目的:單核細胞浸潤和活化引發(fā)的血管壁持續(xù)性炎癥反應是心血管疾病發(fā)病機制之一。SIRT1是一種維持血管穩(wěn)態(tài)的重要表觀遺傳學調(diào)控因子,但是,其前體mRNA可變剪接產(chǎn)物的功能尚不清楚。本研究以SIRT1基因外顯子2-7共價閉合環(huán)化形成的環(huán)狀非編碼RNA circ-sirt1為研究對象,從細胞和分子水平來探討circ-sirt1在人單核細胞株（THP-1）炎癥應答中的作用。方法:體外培養(yǎng)人單核細胞株THP-1,采用circ-sirt1重組腺病毒表達載體（Ad-circ-sirt1）,運用熒光定量PCR（qRT-PCR）和Western blot方法檢測單核細胞中IL-1β、IL-6和MCP-1的表達以及p65蛋白的表達變化;利用RIP和RNA pull-down分析證實circ-sirt1和p65蛋白之間的相互作用關(guān)系。結(jié)果:1.為了確定circ-sirt1在單核細胞中的表達,跨越環(huán)化位點設計引物,以總RNA為模板進行RT-PCR,對PCR產(chǎn)物進行測序,證實circ-sirt1在單核細胞中的表達。2.分別給予佛波酯（PMA）和TNF-α處理單核細胞,qRT-PCR結(jié)果顯示,PMA和TNF-α可... 

【文章來源】：河北醫(yī)科大學河北省

【文章頁數(shù)】：49 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

circ-sirt1在THP-1單核細胞中的表達

17刺激抑制 THP-1 單核細胞 circimulation inhibited of circ-sirt1was performed to detect cicells. B: qRT-PCR was performreated THP-1 cells. Data are sumed with TNF-α untreated group.rt1 抑制炎癥因子表達達 circ-sirt1 對單核細胞炎毒轉(zhuǎn)染單核細胞后，給予 TNF

18圖 3 過表達 circ-sirt1 抑制炎癥因子表達Fig.3 Overexpression of circ-sirt1 inhibits the expression of inflammatoryfactors. A: The expression of circ-sirt1 increased in Ad-circ-sirt1-infectedTHP-1 cells. B. qRT-PCR was performed to detect IL-1β, IL-6 and MCP-1mRNA expression in Ad-circ-sirt1-infected THP-1 cells treated with TNF-α.Data are summarized as mean±SD, n=3. *P<0.05, compared withAd-Vector+TNF-α group.4. circ-sirt1 抑制 NF-κB p65 核轉(zhuǎn)位以往研究表明，NF-κB 是體內(nèi)炎癥反應中重要轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子，體外實


本文編號：3301281