目的:探討SRF在低氧誘導大鼠肺動脈平滑肌細胞增殖中的作用方法:1.大鼠肺動脈平滑肌細胞(PASMCs)的原代培養(yǎng):采用酶消化法從健康SD大鼠體內(nèi)分離出PASMCs進行體外培養(yǎng),采用免疫細胞化學鑒定PASMCs,取3-4代細胞用于后續(xù)的實驗。2.低氧對細胞增殖的影響:設(shè)置常氧對照組(21%),以及低氧組,低氧組通過低氧培養(yǎng)箱設(shè)置四個不同氧濃度,分別為10%,5%,2%,1%,培養(yǎng)大鼠PASMCs。設(shè)定24h、48h和72h不同時間段。描繪各組細胞生長曲線,并用MTT法來觀察細胞生長情況,檢測其細胞增殖活性。3.低氧條件下SRF對細胞增殖的影響:設(shè)計出針對大鼠SRF基因的si RNA序列,實驗分成四組,分別為常氧組、常氧干預(yù)組、低氧組及低氧干預(yù)組。常氧培養(yǎng)條件為:21%O2、74%N2和5%CO2,低氧組培養(yǎng)條件為:1%02、94%N2、5%CO2。干預(yù)組采用的是設(shè)計SRF干擾序列即si RNA,將SRF si RNA轉(zhuǎn)染至干預(yù)組PASMCs中,分別設(shè)定24h、48h和72h三個不同的時間點。采用免疫細胞化學染色法,觀察SRF在PASMCs中表達情況。并采用real-time PCR和W...

【文章頁數(shù)】：50 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
英文縮略詞表
中文摘要
英文摘要
1.前言
2.材料與方法
3.實驗結(jié)果
4.討論
5.結(jié)論
參考文獻
附錄
致謝
綜述
    參考文獻



本文編號：3759422