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Apelin分子在人臍帶間充質(zhì)干細胞定向心肌分化中的調(diào)控作用研究

發(fā)布時間:2021-10-11 05:37
  目的:體外分離培養(yǎng)人臍帶間充質(zhì)干細胞(human umbilical cord-MSCs,hUC-MSCs),并制備攜帶siRNA-apelin、apelin標記基因的慢病毒載體轉(zhuǎn)染的hUC-MSCs。方法:組織塊貼壁培養(yǎng)法培養(yǎng)hUC-MSCs,流式細胞儀測定hUC-MSCs表面免疫標記、成骨、成脂細胞誘導分化;將構(gòu)建的apelin-siRNA、apelin基因慢病毒載體轉(zhuǎn)染P3代hUC-MSCs,實驗分為干擾組、空白組和過表達組。轉(zhuǎn)染后第4天采用RT-PCR(real time-photo conductive relay,RT-PCR)、western-blot方法檢測靶基因apelin的抑制、過表達效果。結(jié)果:流式細胞儀鑒定結(jié)果表明:hUC-MSCs表達CD44、CD90、CD105、CD73、HLA-ABC,不表達CD34、CD45、HLA-DR;組織化學染色顯示茜素紅、油紅染色陽性。RT-PCR檢測示空白組apelin mRNA的表達是干擾組的16.60±2.30倍;過表達組apelin mRNA的表達是空白組的1.59±0.10倍。western-blot顯示:過表達組的細... 

【文章來源】:安徽醫(yī)科大學安徽省

【文章頁數(shù)】:60 頁

【學位級別】:碩士

【文章目錄】:
英文縮略詞表
中文摘要
Abstract
前言
    參考文獻
第一部分 攜帶 siRNA-apelin、apelin 基因的慢病毒載體轉(zhuǎn)染人臍帶華通膠間充質(zhì)干細胞
    1 實驗材料
    2 實驗方法
    3 結(jié)果
    4討論
    參考文獻
第二部分 apelin對臍帶間充質(zhì)干細胞向心肌細胞分化的影響
    1 材料和方法
    2 實驗方法
    3 實驗結(jié)果
    4 討論
    參考文獻
附錄
致謝
綜述
    參考文獻


【參考文獻】:
期刊論文
[1]慢病毒載體介導apelin基因轉(zhuǎn)染人臍帶間充質(zhì)干細胞的實驗研究[J]. 王力,張寧坤,徐小紅,鄭楠,高連如,朱智明.  天津醫(yī)藥. 2013(12)
[2]Apelin-13對5-Aza誘導臍帶間充質(zhì)干細胞向心肌細胞分化的影響[J]. 徐小紅,王力,張寧坤,鄭楠,高連如,朱智明.  解放軍醫(yī)學雜志. 2013(10)
[3]基于miR30骨架的HPSE-shRNA慢病毒載體的構(gòu)建及其效應(yīng)研究[J]. 劉曉艷,方紅,朱定仙,張妤.  浙江大學學報(醫(yī)學版). 2013(01)
[4]基因修飾干細胞治療缺血性心臟病的現(xiàn)狀與前景[J]. 姚永釗,馬翔.  中國組織工程研究與臨床康復. 2011(40)
[5]力學拉伸對經(jīng)5-氮胞苷誘導的間充質(zhì)干細胞向心肌細胞分化的影響[J]. 郭勇,張西正,李瑞欣,張春秋,郭春,張彥軍,閆玉仙.  醫(yī)用生物力學. 2009(S1)
[6]不同誘導條件對體外誘導骨髓間充質(zhì)干細胞向心肌樣細胞分化的影響[J]. 王夢洪,文淵,謝安,汪泱,張智亮,黃俊.  中國組織工程研究與臨床康復. 2007(42)
[7]丹參誘導人臍血間充質(zhì)干細胞分化為神經(jīng)樣細胞[J]. 馬廉,馮學永,楊立業(yè),謝慶東,羅敏潔,黃天華.  實用兒科臨床雜志. 2005(11)
[8]二甲亞砜誘導人骨髓基質(zhì)干細胞心肌分化中的基因表達[J]. 史劍慧,胡昕嬰,牛玉宏,葛均波.  復旦學報(醫(yī)學版). 2004(05)



本文編號:3429894

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