紅細(xì)胞再生障礙性貧血（Diamond-Blackfan anemia, DBA）是一種遺傳性骨髓衰竭綜合征，患者主要表現(xiàn)為先天性紅細(xì)胞發(fā)育不良以及相關(guān)的身體畸形，嚴(yán)重影響其生命健康。臨床研究發(fā)現(xiàn)有多于50%的患者伴有不同的核糖體基因突變，其中有將近20%的患者表現(xiàn)為核糖體蛋白R(shí)PL5和RPL11異常。然而在DBA患者中，RPL5和RPL11缺陷致使造血功能異常的機(jī)制尚未被完全闡明。本研究以斑馬魚為模式生物，通過(guò)顯微注射嗎啡琳類似物修飾的反義寡核苷酸RPL5MO（morpholino）和RPL11MO分別獲取RPL5和RPL11缺陷的斑馬魚胚胎，通過(guò)全基因組RNA-Seq數(shù)據(jù)分析，O-染色，蘇丹黑B-染色，血細(xì)胞相關(guān)標(biāo)記基因的胚胎整體原位雜交以及血液血管相關(guān)標(biāo)記基因的實(shí)時(shí)定量來(lái)檢測(cè)RPL5和RPL11缺陷對(duì)血液生發(fā)的影響，并分析證實(shí)RPL5和RPL11缺失導(dǎo)致造血功能不足；通過(guò)相應(yīng)RPL5MO和RPL11MO分別與p53MO共注射實(shí)驗(yàn)以及Western Blotting檢測(cè)磷酸化的AKT（pAKT），磷酸化的ERK（pERK）各自含量的變化，從而探索RPL5和RPL11缺失致使造血功能不...

【文章頁(yè)數(shù)】：79 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略詞表
引言
1 材料與方法
    1.1 實(shí)驗(yàn)材料
    1.2 實(shí)驗(yàn)方法
2 結(jié)果
    2.1 RPL5 和 RPL11 缺陷對(duì)斑馬魚胚胎形態(tài)特征的影響
    2.2 檢驗(yàn) RPL5 MO 和 RPL11 MO 功效的載體構(gòu)建及檢驗(yàn)
    2.3 RPL5 和 RPL11 缺陷的斑馬魚生物信息學(xué)分析
    2.4 RPL5 和 RPL11 缺陷的斑馬魚胚胎經(jīng)典染色
    2.5 血液相關(guān)標(biāo)記基因探針的制備
    2.6 RPL5 和 RPL11 缺陷的斑馬魚胚胎原位雜交
    2.7 p53 途徑與 RPL5 和 RPL11 缺陷致使造血功能不足
    2.8. RT-PCR 分析血液相關(guān)標(biāo)記基因的表達(dá)
    2.9 PI3K/AKT,MAPK/ERK 通路與 RPL 缺陷致使造血功能不足
3 討論
    3.1 本研究概述
    3.2 通過(guò) MO 技術(shù)獲取 RPL5 和 RPL11 缺陷的斑馬魚胚胎
    3.3 RPL5 和 RPL11 缺陷致使造血功能不足
    3.4 RPL5 和 RPL11 缺陷致使造血功能不足的相關(guān)信號(hào)機(jī)制
致謝
參考文獻(xiàn)
碩士期間研究成果
附錄



本文編號(hào)：3824693