[目 的]比較風濕性二尖瓣狹窄(RMS)患者與二尖瓣脫垂患者病變瓣膜IL-35表達量是否存在差異,并進一步分析不同病變程度的風濕性二尖瓣狹窄與IL-35之間存在的相關關系。比較同等濃度IL-35條件下對風濕性二尖瓣狹窄患者來源及健康對照組來源的外周血單個核細胞(PBMC)進行刺激是否存在不同的效果。明確IL-35與風濕性二尖瓣狹窄病變瓣膜狹窄程度的相關性,初步探索IL-35的生物學作用之一刺激自分泌的作用。[方 法]1、收集以二尖瓣狹窄為主的風濕性二尖瓣狹窄患者病變瓣膜組織,根據二尖瓣狹窄程度分為中度、重度二尖瓣狹窄兩組及以二尖瓣脫垂患者病變瓣膜組織為對照組,分別為10例中度二尖瓣狹窄患者、12例重度二尖瓣狹窄患者、5例二尖瓣脫垂患者。其中,所有患者均行二尖瓣瓣膜置換手術。通過蛋白印跡法測定瓣膜組織中IL-35的相對表達量。2、收集RMS患者來源的PBMC及健康志愿者來源的PBMC,IL-35體外刺激PBMC獲得最佳的刺激條件200ng/mLIL-35刺激48h,并在此條件下,刺激不同來源的PBMC,應用酶聯免疫吸附技術測定刺激后PBMC胞內IL-35的表達量。[結 果]1、在瓣膜組織...

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【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖３．ＩＬ－１２家族的成員及各自的組成的亞基及信號傳導通路（修改自ＣｈｏｉＪ??ｅｔａｌ．Ｃｌｉｎｉｃａｌ?ｒｅｖｉｅｗｓ?ｉｎ?ａｌｌｅｒｇｙ＆?ｉｍｍｕｎｏｌｏｙ（２０１５）?４９?（３）：３２７－３３２）?〇??

ａｒｒｖｉｒｕｓ－ｉｎｄｕｃｅｄ??ｇｅｎｅ３，Ｅｂｉ３），兩條鏈之間通過二硫鍵相結合Ｉ４１１。Ｃｏｌｌｉｓｉｏｎ等人于２００７年最初??報道，ＩＬ－３５是胸腺來源的天然調節(jié)性Ｔ細胞（Ｎａｔｕｒａｌ?ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ?Ｔｃｅｌｌｓ，ｎＴｒｅｇｓ）??群體產生的，且具有強大的免....

圖４．Ａ．經胸心臟多普勒彩超下觀察到的ＲＭＳ患者的二尖瓣；Ｂ．經食??

圖４．Ａ．經胸心臟多普勒彩超下觀察到的ＲＭＳ患者的二尖瓣；Ｂ．經食??道心臟多普勒彩超下觀察到的ＲＭＳ患者的二尖瓣；Ｃ．正中開胸直下換??瓣手術觀察到的ＲＭＳ患者的二尖瓣．??２．２對照組的納入標準??診斷為先天性二尖瓣脫垂的患者，并進行二尖瓣置換或者二尖瓣成形術。其??他入組條....

圖５．為手術室所采不同病變程度的風濕性二尖瓣瓣膜組織

５．２．１血液樣本??待符合條件的入組病人進入手術室后，從中心靜脈置管中抽�。保担恚天o脈血，??分裝于５支３ｍＬ規(guī)格的ＥＤＴＡ抗凝管中，蓋緊蓋子后置于平面上輕輕滾動數次??充分混勻，動作迅速輕柔，防止凝血和溶血。隨后裝于冰盒中轉移至實驗室。若??可立即分離則置于室溫中平衡３０ｍｉ....

圖７．比較ＲＭＳ患者來源的ＰＢＭＣ與健康志愿者來源的ＰＢＭＣ在同等刺激??

圖６．前期我們探索合適的重組人ＩＬ－３５的濃度及刺激ＰＢＭＣ時間六孔板的??板布局。??３、經上述兩步實驗后，我們確定了最優(yōu)的刺激條件，即２００ｎｇ／ｍＬＩＬ－３５朿ＩＪ??激４８Ｌ為了明確ＲＭＳ患者來源的ＰＢＭＣ與健康志愿者來源的ＰＢＭＣ在相同刺??激條件下胞內ＩＬ－３５的表達....

本文編號：3976851