第一部分p16對(duì)阿托伐他汀抑制VSMCs增殖遷移作用的影響目的:研究阿托伐他汀對(duì)血管平滑肌細(xì)胞（vascular smooth muscle cells,VSMCs）增殖遷移及凋亡的作用,以及p16在其中發(fā)揮的作用。方法:原代培養(yǎng)大鼠主動(dòng)脈VSMCs并進(jìn)行免疫熒光鑒定;以不同濃度阿托伐他�。�0、0.5、1.0、2.0μM）干預(yù)VSMCs,CCK-8檢測(cè)阿托伐他汀對(duì)VSMCs增殖的作用;Transwell小室檢測(cè)阿托伐他汀對(duì)VSMCs遷移的作用;Annexin-V/PI雙染色法檢測(cè)阿托伐他汀對(duì)VSMCs凋亡的作用;q-PCR及Western blot檢測(cè)阿托伐他汀對(duì)p16、p53表達(dá)的影響;用短發(fā)夾RNA（sh RNA）沉默p16基因,觀察p16介導(dǎo)阿托伐他汀對(duì)VSMCs增殖遷移的影響。結(jié)果:（1）與對(duì)照組相比,阿托伐他汀以濃度依賴性方式抑制VSMCs增殖遷移（P<0.05）;（2）與對(duì)照組相比,阿托伐他汀以濃度依賴性方式促進(jìn)VSMCs凋亡,并上調(diào)p53蛋白表達(dá);（3）與對(duì)照組相比,阿托伐他汀以濃度和時(shí)間依賴性方式上調(diào)p16 m RNA及蛋白表達(dá)（P<0.05）;（4）沉默p... 

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【學(xué)位級(jí)別】：博士

【圖文】：

大鼠主動(dòng)脈VSMCs原代培養(yǎng)：7天后細(xì)胞爬出（×200）

圖 1-2：顯微鏡下大鼠主動(dòng)脈 VSMCs 形態(tài)，呈“谷峰”狀生長(zhǎng)（×200）。三、免疫熒光鑒定α-SM actin 是 VSMC 的標(biāo)志性分子，第 3 代 VSMC 經(jīng)免疫熒光染色后，使用熒光顯微鏡觀察，使用熒光顯微鏡觀察發(fā)出綠色熒光的 SM α-actin 沿縱軸呈肌絲狀排列于細(xì)胞質(zhì)內(nèi)，細(xì)胞核藍(lán)染，陽(yáng)性細(xì)胞達(dá) 95%以上，表明細(xì)胞純度較高（圖1-3）。

免疫熒光檢測(cè)SMα-actin在VSMC中的表達(dá)，標(biāo)尺20μm


本文編號(hào)：3421863