目的:血管內(nèi)皮細(xì)胞的自噬在抑制炎癥和動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)展中具有保護(hù)作用,mi R-155調(diào)節(jié)動(dòng)脈粥樣硬化自噬尚未完全闡明。在這篇文章中,我們研究miR-155對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞自噬的調(diào)節(jié)機(jī)制,探索miRNA-155與PI3K/Akt/mTOR信號(hào)通路中的靶向關(guān)系。方法:采用氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）刺激的臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞模型模擬動(dòng)脈粥樣硬化。在臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞中轉(zhuǎn)染mi R-155 mimics、miR-155 inhibitor和陰性對(duì)照以改變mi R-155的表達(dá)。我們分別使用透射電子顯微鏡（TEM）、激光掃描共聚焦顯微鏡、Western-bolt分析自噬的表達(dá)水平。通過(guò)qRT-PCR和Western-blot檢測(cè)PI3K、Akt、P70s6k、p-PI3K、p-Akt、p-P70s6k和Rheb的mRNA和蛋白的表達(dá)水平,充分評(píng)估m(xù)iR-155和PI3K/Akt/mTOR信號(hào)通路之間的關(guān)系。通過(guò)生物信息學(xué)分析預(yù)測(cè)miR-155的靶基因,并通過(guò)雙熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)進(jìn)行證實(shí)。結(jié)果:電子顯微鏡、共聚焦顯微鏡和Western-blot分析結(jié)果顯示,過(guò)表達(dá)miR-155能夠顯著促進(jìn)臍靜脈內(nèi)皮... 

【文章來(lái)源】：青島大學(xué)山東省

【文章頁(yè)數(shù)】：67 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

過(guò)表達(dá)miR-155誘導(dǎo)自噬

圖 2：共聚焦顯微鏡圖像顯示內(nèi)皮細(xì)胞內(nèi)源性 LC3 斑點(diǎn)表達(dá)(綠色)。細(xì)胞核用 DAPI (藍(lán)色)標(biāo)記。刻度條，10 μm。圖 3：用 ox-LDL 處理的內(nèi)皮細(xì)胞中 LC3 的表達(dá) wester-blot 分析圖像。采用 GAPDH 作為內(nèi)參。A 為條帶，B 為 LC3 - II / LC3 - I 比率的量化， ( n = 3 ) * P < 0.05。

37圖 3：用 ox-LDL 處理的內(nèi)皮細(xì)胞中 LC3 的表達(dá) wester-blot 分析圖像。采用 GAPDH 作為內(nèi)參。A 為條帶，B 為 LC3 - II / LC3 - I 比率的量化， ( n = 3 ) * P < 0.05。

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]參芪復(fù)方調(diào)控GK大鼠大血管病變PTEN/PI3K通路的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 劉椏,謝春光,陳敏,莊燦,高泓.  中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合雜志. 2010(06)

碩士論文
[1]白藜蘆醇對(duì)受到氧化應(yīng)激H9c2心肌細(xì)胞的保護(hù)作用及其與自噬關(guān)系的研究[D]. 呂小翠.浙江大學(xué) 2012



本文編號(hào)：3341999