目的:內(nèi)皮功能紊亂是心腦血管病重要的病生理基礎(chǔ)。加速血管損傷后再內(nèi)皮化和血管新生,是預(yù)防及治療心血管病的關(guān)鍵。內(nèi)皮祖細(xì)胞（endothelial progenitor cells,EPCs）參與血管內(nèi)皮修復(fù)及血管新生,EPCs的歸巢、增殖及分化受多種轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控網(wǎng)絡(luò)的影響,其機(jī)制尚未闡明。本實(shí)驗(yàn)旨在研究新型C2H2鋅指蛋白基因ZFP580調(diào)控EPCs分化的分子機(jī)制,為深入研究ZFP580的生物學(xué)功能提供實(shí)驗(yàn)依據(jù),為治療血管性疾病提供新的治療策略和靶點(diǎn)。方法:①密度梯度離心法,分離培養(yǎng)大鼠骨髓源性EPCs,免疫熒光染色及流式細(xì)胞技術(shù)（FACS）鑒定EPCs;②體外誘導(dǎo)培養(yǎng)EPCs,觀察EPCs在0 d、4 d、7 d、14 d細(xì)胞形態(tài)的動(dòng)態(tài)改變;免疫熒光染色檢測(cè)eNOS在相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)的表達(dá)變化;流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)EPCs分化表面分子標(biāo)記物的動(dòng)態(tài)改變;QPCR及Western blot檢測(cè)相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)ZFP580 mRNA和蛋白表達(dá)水平的變化;③腺病毒轉(zhuǎn)染技術(shù)獲得過（低）表達(dá)ZFP580的EPCs,QPCR、Western blot、流式細(xì)胞技術(shù)及體內(nèi)外血管形成實(shí)驗(yàn)等方法檢測(cè)ZFP580對(duì)EPC... 

【文章來源】：天津醫(yī)科大學(xué)天津市 211工程院校

【文章頁數(shù)】：75 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

鋅指基因是人類基因組中一類重要的調(diào)控基因，鋅指轉(zhuǎn)錄因子在細(xì)胞增殖、分化與遷移等過程中起著十分重要的作用[20]

在受到組織缺血、缺氧、血管壁損傷、動(dòng)脈粥樣硬化斑塊、冠脈血栓、介入支架術(shù)后等刺激后，骨髓源性內(nèi)皮前體細(xì)胞(Endothelial precursor cells, EPCs)可被動(dòng)員并釋放至外周血中，招募至血管損傷部位，發(fā)揮其生物學(xué)效應(yīng)，如圖1所示。內(nèi)皮前體細(xì)胞即內(nèi)皮祖細(xì)胞(Endothelial progenitor cells, EPCs)是一類能循環(huán)、增殖并分化為血管內(nèi)皮細(xì)胞，但尚未表達(dá)成熟血管內(nèi)皮細(xì)胞表型，也未形成血管的前體細(xì)胞[9]。EPCs最主要的生物學(xué)功能促進(jìn)血管新生，參與血管損傷后的內(nèi)皮修復(fù)及再內(nèi)皮化。多項(xiàng)研究表明高血壓、冠心病患者或動(dòng)物體內(nèi)EPCs的數(shù)量和功能是下降的，在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ椭羞M(jìn)行EPCs移植治療后，結(jié)果發(fā)現(xiàn)癥狀有所改善，表現(xiàn)為血管彈性增加、血壓下降、心輸出量增加[10,11]。國外另有研究證實(shí)，在頸動(dòng)脈球囊損傷模型中，動(dòng)員或移植EPCs可以加速損傷后血管再內(nèi)皮化，減少新生內(nèi)膜的過度增生[12]。此外

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]ZNF580-EGFP融合蛋白的亞細(xì)胞定位研究[J]. 張文成,孫慧燕,孟祥艷.  中國病理生理雜志. 2008(08)
[2]ZNF580與EGFP融合蛋白表達(dá)載體的構(gòu)建及其在HEK293細(xì)胞的表達(dá)和定位[J]. 張文成,孫慧燕,羅玉玉,崔明亮.  武警醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào). 2008(03)
[3]低密度脂蛋白誘導(dǎo)下調(diào)的新基因cDNA的克隆及組織表達(dá)[J]. 張文成,陳保生,曾武威,吳剛,薛紅.  基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床. 2003(03)



本文編號(hào)：3317101