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miR-181b調控Mex3B蛋白對動脈粥樣硬化斑塊形成及分子機制研究

發(fā)布時間:2022-10-17 13:23
  目的探討miR-181b靶向調控肌肉過量蛋白-3B(muscle excess protein-3,Mex3B)的表達在動脈粥樣硬化(atherosclerosis,AS)斑塊的形成及其分子作用機制。方法將雄性SD大鼠隨機分成正常組、模型組、對照組和實驗組。對照組和實驗組分別尾靜脈注射miR-181b-inhibitor-NC、miR-181b-inhibitor的混合液,正常組、模型組注射等劑量的生理鹽水;注射完畢24 h后將維生素D3以600000 U/kg的劑量一次性腹腔注射進模型組、對照組、實驗組大鼠體內后,每日以100 g高脂飼料喂養(yǎng)構建AS模型大鼠,正常組大鼠始終以等量基礎飼料喂養(yǎng)。喂養(yǎng)60 d后,對大鼠進行頸動脈超聲檢查,測量管腔動脈后壁內膜-中層厚度(intima-media thickness of the posterior wall of the artery,IMT)和斑塊面積(square,S)參數。RT-PCR檢測各組miR-181b和Mex3B蛋白的mRNA的表達;Western blot檢測各組Mex3B蛋白的表達水平;熒光素酶報告基因分析miR-181... 

【文章頁數】:10 頁

【文章目錄】:
1 材料和方法
    1.1 實驗動物
    1.2 主要試劑與儀器
    1.3 實驗方法
        1.3.1 動脈粥樣硬化動物模型構建及實驗分組
        1.3.2 Vevo 2100超聲儀對各組大鼠的動脈檢測
        1.3.3 HE染色、油紅O染色檢測各組大鼠AS病理改變
        1.3.4 TUNEL染色檢測各組大鼠中動脈組織的細胞凋亡
        1.3.5 免疫組化檢測各組大鼠中動脈組織中IL-6、TNF-α和MMP-9的表達
        1.3.6 qRT-PCR檢測miR-181b和Mex3B蛋白的mRNA的表達
        1.3.7 熒光素酶報告基因分析
        1.3.8 Western blot檢測各組標本中Mex3B、IL-6、TNF-α和MMP-9蛋白的表達
    1.4 統(tǒng)計學方法
2 結果
    2.1 各組大鼠的頸動脈超聲檢測結果
    2.2 各組大鼠動脈病理改變檢測結果
    2.3 免疫組化檢測各組大鼠AS中斑塊的穩(wěn)定
    2.4 TUNEL染色檢測各組大鼠動脈細胞的凋亡
    2.5 各組大鼠動脈中IL-6和TNF-α的表達
    2.6 Western blot檢測各組大鼠動脈中Mex3B蛋白的表達
    2.7 qRT-PCR檢測各組大鼠動脈中miR-181b和Mex3B蛋白的mRNA的表達
    2.8 熒光素酶報告基因分析結果
3 討論


【參考文獻】:
期刊論文
[1]他汀類藥物治療急性腦梗死對患者頸動脈粥樣硬化斑塊及炎癥反應的影響[J]. 紀利利,李美杰,姚麗娜,馮志霞,郭書琴,岳術義.  現代中西醫(yī)結合雜志. 2018(22)
[2]藁本內酯上調miR-181b減輕氧化低密度脂蛋白誘導人臍靜脈內皮細胞炎癥損傷[J]. 黃志勇,田廣永,曹玲,詹堅宏,趙丹丹,于云紅,周鳳華.  中國比較醫(yī)學雜志. 2018(07)
[3]涉及脂質代謝的miRNA及其對動脈粥樣硬化發(fā)展和治療的進展[J]. 翟科峰,段紅,李潔,汪俊軍.  基因組學與應用生物學. 2018(12)
[4]miR-181b-5p對胃癌細胞HGC-27增殖和凋亡的影響[J]. 張笑添,常新劍,宋林林.  中國細胞生物學學報. 2017(02)
[5]補陽還五湯對動脈粥樣硬化模型大鼠主動脈Rho激酶及NF-κB p65 mRNA表達的影響[J]. 張紅珍,李麗,焦瑞,張英,錢艷.  中國中西醫(yī)結合雜志. 2015(12)
[6]動脈粥樣硬化患者血清微小RNA-181b的異常表達及其作用[J]. 李曉麗,曹國良.  中華心血管病雜志. 2015 (06)



本文編號:3692147

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