發(fā)布時間：2017-07-29 23:17

  本文關(guān)鍵詞：低濃度過氧化氫通過上調(diào)WDR26促進(jìn)心肌細(xì)胞H9c2的增殖

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【摘要】：WDR26是從經(jīng)歷短暫缺血-再灌注的大鼠心肌組織中發(fā)現(xiàn)并表達(dá)上調(diào)的基因,又被命名為缺血預(yù)適應(yīng)上調(diào)基因2(myocardial ischemic preconditioning upregulated protein 2,MIP2),其Gen Bank登錄號是AY221751。它的最大開放閱讀框?yàn)?497bp,編碼498個氨基酸。其編碼肽鏈的C-端含5個WD40結(jié)構(gòu)域,故為典型的WD-重復(fù)蛋白。該基因被證實(shí)對缺血-再灌注引起的心肌損傷有保護(hù)作用。缺血預(yù)適應(yīng)、后適應(yīng)發(fā)揮內(nèi)源性心肌保護(hù)作用時,機(jī)體的活性氧產(chǎn)生也是增加的,但活性氧在其中所起的保護(hù)作用機(jī)制尚不清楚。本實(shí)驗(yàn)采用大鼠心室肌H9c2細(xì)胞株,運(yùn)用外源性低濃度過氧化氫作用于細(xì)胞,通過不同作用時間及不同作用濃度,采用MTT比色法、流式細(xì)胞術(shù)等方法,觀察低濃度過氧化氫對細(xì)胞的增殖影響。結(jié)果顯示:低濃度的H2O2(12~50μmol/L)刺激后的細(xì)胞數(shù)目及570 nm的吸光度值增加,活細(xì)胞數(shù)目增多;細(xì)胞流式術(shù)顯示低濃度過氧化氫細(xì)胞的DNA合成增加,細(xì)胞增殖明顯,說明低濃度的H2O2有明顯的促進(jìn)細(xì)胞增殖的作用。結(jié)果還顯示,中等劑量的H2O2(500μmol/L)可引起H9c2細(xì)胞散在性固縮壞死及溶解壞死。說明不同劑量的過氧化氫作用于H9c2細(xì)胞,會引起明顯不同的生物學(xué)效應(yīng)。我們前期實(shí)驗(yàn)顯示,WDR26與心肌缺血預(yù)適應(yīng)的發(fā)生密切相關(guān),且WDR26有抑制過氧化氫誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡的作用,那么活性氧促細(xì)胞增殖的機(jī)理是否與WDR26有關(guān),目前還不清楚。本實(shí)驗(yàn)選擇以Western Blot和RT-PCR的方法,研究WDR26在不同濃度及不同時間的H2O2處理H9c2心肌細(xì)胞后其表達(dá)的動態(tài)變化。結(jié)果發(fā)現(xiàn),低濃度H2O2(12~50μM)處理后,WDR26的m RNA表達(dá)增加,于4h達(dá)高峰,然后逐步降低,24h時仍高于非處理組。WDR26蛋白質(zhì)表達(dá)水平隨著H2O2濃度的增加而升高。運(yùn)用RNA干擾將WDR26基因沉默后,其促增殖作用明顯減弱。上述結(jié)果說明,低濃度的H2O2是通過上調(diào)WDR26的表達(dá)來促進(jìn)H9c2心肌細(xì)胞的增殖。
【關(guān)鍵詞】：過氧化氫 低濃度 WDR26 心肌細(xì)胞 增殖
【學(xué)位授予單位】：南華大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R541.4
【目錄】：

• 摘要4-6
• Abstract6-11
• 第1章 緒論11-15
• 第2章 低濃度過氧化氫促進(jìn)H9c2 細(xì)胞增殖的研究15-20
• 2.1 實(shí)驗(yàn)材料15-16
• 2.2 實(shí)驗(yàn)方法16-17
• 2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果17-19
• 2.4 小結(jié)19-20
• 第3章 H_2O_2促H9c2 細(xì)胞增殖過程中WDR26 基因的表達(dá)20-31
• 3.1 實(shí)驗(yàn)材料20-23
• 3.2 實(shí)驗(yàn)方法23-27
• 3.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果27-29
• 3.4 小結(jié)29-31
• 第4章 討論31-33
• 第5章 結(jié)論33-34
• 參考文獻(xiàn)34-39
• 文獻(xiàn)綜述39-49
• 參考文獻(xiàn)43-49
• 作者攻讀學(xué)位期間的發(fā)表的論文49-51
• 致謝51

【共引文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 榮彥生;呂鵬;王洪武;;腺苷聯(lián)合冷血含鉀停搏液在冠狀動脈旁路移植術(shù)中的應(yīng)用[J];山東醫(yī)藥;2014年36期

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 陳蒙蒙;一種非去極化心臟停跳液對血管內(nèi)皮的保護(hù)作用及機(jī)制研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2014年

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本文編號：591557