丙戊酸對體外培養(yǎng)人紅系細胞γ-珠蛋白基因表達及細胞增殖的影響
發(fā)布時間:2024-01-29 18:31
目的通過人外周血紅系細胞培養(yǎng),研究丙戊酸(VPA)對γ-珠蛋白基因表達情況,以及對紅系細胞生長、紅系細胞集落形成的影響,探討VPA對紅系細胞的作用情況。 方法分別以不同濃度VPA(0mmol/L、0.5mmol/L、1.0mmol/L、2.0mmol/L、3.0mmol/L)作用于培養(yǎng)的紅系細胞,于24h、48h、72h后檢測各項指標。收集培養(yǎng)體系細胞常規(guī)瑞士染色,采用光學(xué)顯微鏡觀察紅系細胞形態(tài)學(xué)特征,用Cell Counting Kit-8(CCK-8)試劑檢測細胞存活率,使用甲基纖維素培養(yǎng)基培養(yǎng)紅系細胞集落,觀察不同濃度VPA對集落形成能力的影響,通過實時熒光定量RT-PCR法檢測紅系細胞γ-珠蛋白基因表達的改變。 結(jié)果VPA對紅系細胞的生長抑制作用有濃度和時間依賴性。細胞存活率隨VPA濃度及作用時間呈反比,濃度因素及時間因素有交互作用,細胞存活率由高到低排列,VPA濃度依次為0.5mmol/L、1.0mmol/L、2.0mmol/L、3.0mmol/L,時間依次為24h、48h、72h。VPA對紅系細胞CFU-E形成能力的影響有濃度依賴性。形成的集落數(shù)量隨濃度的增加而降低,由高到...
【文章頁數(shù)】:41 頁
【學(xué)位級別】:碩士
本文編號:3888622
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圖2紅系細胞形態(tài)學(xué)特征:A:第四天紅系細胞;B:第八天紅系細胞Fig.2morphologicalcharacteroferythroidcellA800×B800×
圖7實時熒光定量RT-PCR擴增曲線,A為為GAPDH內(nèi)參基因,B為Y-珠蛋白基因
圖8實時熒光定量RT-PCR溶解曲線C為GAPDH內(nèi)參基因,D為γ-珠蛋白基因
圖3紅系集落特征:A為第七天形成集落,B為第八天形成集落
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