發(fā)布時間：2021-07-25 13:30

　　目的:三磷酸腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運體A1（ABCA1）作為介導(dǎo)細(xì)胞內(nèi)游離膽固醇（FC）和磷脂流出至貧脂的載脂蛋白（apoA-I）接受體的關(guān)鍵轉(zhuǎn)運蛋白,對減少細(xì)胞內(nèi)膽固醇蓄積和抑制泡沫細(xì)胞形成具有重要意義。巨噬細(xì)胞活化脂肽-2（MALP-2）是從發(fā)酵支原體細(xì)胞壁上提取的一種脂多肽,能特異性識別靶細(xì)胞膜上的Toll樣受體（TLRs）,與動脈粥樣硬化（As）形成密切相關(guān),但MALP-2是否能調(diào)控ABCA1表達仍不清楚。本研究旨在闡明MALP-2對THP-1巨噬細(xì)胞ABCA1表達的影響及相關(guān)機制。方法:培養(yǎng)THP-1單核細(xì)胞,依次加入佛波酯（PMA）、氧化低密度脂蛋白（ox-LDL）孵育,使其最終分化為THP-1巨噬細(xì)胞源性泡沫細(xì)胞,經(jīng)不同濃度的MALP-2（0、25、50、100、200 mM）處理細(xì)胞24 h或以100 mM MALP-2處理細(xì)胞不同時間（0、6、12、24、48 h）后,行油紅O染色觀察細(xì)胞蓄脂情況,高效液相色譜法（HPLC）檢測細(xì)胞內(nèi)總膽固醇（TC）、FC及膽固醇酯（CE）含量,液體閃爍計數(shù)法分析細(xì)胞內(nèi)膽固醇流出,熒光實時定量PCR、Western blot分別測定ABCA1 ... 

【文章來源】：南華大學(xué)湖南省

【文章頁數(shù)】：67 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
主要英文縮略語索引
第1章 引言
第2章 實驗材料
    2.1 主要試劑與抗體
    2.2 主要儀器與設(shè)備
第3章 實驗方法
    3.1 THP-1 細(xì)胞培養(yǎng)與處理
    3.2 ox-LDL的制備與鑒定
    3.3 油紅O染色觀察細(xì)胞脂滴
    3.4 高效液相色譜法檢測細(xì)胞內(nèi)總膽固醇（total cholesterol, TC）、FC、膽固醇酯（cholesterol ester, CE）含量
    3.5 液體閃爍計數(shù)法檢測細(xì)胞內(nèi)膽固醇流出
    3.6 小干擾RNA（small interfering RNA, siRNA）轉(zhuǎn)染細(xì)胞
    3.7 細(xì)胞總RNA提取和熒光實時定量PCR
    3.8 細(xì)胞總蛋白提取
    3.9 細(xì)胞核蛋白提取
    3.10 Western blot
    3.11 統(tǒng)計學(xué)分析
第4章 實驗結(jié)果
    4.1 MALP-2促進THP-1巨噬細(xì)胞內(nèi)膽固醇蓄積
    4.2 MALP-2減少THP-1巨噬細(xì)胞膽固醇流出
    4.3 MALP-2下調(diào)THP-1巨噬細(xì)胞ABCA1 mRNA和蛋白表達
    4.4 MALP-2通過TLR2/NF-κB途徑下調(diào)THP-1 巨噬細(xì)胞ABCA1表達
    4.5 ZNF202參與NF-κB介導(dǎo)的ABCA1表達下調(diào)
第5章 討論
第6章 結(jié)論
參考文獻
文獻綜述 巨噬細(xì)胞活化脂肽-2研究進展
    參考文獻
碩士期間發(fā)表論文
致謝
基金資助


【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3302116