背景與目的：動脈粥樣硬化性心血管疾病是導(dǎo)致人類死亡的首要原因。而血脂異常是其最主要的危險因素之一。盡管他汀類藥物的有效使用，甚至是劑量的加倍，且當(dāng)LDL-C降至70mg/dL以下時，心血管剩余風(fēng)險仍然存在。因此，為了更進一步降低心血管剩余風(fēng)險，人們逐漸又開始了對其他影響心血管疾病風(fēng)險因素的探索，如HDL-C。高胰島素血癥/胰島素抵抗是動脈粥樣硬化性心血管疾病的主要危險因素。HDL水平的降低常是高胰島素血癥最主要血脂譜改變之一，但其具體機制仍不明確。本研究以3T3-L1脂肪細胞為研究對象，旨在討論高胰島素環(huán)境對HDL生成相關(guān)功能蛋白ABCA1的影響，并且探索其具體信號通路機制，為心血管剩余風(fēng)險的干預(yù)提供新的基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)證據(jù)。方法：本實驗以3T3-L1前脂肪細胞為研究對象，通過“雞尾酒法”誘導(dǎo)分化為成熟的脂肪細胞；予以不同濃度的胰島素（0nmol/L、10nmol/L、102nmol/L、103nmol/L）刺激，利用葡萄糖氧化酶法（GOD）檢測細胞培養(yǎng)基剩余葡萄糖含量以確定是否成功建立胰島素抵抗模型；利用液體閃爍計數(shù)技術(shù)檢測細胞3H標記膽固醇流出；采用SYBR Green I嵌合熒光法通過實... 

【文章來源】：南華大學(xué)湖南省

【文章頁數(shù)】：50 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
目錄
縮略詞表
中文摘要
ABSTRACT
前言
主要實驗材料和試劑配置方法
    一、主要實驗試劑
    二、主要實驗儀器
    三、主要試劑的配置方法
主要實驗技術(shù)與方法
    一、小鼠 3T3-L1 前脂肪細胞的培養(yǎng)及誘導(dǎo)分化
    二、油紅 O 染色
    三、葡萄糖氧化酶（GOD）法葡萄糖消耗測定
    四、3H 標記膽固醇流出實驗測定
    五、實時熒光定量 PCR（Real-Time PCR）檢測 ABCA1 mRNA 表達
    六、蛋白印跡法（Western blot）檢測 ABCA1 蛋白表達
    七、統(tǒng)計學(xué)處理
實驗結(jié)果
    一、3T3-L1 前脂肪細胞經(jīng)誘導(dǎo)分化后為成熟的脂肪細胞
    二、胰島素抵抗模型的建立
    三、胰島素呈濃度和時間依賴性抑制 3T3-L1 脂肪細胞膽固醇流出
    四、不同濃度的胰島素對 ABCA1 mRNA 表達均無明顯影響
    五、胰島素呈濃度和時間依賴性抑制 ABCA1 蛋白水平的表達
    六、胰島素可通過 calpain 和 proteasome 途徑促進 ABCA1 蛋白的降解
    七、胰島素是通過 IRS/PI3K/Akt 信號通路介導(dǎo) ABCA1 蛋白的降解
討論
結(jié)論
參考文獻
文獻綜述
    參考文獻
碩士期間研究成果
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
[1]甘油三酯與冠心病發(fā)病關(guān)系及機制的研究進展[J]. 林旻潔,趙水平.  中國動脈硬化雜志. 2011(12)
[2]肥胖與高密度脂蛋白代謝異常研究進展[J]. 寧小暉,彭道泉.  中國動脈硬化雜志. 2009(12)



本文編號：3635035