本文關(guān)鍵詞：AKT和Wnt11雙基因聯(lián)合小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞移植治療心肌梗死的機(jī)制研究

  更多相關(guān)文章： 基因過表達(dá) 抗氧化應(yīng)激抗凋亡作用 促轉(zhuǎn)化作用小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 心肌細(xì)胞

【摘要】：目的:探討AKT基因過表達(dá)對過氧化氫(H2O2)誘導(dǎo)的小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞氧化損傷的影響及抗凋亡作用。探討Wnt11基因過表達(dá)對干細(xì)胞向心肌細(xì)胞轉(zhuǎn)化是否有促進(jìn)作用。研究轉(zhuǎn)染雙基因的干細(xì)胞與心肌細(xì)胞共培養(yǎng)后是否可轉(zhuǎn)化為心肌細(xì)胞。方法:培養(yǎng)干細(xì)胞,測慢病毒對干細(xì)胞最佳感染率。培養(yǎng)干細(xì)胞,轉(zhuǎn)染AKT基因,向細(xì)胞培養(yǎng)基中加入不同濃度(25、50、100、200umol/L)的H2O2,培養(yǎng)24h建立氧化損傷模型,每個模型組均包含AKT組、GFP對照組、AKT抑制劑組。細(xì)胞流式儀檢測干細(xì)胞凋亡比例。培養(yǎng)干細(xì)胞,轉(zhuǎn)染AKT基因,缺血缺氧條件下培養(yǎng),并設(shè)對照組。24h后細(xì)胞流式儀檢測干細(xì)胞凋亡比例。培養(yǎng)干細(xì)胞,轉(zhuǎn)染W(wǎng)nt11基因,細(xì)胞免疫熒光法檢測是否有心肌細(xì)胞標(biāo)志蛋白表達(dá)陽性細(xì)胞,與心肌細(xì)胞共培養(yǎng)并觀察記錄。結(jié)果:干細(xì)胞凋亡率隨H2O2濃度上升而呈上升趨勢。25、50umol組凋亡率均低于對照組(P0.05),100umol組的凋亡率略高于空白對照組(P=0.48),AKT抑制劑模型組凋亡率最高(P0.05)。缺血缺氧時,AKT過表達(dá)組凋亡率顯著低于對照組(P0.05)。細(xì)胞免疫熒光方法可以觀察到轉(zhuǎn)染W(wǎng)nt11組有心肌細(xì)胞標(biāo)記蛋白陽性細(xì)胞。心肌樣細(xì)胞與心肌細(xì)胞共培養(yǎng),培養(yǎng)置第三天時,干細(xì)胞成為優(yōu)勢細(xì)胞。結(jié)論:AKT基因有抗氧化應(yīng)激抗凋亡作用;Wnt11基因有促進(jìn)干細(xì)胞轉(zhuǎn)化為心肌細(xì)胞的作用;雙基因聯(lián)合干細(xì)胞治療心肌梗死的設(shè)想存在可行性。
【關(guān)鍵詞】：基因過表達(dá) 抗氧化應(yīng)激抗凋亡作用 促轉(zhuǎn)化作用小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 心肌細(xì)胞
【學(xué)位授予單位】：新疆醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R542.22
【目錄】：

• 中英文縮略詞對照表5-8
• 摘要8-9
• ABSTRACT9-11
• 前言11-12
• 內(nèi)容與方法12-18
• 1.研究對象12-13
• 1.1 實驗材料12
• 1.2 主要儀器和試劑12-13
• 2.內(nèi)容與方法13-16
• 2.1 轉(zhuǎn)染基因到小鼠骨髓干細(xì)胞并檢測其是否順利表達(dá)，檢測轉(zhuǎn)染病毒后的干殖是否受影響13-14
• 2.2 AKT基因的抗凋亡抗氧化作用的研究14-15
• 2.3 Wnt11基因促進(jìn)干細(xì)胞轉(zhuǎn)化為心肌細(xì)胞的研究15
• 2.4 體外培養(yǎng)小鼠心肌細(xì)胞15-16
• 2.5 心肌細(xì)胞與小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞共培養(yǎng)16
• 3 質(zhì)量控制16
• 4 統(tǒng)計方法16-17
• 5 技術(shù)路線圖17-18
• 結(jié)果18-21
• 討論21-26
• 小結(jié)26-27
• 致謝27-28
• 參考文獻(xiàn)28-31
• 綜述31-38
• 參考文獻(xiàn)35-38
• 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)位論文38-39
• 導(dǎo)師評閱表39

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本文編號：681351