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ApoE -/- 小鼠頸總動脈粥樣硬化不同階段自噬水平的變化

發(fā)布時間:2021-07-30 11:08
  目的探究在載脂蛋白E基因敲除小鼠(ApoE-/-小鼠)頸總動脈粥樣硬化(As)不同階段自噬水平的變化情況。方法 40只6周齡雄性ApoE-/-小鼠隨機分為對照組(10只)與模型組(30只,套管后平均分為3組,分別在套管2周、4周、8周后處死)。股動脈取血進行血脂檢測;光鏡和透射電鏡觀察右側(cè)頸總動脈顯微和超微結(jié)構(gòu);實時熒光定量PCR(qRT-PCR)和Western blot檢測右側(cè)頸總動脈組織中ATG5、Beclin1、LC3-Ⅱ的mRNA水平和蛋白的相對表達量。結(jié)果隨著套管手術(shù)時間增加,ApoE-/-小鼠血清總膽固醇(TC)、低密度脂蛋白膽固醇(LDLC)水平逐漸升高(P<0.05)。光鏡觀察顯示,對照組管壁結(jié)構(gòu)較為完整,彈性膜完整且較豐富;但是隨著套管時間的增加,管壁逐漸加厚,彈性膜結(jié)構(gòu)逐漸破壞,泡沫細胞、炎性細胞浸潤逐漸增多,管腔逐漸狹窄。透射電鏡觀察顯示,隨著套管時間增加,小鼠右側(cè)頸總動脈巨噬細胞內(nèi)脂滴數(shù)目逐漸增多,自噬體數(shù)目在術(shù)后4周時最高。qRT-PCR及Western blot結(jié)果顯示,右側(cè)頸總動脈組... 

【文章來源】:中國動脈硬化雜志. 2017,25(02)北大核心

【文章頁數(shù)】:6 頁

【文章目錄】:
1 材料和方法
    1.1 實驗動物
    1.2 實驗試劑、儀器
    1.3 As動物模型制備
        1.3.1 動物分組
        1.3.2 右側(cè)頸總動脈套管
        1.3.3 動物術(shù)后處理
        1.3.4 動物處死及取材
    1.4 病理切片與超薄切片的制備
        1.4.1 頸總動脈組織病理切片的制備
        1.4.2 頸總動脈超薄切片的制備
    1.5 實時熒光定量PCR檢測
    1.6 Western blot檢測
    1.7 統(tǒng)計學分析
2 結(jié)果
    2.1 Apo E-/-小鼠血脂檢測
    2.2 各組組織病理學觀察結(jié)果
    2.3 透射電鏡觀察結(jié)果
    2.4 各組自噬相關(guān)因子ATG5、Beclin1、LC3-ⅡmRNA水平的比較
    2.5 頸總動脈組織中ATG5、Beclin1、LC3-Ⅱ蛋白的表達
3 討論


【參考文獻】:
期刊論文
[1]帕金森病中的自噬途徑與關(guān)鍵藥物靶點[J]. 歐陽亮,張嵐,劉博.  藥學學報. 2016(01)
[2]阿托伐他汀通過下調(diào)核因子-κB減輕載脂蛋白E基因缺陷小鼠頸總動脈粥樣硬化[J]. 孫清琳,吳梅,潘旭東,馬愛軍,王婷,肖星,王蘭.  國際腦血管病雜志. 2015 (08)
[3]耐力訓練對帕金森模型小鼠中腦線粒體自噬相關(guān)基因表達的影響[J]. 樊申元,靳二輝.  中國康復醫(yī)學雜志. 2015(05)



本文編號:3311290

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