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缺氧誘導(dǎo)因子-1在心肌細(xì)胞缺氧、復(fù)氧損傷中的作用及其信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)與藥物干預(yù)研究

發(fā)布時(shí)間:2023-08-13 18:50
  目的觀察阿托伐他汀(ATV)和PI3K信號(hào)通路的抑制劑渥曼青霉素(WT)對(duì)心肌細(xì)胞缺氧/復(fù)氧(H/R)損傷的影響,及其對(duì)缺氧誘導(dǎo)因子-1α(HIF-1α)、內(nèi)皮細(xì)胞生長因子(VEGF)、葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白-1(GLUT-1)和血紅素加氧酶-1(HO-1)mRNA表達(dá)的影響,探討阿托伐他汀和PI3K信號(hào)通路保護(hù)心肌細(xì)胞缺氧復(fù)氧損傷的機(jī)制,為臨床預(yù)防和治療心肌缺血再灌注損傷提供新的思路。 方法分離SD乳鼠(出生1~3天)心肌細(xì)胞進(jìn)行原代培養(yǎng),免疫細(xì)胞化學(xué)鑒定心肌細(xì)胞;建立H/R模型;取培養(yǎng)第3~4天的心肌細(xì)胞隨機(jī)分成5組:正常對(duì)照組(Control組)、H/R組、H/R+ATV組、H/R+WT組和H/R+ATV+WT組;倒置顯微鏡下觀察心肌細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化并計(jì)數(shù)細(xì)胞搏動(dòng)頻率;應(yīng)用MTS法檢測心肌細(xì)胞的存活率;化學(xué)發(fā)光免疫分析法檢測心肌細(xì)胞特異性損傷指標(biāo)肌鈣蛋白I(cTnI)的含量;采用SYBR GREEN熒光定量PCR檢測HIF-1α、VEGF、GLUT-1和HO-1mRNA表達(dá)水平。應(yīng)用SPSS19.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,組間比較采用One-Way ANOVA分析,兩兩比較采用LSD分析, P&...

【文章頁數(shù)】:51 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
目錄
縮略詞表
摘要
Abstract
前言
材料方法
    一、實(shí)驗(yàn)材料
        (一) 主要試劑
        (二) 主要器材
        (三) 主要試劑的配制
    二、實(shí)驗(yàn)方法
        (一) 乳鼠心肌細(xì)胞原代培養(yǎng)及鑒定
        (二) 乳鼠心肌細(xì)胞缺氧復(fù)氧(H/R)模型的建立及鑒定
        (三) 實(shí)驗(yàn)分組
        (四) 各組心肌細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察及搏動(dòng)頻率的比較
        (五) 心肌細(xì)胞特異性損傷指標(biāo)肌鈣蛋白 I(cTnI)水平的測定
        (六) MTS 法檢測心肌細(xì)胞的存活率
        (七) 心肌細(xì)胞 HIF-1α、VEGF、GLUT-1、HO-1mRNA 表達(dá)的檢測
        (八) 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
實(shí)驗(yàn)結(jié)果
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝
綜述
    參考文獻(xiàn)



本文編號(hào):3841744

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