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氧化苦參堿延遲預(yù)處理通過蛋白激酶C對大鼠缺血再灌注心肌的保護作用

發(fā)布時間:2017-08-08 18:31

  本文關(guān)鍵詞:氧化苦參堿延遲預(yù)處理通過蛋白激酶C對大鼠缺血再灌注心肌的保護作用


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【摘要】:目的:觀察氧化苦參堿延遲預(yù)處理對大鼠缺血再灌注心肌的影響,探究其可能的心肌保護作用及機制。方法:建立大鼠心肌缺血再灌注模型,60只SD大鼠隨機分為對照組(IR組)、氧化苦參堿預(yù)處理組(OMT組)、氧化苦參堿與白屈菜紅堿聯(lián)合組(OC組)、白屈菜紅堿處理組(CHE組)和經(jīng)典缺血預(yù)適應(yīng)組(IP組)。記錄心率、血壓、左心室功能等血流動力學(xué)參數(shù)。再灌注120分鐘后,留取動脈血及心臟組織,分別檢測血清中LDH、CK-MB,測定心肌組織中NO、SOD活性及MDA含量。HE染色觀察心肌組織病理變化;TUNEL法檢測心肌細胞凋亡情況。Pep Tag#174;非放射性蛋白激酶檢測系統(tǒng)檢測PKC活性。免疫印跡法(Western blotting)檢測心肌細胞PKC及ATP敏感鉀通道亞基的表達。采用SPSS20.0統(tǒng)計分析軟件包分析實驗結(jié)果,數(shù)據(jù)以?X±s表示,多組間均數(shù)的比較采用One-way ANOVA分析,以P0.05為存在統(tǒng)計學(xué)差異的界限。結(jié)果(1)血流動力學(xué)檢測:各組實驗動物心率、血壓穩(wěn)定后,左心室收縮壓(LVSP)、左室壓力最大上升/下降速率(+LVdp/dtmax/-LVdp/dtmin),HR:OMT組高于IR組、IP組(P0.05),OC組、CHE組、IP組與IR組無顯著差異(P0.05)。LVSP:OMT組高于IR組、OC組(P0.05),OMT組與IP組無顯著差異,其他組間無顯著差異(P0.05)。+LVdp/dtmax與-LVdp/dtmin:OMT組高于IR組(P0.05),OMT組與IP組無顯著差異,OC組、CHE組與IR組無顯著差異(P0.05)。(2)血清及心肌組織相關(guān)指標檢測:再灌注120分鐘后,OMT組LDH、CK-MB和MDA含量顯著低于IR組(P0.05),SOD含量顯著高于IR組(P0.05)。OMT組LDH及CK-MB含量低于CHE組,OMT組SOD及MDA含量無顯著差異。OMT組凋亡指數(shù)AI低于I組(P0.05),OMT組凋亡指數(shù)與IP組無顯著差異(P0.05),OC組、CHE組與IR組凋亡指數(shù)無顯著差異(P0.05)。(3)心肌組織病理學(xué)觀察:①HE染色觀察:和缺血再灌注組相比,氧化苦參堿預(yù)處理組心肌纖維化程度改善,但氧化苦參堿預(yù)處理未能明顯改善心肌細胞腫脹、排列紊亂、炎性細胞浸潤、及毛細血管擴張等情況,主要為I,Ⅱ級病理損傷。②心肌細胞凋亡觀察:缺血再灌注組切心肌纖維排列松散,紋理不清,可見心肌纖維化,且視野布滿呈深淺不一的棕黑色凋亡細胞(陽性細胞)。心肌細胞腫脹,僅可見少量正常心肌組織細胞。氧化苦參堿預(yù)處理組與缺血預(yù)處理組心肌細胞排列尚整齊,橫紋清晰可見,細胞腫脹較輕,陽性細胞較少。各組凋亡指數(shù):OMT組低于IR組(P0.05)。OMT組與IP組無顯著差異,OC組、CHE組與IR組無顯著差異(P0.05)(4)PKC表達及活性檢測:與缺血再灌注組相比,氧化苦參堿預(yù)處理組PKC活性及PKCε表達量顯著增高(P0.05)。(5)ATP敏感性鉀通道各亞基的表達:與缺血再灌注組相比,氧化苦參堿預(yù)處理組KATP亞基Kir6.1表達增強、Kir6.2表達減弱,SUR1表達增強(P0.05),SUR2A、SUR2B表達與缺血再灌注組差異不明顯(P0.05)。結(jié)論氧化苦參堿預(yù)處理對大鼠缺血再灌注心肌損傷有顯著保護作用,其機制可能為氧化苦參堿通過調(diào)節(jié)PKC的活性及ATP敏感性鉀通道亞基的表達啟動抗氧自由基、抗細胞凋亡等機制有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】:缺血再灌注損傷 氧化苦參堿 缺血預(yù)處理 蛋白激酶C ATP敏感性鉀通道
【學(xué)位授予單位】:寧夏醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號】:R542.2
【目錄】:
  • 摘要4-6
  • ABSTRACT6-8
  • 符號說明8-12
  • 前言12-13
  • 第一部分氧化苦參堿預(yù)處理對大鼠缺血再灌注損傷心肌生化指標的影響13-32
  • 材料與方法13-22
  • 結(jié)果22-29
  • 討論29-32
  • 第二部分氧化苦參堿延遲預(yù)處理通過蛋白激酶C對大鼠缺血再灌注心肌的保護作用32-48
  • 材料與方法33-41
  • 結(jié)果41-44
  • 討論44-48
  • 結(jié)論48-49
  • 參考文獻49-54
  • 綜述54-69
  • 綜述參考文獻62-69
  • 發(fā)表的學(xué)術(shù)論文69-70
  • 致謝70

【參考文獻】

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 李李;小腸缺血預(yù)處理對兔心肌缺血再灌注損傷的保護作用及機制的研究[D];中南大學(xué);2006年

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本文編號:641435

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