背景：心房顫動（簡稱房顫）是臨床上最為常見的心律失常性疾病,其發(fā)病過程是呈逐步進展性的。房顫的發(fā)生和維持機制與炎癥是相關的,而炎癥反應又是以信號傳導和轉(zhuǎn)錄激活因子3（signal transducer and activator of transcription3, STAT3）通路為特征的。在房顫病人的全基因組相關研究中,已經(jīng)發(fā)現(xiàn)在鋅指同源框3（zinc finger homeobox3, ZFHX3,也稱為AT結(jié)構域結(jié)合因子1即AT-motif binding factor1, ATBF1）基因上存在基因多態(tài)性位點。但是,ATBF1在房顫中導致炎癥產(chǎn)生的具體作用機制并不清楚。目的：本研究的目的是探討在電刺激誘導的房顫細胞模型中,ATBF1水平的下調(diào)能與活化的STAT3蛋白抑制劑（protein inhibitor of activated STAT3, PIAS3）協(xié)同作用,最終激活STAT3信號通路。方法：通過對HL-1細胞（心房肌細胞系）的高頻電刺激誘導構建房顫細胞模型。設計并合成針對ATBF1和PIAS3基因編碼區(qū)的干擾序列,以及ATBF1的過表達質(zhì)粒,在脂質(zhì)體2000（Li... 

【文章來源】：南京醫(yī)科大學江蘇省

【文章頁數(shù)】：73 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

電刺激能夠誘導調(diào)亡效應分子Caspase-3的表達增加A圖：WesternBlotting檢測在電刺激24小時時細胞Caspase-3蛋白的表達變化；

+圖4 ： ATBFl siRNA的轉(zhuǎn)染能增強電刺激對STAT3信號通路的激活A圖：ATBF1 siRNA或si-NC轉(zhuǎn)染至HL-1細胞后，再電刺激24小時后通過Western Blotting 檢測 ATBFl、PIAS3、p-STAT3 和 STAT3 的蛋白表達水平（以P-actin為內(nèi)參）；B圖：ATBF1蛋白水平在電刺激（尸<0.01)或轉(zhuǎn)染ATBFls丨RNA(/^<0.01)時均明顯下調(diào)；同時進行電刺激和轉(zhuǎn)染ATBF1 siRNA時下調(diào)更為顯著(P< 0.001);C圖：PIAS3蛋白水平在電刺激（P < 0.05)或轉(zhuǎn)染ATBF1 siRNA(/? < 0.05)時均明顯降低；同時進行電刺激和轉(zhuǎn)染ATBF1 siRNA時降低更為顯著(尸< 0.01);D圖：P-STAT3蛋白水平在電刺激（P<0

--圖5 ： ATBFl的過表達能夠抑制電刺激對STAT3信號通路的激活A圖：pKXUal-HA-ATBFl質(zhì)粒轉(zhuǎn)染至HL-1細胞再加電刺激24小時后WesternBlotting 檢測 ATBFl、PIAS3、p-STAT3 和總 STAT3 的蛋白表達水平（以 p-actin為內(nèi)參）；B圖：ATBF1蛋白水平在對HL-1細胞只進行電刺激時下調(diào)（P<0.01)，在只轉(zhuǎn)染pKXUal-HA-ATBFl質(zhì)粒時明顯上調(diào)(P< 0.001)，而在同時進行電刺激和轉(zhuǎn)染pKXUal-HA-ATBFl質(zhì)粒后較只進行電刺激時顯著下調(diào)(P< 0.01);C圖：PIAS3蛋白水平在對HL-1細胞只進行電刺激時降低（P<0.01)，在只轉(zhuǎn)染pKXUal-HA-ATBFl質(zhì)粒時明顯上調(diào)(/? < 0.05)，而在同時進行電刺激和轉(zhuǎn)染pKXUal-HA-ATBFl質(zhì)粒后較只進行電刺激時顯著降低0.001);D圖：P-STAT3蛋白水平在對HL-l細胞只進行電刺激時上調(diào)(P < 0.001)，在只轉(zhuǎn)染pKXUal-HA-ATBFl質(zhì)粒時明顯下降(/^ < 0.01)，而在同時進行電刺激和轉(zhuǎn)染pKXUal-HA-ATBFl質(zhì)粒后較只進行電刺激時顯著下降(/>< 0.001);E圖：總STAT3蛋白水平在電刺激和(或）轉(zhuǎn)染pKXUal-HA-ATBFl質(zhì)粒時均無顯著性差異（/^>0


本文編號：3240473