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線粒體乙醛脫氫酶2對糖尿病大鼠心肌損傷Notch1信號通路的作用及機制研究

發(fā)布時間:2021-03-31 11:19
  目的:觀察線粒體乙醛脫氫酶2對糖尿病心肌損傷中Notch1信號通路的影響,探討其發(fā)揮作用的相關分子機制。方法:腹腔注射鏈脲佐菌素(55mg/kg)進行糖尿病大鼠模型的復制,分成正常對照組(Con)、糖尿病4W組(DM 4W)、糖尿病8W組(DM 8W)和糖尿病8W+ALDH2激動劑乙醇組(DM+Et OH)。造模成功1周后DM+Et OH組大鼠予以2.5%乙醇日常飲用,1周后改濃度為5%的乙醇,持續(xù)8周。測定不同時間點各組小動物超聲大鼠心功能;8周后對各組大鼠行在體心肌缺血/再灌注(I/R)模型復制,分為Con8W I/R組、DM 8W I/R、DM+Et OH 8W I/R。測量大鼠體重、心臟重量,計算出心系數(shù);自動生化分析儀測定血漿肌酸激酶(creatine kinase,CK)和肌酸激酶同工酶(creatine kinase isozyme,CK-MB)水平;試劑盒檢測大鼠心肌組織細胞色素C(cytochrome C,Cyt C)及TNF-a水平變化;HE染色后光鏡下觀察大鼠心肌組織及細胞形態(tài);Masson染色及PAS染色觀察大鼠心肌纖維化情況;Western Blotting測... 

【文章來源】:蚌埠醫(yī)學院安徽省

【文章頁數(shù)】:80 頁

【學位級別】:碩士

【部分圖文】:

線粒體乙醛脫氫酶2對糖尿病大鼠心肌損傷Notch1信號通路的作用及機制研究


在體心肌缺血/再灌注損傷模型的建立Figure1Establishmentofmyocardialischemia/reperfusioninjurymodel(3)大鼠心肌細胞的原代培養(yǎng)

標準曲線圖,孔板,樣品,樣品濃度


圖 2 蛋白濃度標準曲線圖Figure 2 Standard curve of protein concentration量樣品蛋白 OD 值,計算濃度6 孔板中依次加入以下組分組分 1 2 3樣品 4 4 4標準品稀釋液 16 16 16BCA 工作液 200 200 200樣品 OD 值,計算平均值,利用標準曲線方程即可計算出 96 孔板中樣品濃樣品濃度即為 96 孔板中樣品濃度乘以稀釋倍數(shù) 55。量出樣品蛋白濃度,計算所需上樣體積,隨后按樣品:5X 上樣緩沖液=4加入 5X 上樣緩沖液,在 PCR 儀中 95℃加熱 5min,冰上冷卻后加樣或于-

大鼠,體重


圖 3 不同組大鼠變化Figure 3 Changes of rats in different groups3.2、心系數(shù)與 Con 組相比,DM 組及 DM+EtOH 組大鼠體重、心臟重量明顯減輕,數(shù)明顯增加(P<0.01);在糖尿病不同病程中,DM 8W 組較 DM 4W 組心臟進一步增加(P<0.05),心系數(shù)繼續(xù)增加(P<0.01);與 DM 8W 組相比,DM+E組心臟重量明顯減輕(P<0.01),心系數(shù)顯著降低(P<0.01)。(見表 1)表 1 各組體重、心臟重量及心系數(shù)變化( x±s,n=6)Tab 1 Levels of Body weight,Heart Weight and HW/BW( x±s,n=6)組別 心臟重量(mg) 體重(g) 心系數(shù)(mg/g)Con 1299.80±116.41 531.67±8.16 2.44±0.19DM 4W 894.23±22.59* 301.67±42.03* 3.01±0.47*

【參考文獻】:
期刊論文
[1]高糖對線粒體乙醛脫氫酶2在大鼠心肌成纖維細胞中表達的影響[J]. 谷小雨,方婷婷,高琴,康品方,李正紅,程向陽.  中國應用生理學雜志. 2017(03)
[2]缺血性心肌病合并RBBB患者右心室雙部位起搏1例[J]. 柴巧英,張海軍,李鑫平.  中國循證心血管醫(yī)學雜志. 2016(07)
[3]Diabetes and cardiovascular disease: Epidemiology, biological mechanisms, treatment recommendations and future research[J]. Benjamin M Leon,Thomas M Maddox.  World Journal of Diabetes. 2015(13)
[4]心肌纖維化發(fā)病機制及治療進展[J]. 宋秉春,張金國.  濟寧醫(yī)學院學報. 2015(01)
[5]乙醇激動ALDH2對糖尿病大鼠腎臟JNK表達的影響[J]. 于影,康品方,李徽徽,張冠軍,王芳芳,葉紅偉,高琴.  中國應用生理學雜志. 2014(03)
[6]線粒體乙醛脫氫酶在大鼠糖尿病心肌病中的表達及意義[J]. 王曉梅,葉紅偉,康品方,王洪巨,高琴,李正紅.  中國藥理學通報. 2012(03)
[7]葛根素對糖尿病大鼠心功能及血清TNF-α水平的影響[J]. 張一弛,解硯英,牟艷玲,裴可靈.  中國藥理學通報. 2011(12)
[8]線粒體乙醛脫氫酶2在心肌缺血后處理中的作用[J]. 高琴,姜翠榮,于影,胡杰,李正紅,關宿東.  中國藥理學通報. 2010(08)
[9]糖尿病大鼠心肌Cx43的表達及纈沙坦對其影響[J]. 孫明謹,文重遠,黃婷,李凝旭.  中國現(xiàn)代醫(yī)學雜志. 2009(15)

博士論文
[1]細胞色素P450表氧化酶基因對TNF-α誘導心血管系統(tǒng)損傷的保護作用及機制研究[D]. 王家寧.華中科技大學 2006



本文編號:3111347

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