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柯薩奇病毒B3對心肌微血管內(nèi)皮細(xì)胞Fractalkine表達(dá)機(jī)制的研究

發(fā)布時間:2021-03-20 21:47
  背景:通過對病毒性心肌炎(Viral Myocarditis,VMC)的致病機(jī)理研究得知病毒感染后可以誘導(dǎo)宿主產(chǎn)生免疫應(yīng)答。自身免疫治療成為當(dāng)今治療的一大熱點(diǎn)?滤_奇病毒B3(Coxsackieviruses B3,CVB3)是病毒性心肌炎的常見病因,CVB3致病首先要跨越心肌微血管內(nèi)皮細(xì)胞這道屏障,才能感染到心肌細(xì)胞。作為抵御外界感染心肌細(xì)胞的最后一道防線,心肌微血管內(nèi)皮細(xì)胞同時參與免疫調(diào)節(jié)與炎癥反應(yīng),釋放炎性因子來抵御外界病原的入侵。同時心肌微血管內(nèi)皮細(xì)胞會通過改變內(nèi)皮細(xì)胞內(nèi)一系列功能基因的表達(dá)來實(shí)現(xiàn)各種內(nèi)皮細(xì)胞的功能。而Fractalkine(FKN)就是其中之一。FKN同時發(fā)揮著使外周白細(xì)胞游走和粘附的作用。FKN發(fā)揮的粘附作用不需要其他分子的參與介導(dǎo)。FKN可以在多種細(xì)胞中表達(dá),主要有內(nèi)皮細(xì)胞,平滑肌細(xì)胞,巨噬細(xì)胞等。當(dāng)有炎癥信號刺激時,FKN在這些細(xì)胞中的表達(dá)會大大增加,發(fā)揮作用,特別是在各種疾病早期,FKN的表達(dá)對減輕炎癥反應(yīng)及延緩疾病進(jìn)程方面很有意義;趯Σ《拘孕募⊙椎拿庖哒{(diào)節(jié)機(jī)制及尋找一種理想的自身免疫療法的研究,FKN作為一種同時具有粘附作用的趨化因子成為大家研究... 

【文章來源】:武漢大學(xué)湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】:89 頁

【學(xué)位級別】:博士

【部分圖文】:

柯薩奇病毒B3對心肌微血管內(nèi)皮細(xì)胞Fractalkine表達(dá)機(jī)制的研究


圖1免疫熒光檢測心肌微血管內(nèi)皮細(xì)胞的CD31的表達(dá)x200??

微血管內(nèi)皮細(xì)胞,病毒,單層,情況


A.CD31表達(dá)?B.陰性對照??圖1免疫熒光檢測心肌微血管內(nèi)皮細(xì)胞的CD31的表達(dá)x200??Fig.l?expression?of?CD31?in?myocardial?microvascular?endothelial??cells?by?immunofluorescence.?x200??3.2?CVB3對心肌微血管內(nèi)皮細(xì)胞的形態(tài)的影響??當(dāng)心肌微血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)到4-6天時細(xì)胞己經(jīng)出現(xiàn)病變,其在顯微鏡下主??要可以見到,細(xì)胞形態(tài)開始變圓,然后皺縮,最后漂浮在液體表面。圖1-1B圖??可以看出感染了?CVB3的心肌微血管內(nèi)皮細(xì)胞形態(tài)變化,生長稀疏,部分心肌微??血管內(nèi)皮細(xì)胞己經(jīng)漂浮于液體表面。而對照組C圖可以看到未感染CVB3的心??肌微血管內(nèi)皮細(xì)胞一直生長較為緊密。??A?B?*?.?C????…?...?;?'??■:?,??:?t?V?,??圖1-2?CVB3病毒對心肌微血管內(nèi)皮細(xì)胞的病變情況xlOO??A:培養(yǎng)24h的單層心肌微血管內(nèi)皮細(xì)胞。??B:?6天后心肌微血管內(nèi)皮細(xì)胞的病變情況。??C:?6天后心肌微血管內(nèi)皮細(xì)胞對照(未感染)。??Fig?1-2?Pathological?changes?of?myocardial?microvascular?cells?by?CVB3?x100??3.3?CVB3對心肌微血管內(nèi)皮細(xì)胞的TCID50??經(jīng)過測定

磷酸化,蛋白,情況


為了進(jìn)一步研究蛋白ERK1/2,JNK,?p38的磷酸化情況,我們對western?blot??的蛋白條帶進(jìn)行了灰度分析。然后用磷酸化的蛋白條帶的灰度值比上非磷酸化的??灰度值。結(jié)果表明(表2-1,圖2-4)?ERK1/2的磷酸化隨著時間的增加,磷酸化??情況也逐漸增加,40min時變化明顯,到60min時達(dá)到極致(P<0.05),之后變??化不明顯(P>0.05)而JNK,?p38的磷酸化情況在整個過程中沒有明顯變化??(P〉0.05)?〇??表2-1蛋白ERK1/2,JNK,?p38的磷酸化情況??Table?2-1?Phosphorylation?state?of?RK1/2,JNK,?p38??P-ERK1/2/ERK1/2?p-JNK/JNK?p-P38/P38??Omin?0.11?土0.02?0.31?±0.09?0.20?士?0.02??20min?0.10士?0.01?a?0.35?土0.08?0.25土?0.06??40min?0.31?土?0.09ab?0.33?土0.07?0.20士?0.06??60min?1.07±0.11abc?0.28?土0.09?0.23±0.07??80min?1.10±0.10abc?0.29?土0.09?0.24±0.07??a:表示與Omin組比較

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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[9]口服基因疫苗預(yù)防柯薩奇B組病毒性心肌炎的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 朱莉,劉晶星,陳洪,陳淑云,陸德源.  上海免疫學(xué)雜志. 2000(06)

碩士論文
[1]MAPK信號通路在低剪切力誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞Fractalkine表達(dá)中的作用[D]. 阿曼古麗·如則.新疆醫(yī)科大學(xué) 2015



本文編號:3091725

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