研究目的:肺血管重構(gòu)是肺動(dòng)脈高壓的重要病理改變。在肺血管重構(gòu)過(guò)程中,肺血管平滑肌細(xì)胞表型轉(zhuǎn)化,發(fā)生明顯的去分化。炎癥因子在平滑肌細(xì)胞去分化中扮演重要角色,而CD40/CD40L軸是介導(dǎo)炎癥調(diào)節(jié)的中心環(huán)節(jié)。本文圍繞CD40/CD40L軸調(diào)控平滑肌細(xì)胞去分化參與肺動(dòng)脈高壓血管重構(gòu)的機(jī)制開(kāi)展研究。研究方法:(1)用正常培養(yǎng)、sCD40L處理、缺氧誘導(dǎo)+sCD40L處理PASMCs,通過(guò)CCK8檢測(cè)細(xì)胞增殖能力,qRT-PCR和Western Blot測(cè)定各組PA-SMC表面收縮型和合成型標(biāo)志分子表達(dá)的變化,明確sCD40L及缺氧對(duì)PASMCs細(xì)胞生物學(xué)功能和分子表達(dá)影響。(2)通過(guò)ELISA檢測(cè)細(xì)胞cAMP濃度和PKA活性,Western Blot測(cè)定Ca2+內(nèi)流通道蛋白CaV1.2及外釋通道蛋白R(shí)YR2表達(dá)水平,Fura-2/AM熒光探針?lè)y(cè)定細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度,研究sCD40L和缺氧對(duì)PASMCs細(xì)胞cAMP/PKA信號(hào)通路活性以及Ca2+濃度的影響。(3)用地高辛降低細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度,研究細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度與PASMCs細(xì)胞生物學(xué)功能和分子表達(dá)的關(guān)系。(4)通過(guò)cAMP激動(dòng)劑激動(dòng)cA...

【文章頁(yè)數(shù)】：56 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
致謝
中文摘要
Abstract
縮略語(yǔ)
1.前言
2.材料和方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
3.實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    3.1 sCD40L/CD40影響PASMCs細(xì)胞生物學(xué)功能和分子表達(dá)
    3.2 sCD40L/CD40和缺氧對(duì)PASMCs細(xì)胞cAMP/PKA信號(hào)通路活性以及Ca2+濃度的影響
    3.3 地高辛能降低細(xì)胞內(nèi)Ca2+,有效抑制sCD40L和缺氧對(duì)PASMCs細(xì)胞生物學(xué)功能和分子表達(dá)的影響
    3.4 cAMP激動(dòng)劑能激動(dòng)cAMP/PKA,降低細(xì)胞內(nèi)Ca2+濃度,有效抑制sCD40L和缺氧對(duì)PASMCs細(xì)胞生物學(xué)功能和分子表達(dá)的影響
4 討論
5.結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
作者簡(jiǎn)歷



本文編號(hào)：3936078