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抑制囊泡轉(zhuǎn)運(yùn)對大鼠內(nèi)皮祖細(xì)胞增殖及鈣庫操縱性鈣內(nèi)流的影響

發(fā)布時間:2017-07-02 20:26

  本文關(guān)鍵詞:抑制囊泡轉(zhuǎn)運(yùn)對大鼠內(nèi)皮祖細(xì)胞增殖及鈣庫操縱性鈣內(nèi)流的影響


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【摘要】:目的:研究囊泡轉(zhuǎn)運(yùn)在大鼠內(nèi)皮祖細(xì)胞(EPCs)增殖及鈣庫操縱性鈣內(nèi)流(SOCE)調(diào)控中的作用。方法:密度梯度離心法分離獲取、并用ac LDL-Di I和FITC-UEA-I熒光雙染鑒定脾源性EPCs。布雷菲德菌素A(BFA)抑制囊泡轉(zhuǎn)運(yùn),CCK-8法和實(shí)時無標(biāo)記細(xì)胞功能分析儀觀察EPCs增殖變化,流式細(xì)胞術(shù)檢測凋亡情況,并檢測囊泡轉(zhuǎn)運(yùn)關(guān)鍵蛋白ADP核糖基化因子GTP酶活化蛋白1(ARFGAP1)的表達(dá)。激光共聚焦顯微鏡觀察囊泡轉(zhuǎn)運(yùn)抑制后SOCE并用Western blot檢測SOCC復(fù)合體蛋白表達(dá),進(jìn)一步采用RNA干擾的方式觀察囊泡轉(zhuǎn)運(yùn)對瞬時受體電位通道1(TRPC1)蛋白表達(dá)及SOCE的影響。結(jié)果:雙染鑒定大鼠脾源性EPCs陽性率為82.53%±6.12%。BFA顯著抑制EPCs的增殖但對凋亡無明顯影響,同時ARFGAP1表達(dá)也明顯降低,說明EPCs的囊泡轉(zhuǎn)運(yùn)受到抑制。抑制EPCs囊泡轉(zhuǎn)運(yùn)顯著下調(diào)TRPC1的表達(dá),并降低SOCE。si TRPC1使EPCs的SOCE下降,但siTRPC1預(yù)處理并抑制囊泡轉(zhuǎn)運(yùn)并沒有使EPCs的SOCE進(jìn)一步降低。結(jié)論:抑制EPCs的囊泡轉(zhuǎn)運(yùn)可以抑制EPCs的增殖并通過下調(diào)TRPC1的表達(dá)降低SOCE水平。
【作者單位】: 第三軍醫(yī)大學(xué)新橋醫(yī)院全軍心血管病研究所;
【關(guān)鍵詞】內(nèi)皮祖細(xì)胞 囊泡轉(zhuǎn)運(yùn) 瞬時受體電位通道
【基金】:國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(No.81370211)
【分類號】:R543
【正文快照】: 血管內(nèi)皮損傷是動脈粥樣硬化發(fā)生的病理基礎(chǔ),血管損傷后,鄰近的內(nèi)皮細(xì)胞對損傷的血管內(nèi)皮進(jìn)行有限的修復(fù)。既往研究證實(shí),內(nèi)皮損傷后內(nèi)皮祖細(xì)胞(endothelial progenitor cells,EPCs)——內(nèi)皮細(xì)胞的前體細(xì)胞——通過動員到外周血,歸巢至損傷血管處,參與受損內(nèi)皮的修復(fù)。因此,研

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本文編號:511135

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