhì)譜和二級(jí)質(zhì)譜比對(duì)結(jié)果,最終確定12種差異代謝物。與未經(jīng)誘導(dǎo)的MSCs相比,經(jīng)誘導(dǎo)的MSCs與CMs中變化趨勢(shì)相同的差異代謝物有7種。結(jié)論:無(wú)論從形態(tài)、基因、蛋白質(zhì)還是代謝層面看,MSCs通過(guò)與CMs間接接觸共培養(yǎng)后均發(fā)生了心肌樣改變,但是與CMs仍存在差異。
【關(guān)鍵詞】：共培養(yǎng)微環(huán)境 代謝組學(xué) 心肌樣分化 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 心肌細(xì)胞
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R54
【目錄】：

• 英漢縮略語(yǔ)名詞對(duì)照4-5
• 中文摘要5-6
• 英文摘要6-8
• 前言8-9
• 1 材料和方法9-12
• 2 結(jié)果12-18
• 3 討論18-21
• 全文總結(jié)21-22
• 參考文獻(xiàn)22-25
• 文獻(xiàn)綜述25-32
• 參考文獻(xiàn)28-32
• 致謝32-33
• 碩士期間發(fā)表的論文33

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

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本文編號(hào)：750374