目的:探討微小RNA-142-3p(miR-142-3p)對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化(atherosclerosis,AS)進(jìn)程中人主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞(human aortic endothelial cells,HAECs)凋亡的影響及作用機(jī)制。方法:HAECs經(jīng)氧化型低密度脂蛋白(oxi?dized low-density lipoprotein,ox-LDL)作用后,采用RT-qPCR檢測(cè)miR-142-3p的表達(dá)水平。Annexin V-FITC/PI雙染法流式細(xì)胞術(shù)(flow cytometry,FCM)和caspase-3活性檢測(cè)試劑盒檢測(cè)細(xì)胞凋亡。使用Target Scan等生物信息學(xué)軟件預(yù)測(cè)miR-142-3p的潛在靶基因,雙螢光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)驗(yàn)證miR-142-3p與Rictor mRNA 3′-UTR直接靶向結(jié)合。結(jié)果:在ox-LDL誘導(dǎo)HAECs凋亡過程中miR-142-3p表達(dá)顯著上調(diào)(P<0.05,P<0.01)。過表達(dá)miR-142-3p促進(jìn)HAECs凋亡,相反,抑制miR-142-3p的表達(dá)水平可以部分程度緩解ox-LDL介導(dǎo)的內(nèi)皮細(xì)胞(endothelia...

【文章頁數(shù)】：10 頁

【文章目錄】：
材料和方法
    1 材料
    2 方法
        2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        2.2 細(xì)胞表型鑒定
        2.3 細(xì)胞轉(zhuǎn)染和細(xì)胞處理
        2.4 caspase-3活性檢測(cè)和流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡
        2.5 CCK-8實(shí)驗(yàn)測(cè)定細(xì)胞活力
        2.6 RT-q PCR檢測(cè)mi RNA的水平
        2.7 Western blot檢測(cè)蛋白水平
        2.8 RT-q PCR檢測(cè)m RNA的表達(dá)
        2.9 雙螢光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)
    3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
結(jié)果
    1血管內(nèi)皮細(xì)胞鑒定
    2 mi R-142-3p在HAECs凋亡過程中表達(dá)上調(diào)
    3 Rictor是mi R-142-3p在HAECs中的靶基因之一
    4 下調(diào)mi R-142-3p抑制HAECs的凋亡
    5 mi R-142-3p通過靶向Rictor調(diào)節(jié)HAECs凋亡
    6 Akt/e NOS信號(hào)通路參與了mi R-142-3p對(duì)HAECs凋亡的調(diào)控
討論



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