EphrinB2對fas配體誘導的人臍靜脈內(nèi)皮細胞凋亡的影響及機制探討
發(fā)布時間:2021-12-21 22:15
研究背景:近年來隨著分子心血管病學的研究深入,越來越多的資料研究表明血管內(nèi)皮細胞(VECs)凋亡可能通過多種途徑啟動并加速動脈粥樣硬化(AS)的發(fā)生,發(fā)展過程。該凋亡途徑主要通過fas通路誘導,Fas蛋白與Fas配體組成Fas系統(tǒng),二者的結(jié)合導致靶細胞走向滅亡。因此,防止VECs凋亡,修復受損的VECs可以減緩初期AS進一步發(fā)展,保護VECs的藥物也助于預防并治療早期AS。ephrinB2作為一種促血管生成作用的生長因子,可能在VEGF信號通路中扮演一個總調(diào)控者的角色,并在血管生成中發(fā)揮核心作用。心梗動物模型顯不,EphrinB2蛋白治療能夠抑制多種細胞凋亡,尤其是血管內(nèi)皮細胞明顯增多,促進血管生成,有望成為保護內(nèi)皮細胞抗AS的新靶點。然而目前關(guān)于ephrinB2的促血管生成作用僅限于動物模型試驗以及體外細胞增殖遷移等現(xiàn)象研究,它究竟是通過什么機制抑制內(nèi)皮細胞凋亡,影響血管生成卻鮮有報道。目的:檢測ephrinB2蛋白對fas通路誘導的內(nèi)皮細胞凋亡的影響,探討ephrinB2蛋白抑制內(nèi)皮細胞凋亡的可能機制。方法:將原代分離、培養(yǎng)的HUVEC細胞以rhfasl=7.5ng/ml,ephr...
【文章來源】:廈門大學福建省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:62 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
第一章 前言
1.1 動脈粥樣硬化的概述
1.1.1 動脈粥樣硬化的流行病學
1.1.2 動脈粥樣硬化的定義
1.1.3 動脈粥樣硬化的病因和危害
1.2 內(nèi)皮細胞凋亡與動脈粥樣硬化
1.3 ephrinB2蛋白
1.3.1 ephrinB2介紹
1.3.2 ephrinB2與血管生成
1.3.3 ephrinB2抗凋亡研究現(xiàn)狀
1.4 本論文研究的意義和主要內(nèi)容
第二章 實驗材料與方法
2.1 實驗材料
2.1.1 實驗器材
2.1.2 實驗試劑
2.1.3 主要試劑的配置
2.2 實驗方法
2.2.1 人臍靜脈內(nèi)皮細胞的培養(yǎng)與鑒定
2.2.2 細胞活性檢測
2.2.3 流式細胞儀測定細胞凋亡
2.2.4 WB測定Fas凋亡通道上caspase3、Pakt表達量
第三章 結(jié)果與分析
3.1 人臍靜脈內(nèi)皮細胞的培養(yǎng)與鑒定實驗結(jié)果
3.1.1 培養(yǎng)細胞的形態(tài)學觀察
3.1.2 免疫組織化學染色鑒定
3.1.3 小結(jié)
3.2 CCK8實驗結(jié)果
3.2.1 fasl誘導內(nèi)皮細胞凋亡結(jié)果
3.2.2 ephrinB2促進細胞增值結(jié)果
3.2.3 ephrinB2干預fasl誘導內(nèi)皮細胞凋亡結(jié)果
3.3 流式細胞分析儀測定凋亡結(jié)果
3.4 WB實驗結(jié)果
3.5 機制探討
3.5.1 內(nèi)皮細胞MEK激活蛋白P-erk表達量
3.5.2 加MEK1/2抑制劑U0126
3.5.3 加Akt抑制劑Akti1/2
3.6 小結(jié)
第四章 討論與展望
4.1 討論
4.2 結(jié)論
4.3 不足與展望
參考文獻
縮略語表
綜述
摘要
參考文獻
致謝
【參考文獻】:
期刊論文
[1]巴戟天寡糖促進雞胚絨毛尿囊膜血管生成研究[J]. 楊景柯,馮國清,于爽,喬鵬. 中國中藥雜志. 2010(03)
[2]巴戟天寡糖對大鼠心肌缺血再灌注損傷的影響[J]. 汪寶軍,竹潤芳,岳云霄,馮國清,胡香杰,于爽. 中國醫(yī)藥導刊. 2009(04)
[3]巴戟天正丁醇提取物對乳鼠心肌細胞缺氧/復氧損傷后炎性細胞因子的影響[J]. 韓聯(lián)合,馮國清,張賀鳴. 中國醫(yī)院藥學雜志. 2008(17)
