研究背景冠心�。–AD）嚴(yán)重威脅著人類健康，發(fā)病呈上升趨勢(shì)。冠心病是導(dǎo)致心衰的的主要原因[1]，而心衰是各種心臟疾病的嚴(yán)重和終末階段，早期正確診斷、鑒別診斷和治療冠心病能有效減少死亡率，基于此，尋求診斷冠心病靈敏度和特異性高的標(biāo)志物仍然任重道遠(yuǎn)。CAD導(dǎo)致心衰的主要發(fā)病機(jī)制之一為心肌病理性重塑，如心肌壞死、凋亡、肥大、自噬、心肌細(xì)胞外基質(zhì)沉積、血管新生等，心臟功能漸漸惡化，發(fā)展至心衰直至患者死亡。CAD患者減少心肌纖維化、調(diào)控缺血區(qū)周邊的基質(zhì)沉積、增加血管新生對(duì)于防止心室重塑、改善心功能尤其重要。心臟缺血后心臟相關(guān)細(xì)胞內(nèi)基因表達(dá)紊亂、調(diào)節(jié)失衡，導(dǎo)致相應(yīng)受調(diào)節(jié)蛋白表達(dá)發(fā)生改變，可能是冠心病缺血后心臟發(fā)生心室重塑的病理基礎(chǔ)�；谝陨侠碚摚瑥幕蚧蚍肿铀窖芯啃氖抑厮苡锌赡転榕R床治療冠心病、防止心室重塑提供新的思路。MicroRNAs（miRNAs）是一類長度為21²5個(gè)核糖核苷酸的非編碼內(nèi)源性小單鏈RNAs分子，在生物進(jìn)化過程中高度保守。它們通過堿基互補(bǔ)或部分堿基互補(bǔ)與目標(biāo)mRNA結(jié)合，使mRNA降解或者抑制mRNA的翻譯，在轉(zhuǎn)錄后水平調(diào)節(jié)基因表達(dá)。MiRNAs在多種... 

【文章來源】：廣州醫(yī)科大學(xué)廣東省

【文章頁數(shù)】：76 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

qRT-PCR檢測(cè)microRNA的原理示意圖（摘自Chen[48]

72℃ 32 秒延伸（32 秒收集熒光信號(hào)），變性-退火-延伸進(jìn)行 40 個(gè)循環(huán)熔解曲線分析：溫度 60℃~95℃。分析軟件：7500 Software v2.0.6。在擴(kuò)增目的基因 miR-21、miR-100、miR-423-5p 的同時(shí)，我們還擴(kuò)增了 snRNA U6（管家基因）作為內(nèi)對(duì)照。所有實(shí)時(shí)定量 PCR 實(shí)驗(yàn)獨(dú)立重復(fù) 3 次。相對(duì)表達(dá)量采用 2-(Δt)方法[49]，將目的基因表達(dá) CT*(Cycle threshold)值與 U6 表達(dá) CT 值進(jìn)行比較，標(biāo)準(zhǔn)化后的 CT 值為相對(duì)定量值(*注：Ct 值的含義指每個(gè)反應(yīng)管內(nèi)的熒光信號(hào)到達(dá)設(shè)定的域值時(shí)所經(jīng)歷的循環(huán)數(shù))。標(biāo)準(zhǔn)化后的 CT 值：ΔΔCt=(Ct目的基因-Ct管家)實(shí)驗(yàn)組-(Ct目的基因-Ct管家基因)參照組，相對(duì)樣品表達(dá)量=2-(ΔΔCt)，以相對(duì)樣本表達(dá)量表示循環(huán) miR-21、miR-100、miR-423-5p 的相對(duì)表達(dá)水平。部分樣本的內(nèi)參基因及目的基因的基因擴(kuò)增曲線和熔解曲線見圖（圖 2-2 至2-9）。

部分樣品的snRNAU6內(nèi)參基因熔解曲線


本文編號(hào)：3273890