背景：原發(fā)性高血壓（Essential hypertension, EH）是人類最為常見的心血管疾病之一，也是心力衰竭、冠心病和腦卒中等疾病的重要危險(xiǎn)因素，嚴(yán)重影響人類健康及壽命。目前多個(gè)研究表明線粒體基因（mtDNA）突變與高血壓發(fā)病存在相關(guān)性，即母系遺傳。相關(guān)研究指出，mtDNA突變可能是通過改變線粒體能量的合成、活性氧(reactive oxygen specie, ROS)的產(chǎn)生及鈣穩(wěn)態(tài)等線粒體功能來影響血壓的。那么線粒體功能與EH間存在怎樣的關(guān)系，在高血壓中是否發(fā)生了線粒體功能的改變，發(fā)生了怎樣的改變，這將為人類在線粒體基礎(chǔ)上研究高血壓發(fā)病機(jī)制提供有力的理論依據(jù)。 目的：研究自發(fā)性高血壓大鼠胸主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞（VSMCs）線粒體功能的變化。 方法：（1）取19—20周的雄性自發(fā)性高血壓大鼠（SHR）及相應(yīng)年齡段的雄性正常大鼠（WKY），利用貼壁法培養(yǎng)出VSMCs，取第3代穩(wěn)定的細(xì)胞作為研究對象；（2）鏡下觀察、比較高血壓組與正常組細(xì)胞的形態(tài)改變，利用熒光法檢測細(xì)胞內(nèi)ATP水平，并利用流式細(xì)胞儀檢測兩組細(xì)胞的ROS及線粒體膜電位水平；（3）取106的細(xì)胞，分別提取RNA，rea...

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【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖1制備VSMCs所用SHR大鼠

圖1制備VSMCs所用SHR大鼠經(jīng)75%的酒精浸泡消毒2-3min，橡皮筋迅速固定于解圖2制備VSMCs的超凈臺要經(jīng)過紫外燈常規(guī)消毒30min以上，酒精棉球擦拭超凈

圖2制備VSMCs的超凈臺在超凈臺中使用前要經(jīng)過紫外燈常規(guī)消毒30min以上，酒精棉球擦拭超凈臺臺面，酒精燈保

16圖2制備VSMCs的超凈臺要經(jīng)過紫外燈常規(guī)消毒30min以上，酒精棉球擦拭超凈及生長特點(diǎn)細(xì)胞的狀態(tài)與組織塊被剪碎的程度以及組織碎不一時(shí)，影響了組織的鋪平，一方面細(xì)胞爬出的），另外就是細(xì)胞長出的狀態(tài)普遍都比較差，不得過碎或者組織塊過大，細(xì)胞都不易長出。貼壁時(shí)間過長....

圖3自平滑肌中組織塊生長中的VSMCs（100×）

是正常大鼠平滑肌細(xì)胞一般提早半天傳代。而狀態(tài)好于高血壓的平滑肌細(xì)胞（主要表現(xiàn)在細(xì)還有生長的速度等）。一般在第5天就會從平滑肌組織邊緣爬出（如態(tài)大小不一，疏密程度不一，生長較為雜亂，但豐富。一般在7天左右即可以進(jìn)行半換液，而底（如圖4），細(xì)胞的形態(tài)大小不一，平滑肌細(xì)質(zhì)豐富....

圖4爬滿瓶底的VSMCs（100×）

圖4爬滿瓶底的VSMCs（100×）胞相比，細(xì)胞間生長緊密相連，呈接觸抑制性生長狀態(tài)有剛長出來時(shí)透亮。圖5消化后懸浮的VSMCs（100×）

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