發(fā)布時間：2021-07-28 00:05

　　研究目的:探討CD137信號是否通過STAT6/PPARδ通路調(diào)控動脈粥樣硬化巨噬細胞M2極性轉(zhuǎn)變。研究方法:（1）體內(nèi)實驗將6⁸周齡ApoE^-/-雄性小鼠分為5組,包括對照組、CD137激動組、CD137抑制組,STAT6抑制組和PPARδ抑制組;通過HE染色檢測小鼠主動脈中動脈粥樣硬化斑塊的面積,通過免疫熒光染色檢測小鼠主動脈斑塊內(nèi)巨噬細胞iNOS和Arginase-1表達量,以及STAT6和PPARδ的表達量;（2）體外實驗使用誘導腹腔無菌性炎癥法提取腹腔原代巨噬細胞;使用流式細胞術、western blot和ELISA驗證CD137信號對巨噬細胞M2極性轉(zhuǎn)變的作用;使用STAT6抑制劑抑制STAT6的表達,并使用western blot驗證抑制效率;使用PPARδsiRNA干擾PPARδ的表達,并使用qRT-PCR驗證干擾效率;使用流式細胞術和qRT-PCR驗證STAT6/PPARδ通路對巨噬細胞極性轉(zhuǎn)變的影響;（3）共培養(yǎng)實驗上室種植巨噬細胞,下室基質(zhì)膠種植內(nèi)皮細胞,實驗分4組,即對照組、CD137信號激動組、STAT6抑制組和PP... 

【文章來源】：江蘇大學江蘇省

【文章頁數(shù)】：84 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

各組小鼠主動脈斑塊HE染色(100μm)

江蘇大學碩士學位論文12圖2.2各組小鼠主動脈斑塊中iNOS和Arginase-1的免疫熒光染色(100μm)Fig2.2Immunofluorescencestainingofp-STAT6andPPARδinplaquesofeachgroupmice免疫熒光染色顯示小鼠主動脈粥樣硬化斑塊內(nèi)Arginase-1(綠色，J-L)和iNOS(紅色，G-I)陽性細胞的熒光。DAPI(M-O)，Merge(P-R)。定量分析顯示巨噬細胞表達的Arginase-1/iNOS的熒光強度。**,P<0.01;***,P<0.001.2.3.3小鼠腹腔原代巨噬細胞鑒定細胞免疫熒光染色結(jié)果顯示，幾乎所有的腹腔巨噬細胞都表達CD68。流式細胞術結(jié)果顯示，小鼠腹腔原代巨噬細胞分離純度高達97.93%±1.31%，適于后續(xù)實驗。圖2.3小鼠腹腔巨噬細胞的免疫熒光染色(100μm)Fig2.3Immunofluorescencestainingofprimarymurineperitonealmacrophages

江蘇大學碩士學位論文12圖2.2各組小鼠主動脈斑塊中iNOS和Arginase-1的免疫熒光染色(100μm)Fig2.2Immunofluorescencestainingofp-STAT6andPPARδinplaquesofeachgroupmice免疫熒光染色顯示小鼠主動脈粥樣硬化斑塊內(nèi)Arginase-1(綠色，J-L)和iNOS(紅色，G-I)陽性細胞的熒光。DAPI(M-O)，Merge(P-R)。定量分析顯示巨噬細胞表達的Arginase-1/iNOS的熒光強度。**,P<0.01;***,P<0.001.2.3.3小鼠腹腔原代巨噬細胞鑒定細胞免疫熒光染色結(jié)果顯示，幾乎所有的腹腔巨噬細胞都表達CD68。流式細胞術結(jié)果顯示，小鼠腹腔原代巨噬細胞分離純度高達97.93%±1.31%，適于后續(xù)實驗。圖2.3小鼠腹腔巨噬細胞的免疫熒光染色(100μm)Fig2.3Immunofluorescencestainingofprimarymurineperitonealmacrophages


本文編號：3306803