Tmod1在基質(zhì)硬度誘導(dǎo)的巨噬細(xì)胞生物力學(xué)改變中的作用研究
發(fā)布時間:2021-03-30 15:11
巨噬細(xì)胞運(yùn)動和遷移能力的降低是動脈粥樣硬化發(fā)生過程中的關(guān)鍵事件,血管基質(zhì)硬度的增加是導(dǎo)致巨噬細(xì)胞力學(xué)性質(zhì)改變的重要因素之一。黏著斑和細(xì)胞骨架的組裝決定著細(xì)胞的力學(xué)特性和遷移。原肌球蛋白調(diào)節(jié)蛋白1(Tropomodulin1,Tmod1)是肌動蛋白微絲(F-actin)的蓋帽蛋白,調(diào)節(jié)F-actin的長度和結(jié)構(gòu)。目的:本研究旨在探討Tmod1在基質(zhì)硬度對巨噬細(xì)胞力學(xué)特性調(diào)控中的作用及分子機(jī)制。方法:我們將小鼠巨噬細(xì)胞Raw264.7接種在硬度分別為2和20 k Pa的聚丙烯酰胺凝膠上培養(yǎng)24、48和72小時,利用實時定量PCR和蛋白免疫印跡檢測Tmod1的表達(dá)。利用腺病毒在Raw264.7細(xì)胞中過表達(dá)或si RNA敲低Tmod1后,再將細(xì)胞種于不同硬度基質(zhì)上,分別利用微分干涉相差顯微鏡檢測細(xì)胞在不同硬度基質(zhì)上的粘附,利用激光共聚焦顯微鏡檢測細(xì)胞的伸展面積;利用流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞內(nèi)F-actin含量;利用激光共聚焦顯微鏡觀察細(xì)胞內(nèi)黏著斑數(shù)。結(jié)果:與2 k Pa基質(zhì)膠相比,在20 k Pa基質(zhì)膠上培養(yǎng)的巨噬細(xì)胞中Tmod1的蛋白表達(dá)水平增加了1.8±0.5倍(p<0.05)。過表達(dá)Tm...
【文章來源】:承德醫(yī)學(xué)院河北省
【文章頁數(shù)】:66 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
英文縮寫
前言
材料與方法
結(jié)果
附圖
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述 基質(zhì)硬度對巨噬細(xì)胞生物力學(xué)性質(zhì)調(diào)控的研究進(jìn)展
參考文獻(xiàn)
致謝
個人簡歷
本文編號:3109717
【文章來源】:承德醫(yī)學(xué)院河北省
【文章頁數(shù)】:66 頁
【學(xué)位級別】:碩士
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摘要
ABSTRACT
英文縮寫
前言
材料與方法
結(jié)果
附圖
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述 基質(zhì)硬度對巨噬細(xì)胞生物力學(xué)性質(zhì)調(diào)控的研究進(jìn)展
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