[4]VEGF165轉(zhuǎn)染大鼠血管內(nèi)皮細胞對新生血管形成影響的實驗研究[J]. 程穎,劉永鋒,張佳林,李鐵民,趙寧. 生物醫(yī)學工程與臨床. 2007(02)
[5]血管內(nèi)皮祖細胞研究進展及在整形外科的應用前景[J]. 易成剛,郭樹忠,張琳西. 中華整形外科雜志. 2004(04)
[6]膀胱癌血清中MMP-9與VEGF水平檢測及意義[J]. 管考鵬,侯樹坤,閆征,葉海云. 中華外科雜志. 2003(06)
[7]治療性血管生成的研究進展[J]. 樊粵光,劉建仁,曾展鵬. 中國藥物與臨床. 2003(03)
本文編號:3545274
【文章來源】:廈門大學福建省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:62 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
第一章 前言
1.1 動脈粥樣硬化的概述
1.1.1 動脈粥樣硬化的流行病學
1.1.2 動脈粥樣硬化的定義
1.1.3 動脈粥樣硬化的病因和危害
1.2 內(nèi)皮細胞凋亡與動脈粥樣硬化
1.3 ephrinB2蛋白
1.3.1 ephrinB2介紹
1.3.2 ephrinB2與血管生成
1.3.3 ephrinB2抗凋亡研究現(xiàn)狀
1.4 本論文研究的意義和主要內(nèi)容
第二章 實驗材料與方法
2.1 實驗材料
2.1.1 實驗器材
2.1.2 實驗試劑
2.1.3 主要試劑的配置
2.2 實驗方法
2.2.1 人臍靜脈內(nèi)皮細胞的培養(yǎng)與鑒定
2.2.2 細胞活性檢測
2.2.3 流式細胞儀測定細胞凋亡
2.2.4 WB測定Fas凋亡通道上caspase3、Pakt表達量
第三章 結(jié)果與分析
3.1 人臍靜脈內(nèi)皮細胞的培養(yǎng)與鑒定實驗結(jié)果
3.1.1 培養(yǎng)細胞的形態(tài)學觀察
3.1.2 免疫組織化學染色鑒定
3.1.3 小結(jié)
3.2 CCK8實驗結(jié)果
3.2.1 fasl誘導內(nèi)皮細胞凋亡結(jié)果
3.2.2 ephrinB2促進細胞增值結(jié)果
3.2.3 ephrinB2干預fasl誘導內(nèi)皮細胞凋亡結(jié)果
3.3 流式細胞分析儀測定凋亡結(jié)果
3.4 WB實驗結(jié)果
3.5 機制探討
3.5.1 內(nèi)皮細胞MEK激活蛋白P-erk表達量
3.5.2 加MEK1/2抑制劑U0126
3.5.3 加Akt抑制劑Akti1/2
3.6 小結(jié)
第四章 討論與展望
4.1 討論
4.2 結(jié)論
4.3 不足與展望
參考文獻
縮略語表
綜述
摘要
參考文獻
致謝
【參考文獻】:
期刊論文
[1]巴戟天寡糖促進雞胚絨毛尿囊膜血管生成研究[J]. 楊景柯,馮國清,于爽,喬鵬. 中國中藥雜志. 2010(03)
[2]巴戟天寡糖對大鼠心肌缺血再灌注損傷的影響[J]. 汪寶軍,竹潤芳,岳云霄,馮國清,胡香杰,于爽. 中國醫(yī)藥導刊. 2009(04)
[3]巴戟天正丁醇提取物對乳鼠心肌細胞缺氧/復氧損傷后炎性細胞因子的影響[J]. 韓聯(lián)合,馮國清,張賀鳴. 中國醫(yī)院藥學雜志. 2008(17)
[4]VEGF165轉(zhuǎn)染大鼠血管內(nèi)皮細胞對新生血管形成影響的實驗研究[J]. 程穎,劉永鋒,張佳林,李鐵民,趙寧. 生物醫(yī)學工程與臨床. 2007(02)
[5]血管內(nèi)皮祖細胞研究進展及在整形外科的應用前景[J]. 易成剛,郭樹忠,張琳西. 中華整形外科雜志. 2004(04)
[6]膀胱癌血清中MMP-9與VEGF水平檢測及意義[J]. 管考鵬,侯樹坤,閆征,葉海云. 中華外科雜志. 2003(06)
[7]治療性血管生成的研究進展[J]. 樊粵光,劉建仁,曾展鵬. 中國藥物與臨床. 2003(03)
本文編號:3545274
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