生長分化因子15對人主動脈內(nèi)皮細胞的作用及機制研究在動脈粥樣硬化中,血管內(nèi)皮受損是其發(fā)生的始動因素。生長分化因子15（Growth differentiation factor15,GDF-15）的表達可在組織器官缺氧、炎癥、氧化損傷等情況下迅速上調(diào),具有保護血管內(nèi)皮細胞,拮抗內(nèi)皮細胞凋亡的作用,是防治心血管病尤其是抗動脈粥樣硬化的重要因素。[目的]1、研究GDF-15對人主動脈內(nèi)皮細胞增殖的影響及與ERKl/2信號通路的關(guān)系。2、研究GDF-15對H202誘導(dǎo)人主動脈內(nèi)皮細胞凋亡的影響及與PI3K/Akt信號通路的關(guān)系。[方法]體外培養(yǎng)人主動脈內(nèi)皮細胞后隨機分組進行實驗：1、細胞增殖實驗分組：（1）空白對照組；（2）低濃度GDF-15組；（3）高濃度GDF-15組；（4）低濃度GDF-15+PD98059組；（5）高濃度GDF-15+PD98059組。各組培養(yǎng)24h后用CCK8細胞增殖檢測試劑盒檢測細胞增殖情況,Western blot檢測磷酸化ERK （p-ERK）蛋白相對表達量。2、細胞凋亡實驗分組：（1）空白對照組；（2）H2O2組；（3）低濃度GDF-15+H202組；（4）... 

【文章來源】：南京醫(yī)科大學(xué)江蘇省

【文章頁數(shù)】：60 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

不同濃度GDF-15刺激主動脈內(nèi)皮細胞24h后CCK8細胞增殖檢測試劑盒檢測細胞增殖情況

高濃度GDF-15處理后細胞增殖無明顯變化(0.492±0.012vs0.503±0.023,P>0.05);經(jīng)抑制劑預(yù)處理（0.488±0.034)后與對照組無統(tǒng)計學(xué)差異。圖4為各組細胞倒置顯微鏡下細胞增殖情況。2.5-1本2.0 -紀(jì) r*營 1.5 ?5 ▲11.0- ~ \ pL JL5 ：卞 ，0.5- ?‘ :：- ■0 0 1 I I i . 難. ，靈JA B C D E圖3不同濃度GDF-15刺激主動脈內(nèi)皮細胞24h后CCK8細胞增殖檢測試劑盒檢測細胞增殖情況。A:空白對照組；B：低濃度GDF-15組；C:髙濃度GDF-15組T D：低濃度GDF-15+PD98059 組;E；高濃度 GDF-15+PD98059 組■/P<0.05，與空白對照組比較;▲PcO.OS，與低濃度GDF-15組比較。25

髙濃度 GDF-15+PD98059 組。1.2 Western Blot檢測各增殖實驗組p-ERK蛋白相對表達量圖5顯示根據(jù)Western blot條帶灰度值計算得出的增殖實驗各組p-ERK蛋白的相對表達量（灰度值比值=p-ERK灰度值/ERK灰度值）。與對照組相比，經(jīng)低濃度GDF-15處理細胞后 P-ERK 蛋白的相對表達量顯著提高(0.912±0.038vs0.593±0.045,P<0.05),而抑制劑預(yù)處理后上述作用消失，p-ERK蛋白的相對表達量降低到（0.126±0.011)，與低濃度GDF-15組比較P<0.05，差異有統(tǒng)計學(xué)意義；經(jīng)高濃度GDF-15處理細胞后P-ERK蛋白的相對表達量無明顯變化（0.526±0.011vs0.593±0.045，P>0.05)，但抑制劑預(yù)處理（0.068±0.002)后P-ERK蛋白的相對表達量降低，與高濃度GDF-15組比較P<0.05

【參考文獻】：
期刊論文
[1]慢性心力衰竭患者血清生長分化因子-15、腦利鈉肽水平與心功能狀態(tài)的關(guān)系[J]. 武德梅,張龍,陳超,張明,劉袁穎.  中國老年學(xué)雜志. 2012(06)
[2]人血清生長分化因子15與器質(zhì)性心臟病左心室重構(gòu)程度的相關(guān)性研究[J]. 張芃,鄭哲,魏英杰,胡盛壽,段福建.  中國分子心臟病學(xué)雜志. 2010(02)

碩士論文
[1]探討冠狀動脈擴張發(fā)生的相關(guān)機制及生長分化因子-15的內(nèi)皮保護作用[D]. 顏毅.中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué) 2010



本文編號：3313035