目的:研究miR-144對(duì)巨噬細(xì)胞脂質(zhì)蓄積和炎癥反應(yīng)的作用,探討miR-144對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化（atherosclerosis, As）的影響。方法:體外培養(yǎng)巨噬細(xì)胞,轉(zhuǎn)染miR-144后,檢測細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)蓄積,檢測培養(yǎng)上清中炎癥因子水平的水平;探討miR-144是否與c-Fos 3 ’UTR靶向結(jié)合并抑制其表達(dá);miR-144對(duì)巨噬細(xì)胞脂質(zhì)蓄積及炎癥因子分泌的作用及機(jī)制;miR-144對(duì)apoE-/-小鼠主動(dòng)脈壁內(nèi)脂質(zhì)蓄積、血脂水平、As病變、c-Fos的表達(dá)水平和炎癥因子表達(dá)高低的變化。結(jié)果:（一）實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,miR-144 mimic能夠降低體外培養(yǎng)巨噬細(xì)胞內(nèi)游離膽固醇、總膽固醇、以及細(xì)胞內(nèi)脂滴體積和數(shù)量,miR-144的互補(bǔ)序列則可阻斷以上效應(yīng),增加巨噬細(xì)胞內(nèi)脂滴體積和數(shù)量,增加巨噬細(xì)胞內(nèi)游離膽固醇和膽固醇酯的水平;酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)證明miR-144 mimic明顯降低巨噬細(xì)胞炎癥因子包括IL-6、IL-1β、TNF-α的含量和水平,而miR-144反向核苷酸序列通過與miR-144的互補(bǔ)阻斷miR-144的作用。（二）生物信息學(xué)分析發(fā)現(xiàn)miR-144具有靶向調(diào)控c-Fos的生物學(xué)基... 

【文章來源】：中國人民解放軍醫(yī)學(xué)院北京市

【文章頁數(shù)】：96 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

圖１?ｍｉＲＮＡ生成過程??個(gè)ｍｉＲＮＡ存在生理功能，其中超過數(shù)百個(gè)，已通過克隆和復(fù)制序列，研宄了其生??理功能［２６＿２７］

實(shí)時(shí)定量ＰＣＲ技術(shù)檢測，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，ｎｎＲ－１４４的水平增加，說明外源性轉(zhuǎn)染效率較??高，可以開始下一步實(shí)驗(yàn)。兩種細(xì)胞表現(xiàn)出一致的結(jié)果。轉(zhuǎn)染ｍｉＲ－１４４反義核苷酸??序列的組別則檢測到的表達(dá)水平較低，和對(duì)照組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（如圖１．１，圖??１．２所示）。??〇?４－｜??＇Ｉ?＊??Ｉ：?｜??ｉ：Ｗｕｍ??，，，??，、／??圖１．１?ＴＨＰ－１巨噬細(xì)胞轉(zhuǎn)染ｍｉＲ－１４４模擬物后ｍｉＲ－１４４表達(dá)水平??注：和對(duì)照組相比＊Ｐ?＜?０．０５認(rèn)定有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；??和對(duì)照組相比＃Ｐ?＜?０．０５認(rèn)定有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；??２４??

轉(zhuǎn)染ｍｉＲ－１４４模擬物及反義核苷酸序列后，用油紅染色實(shí)驗(yàn)檢測結(jié)果，發(fā)現(xiàn)人ＴＨＰ－１??巨噬細(xì)胞如果ｍｉＲ－１４４的水平較高則可以降低脂質(zhì)水平，ｍｉＲ－１４４水平較低則巨噬??細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)含量較高。（如圖１．３所示）。??ｃｏｎｔｒｏｌ?ｎｅｇａｔｉｖｅ??２５??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號(hào)：2972632