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鞣花酸對缺氧肺動脈高壓影響的研究

發(fā)布時間:2020-10-09 02:54
   目的:研究鞣花酸對缺氧肺動脈高壓的影響及其可能的機制。方法:1.動物實驗及分組40只SD雄性大鼠(體重180-220g),隨機分為四組,每組10只。分別為:A常氧組:于室溫常氧環(huán)境下飼養(yǎng)4周。B常氧+鞣花酸組:于室溫常氧環(huán)境下,每日給予鞣花酸15mg/kg灌胃,飼養(yǎng)4周。C低氧組:室溫下將大鼠每日置于10%氧氣濃度的低氧箱中8h,連續(xù)四周。D低氧+鞣花酸組:室溫下將大鼠低氧暴露之前,給予鞣花酸15mg/kg灌胃,然后于10%氧氣濃度的低氧箱中8h,連續(xù)4周。2.測定右心室收縮壓將大鼠按上述分組處理4周后,經(jīng)右頸靜脈插入導管至右心室另一端連接壓力傳感器,經(jīng)生理信號記錄儀分析系統(tǒng)測定大鼠右心室收縮壓(RVSP)。3.右心室肥厚指數(shù)測定取實驗大鼠出心臟,去除左右心房后分離右心室(RV)及左心室+室間隔(S+LV)并準確稱量重量。以公式(RVHI)=(RV)/(LV+S)計算右心室肥厚指數(shù)。4.肺組織中的超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛(MDA)含量測定:稱取各組大鼠相同部位(右肺下葉)肺組織100mg,磨碎制作組織提取液按照試劑盒說明步驟測定肺組織內(nèi)的SOD和MDA含量。5.免疫組化染色肺組織內(nèi)α-SMA檢測取各實驗組大鼠同一部位肺組織(左肺下葉)制作肺組織生理切片后進行α-SMA抗體免疫染色。6.大鼠肺動脈平滑肌細胞體外培養(yǎng)及實驗分組取健康大鼠肺動脈血管進行細胞傳代培養(yǎng)后取3-5代生長良好的肺動脈平滑肌細胞,按以下方法分組:A:常氧+加等量PBS液組;B:低氧+等量PBS液組;C:低氧+5μmol/L鞣花酸組;D:低氧+10μmol/L鞣花酸組;E:低氧+15μmol/L鞣花酸組;F:低氧+20μmol/L鞣花酸組。將分組處理好的細胞置于37℃恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)48h。7.臺盼藍實驗胰蛋白酶消化培養(yǎng)的各組細胞,制作細胞懸液,將細胞濃度調(diào)整至1×105/ml,按細胞懸液/%0.4臺盼藍溶液=9:1比例滴加臺盼藍溶液,混勻。顯微鏡下觀察計數(shù)各組中存活細胞和死亡細胞。8.Western-blot方法檢測測定各組細胞中p38MAPK和ERK1/2蛋白的表達。結(jié)果:1.與常氧組大鼠及常氧+鞣花酸組大鼠相比,低氧組大鼠右心肥厚指數(shù)[RV/(LV+S)]明顯增高(p0.05),單純低氧組大鼠右心肥厚指數(shù)高于低氧+鞣花酸組大鼠(p0.05),常氧組大鼠與常氧+鞣花酸組大鼠右心肥厚指數(shù)差異無統(tǒng)計學意義(p0.05)。2.與常氧組大鼠及常氧+鞣花酸組大鼠相比,低氧組大鼠右心肥厚指數(shù)[RV/(LV+S)]明顯增高(p0.05),單純低氧組大鼠右心肥厚指數(shù)高于低氧+鞣花酸組大鼠(p0.05),常氧組大鼠與常氧+鞣花酸組大鼠右心肥厚指數(shù)差異無統(tǒng)計學意義(p0.05)。3.過對α-SMA染色觀察肺血管的變化發(fā)現(xiàn),常氧組大鼠與常氧+鞣花酸組大鼠相比較,肺血管結(jié)構(gòu)物明顯變化。低氧組大鼠肺血管與常氧組相比,肺血管中膜增厚明顯。低氧+鞣花酸組大鼠與單純低氧組大鼠相比較,肺血管中膜厚度明顯下降。4.與常氧組大鼠相比,低氧組大鼠SOD含量明顯降低(p0.05),單純低氧組與低氧+鞣花酸組大鼠相比較,單純低氧組大鼠肺組織SOD含量較低(p0.05),常氧組大鼠與常氧+鞣花酸組大鼠肺組織SOD含量差異無統(tǒng)計學意義(p0.05)。5.與常氧組大鼠相比,低氧組大鼠MDA含量明顯增高(p0.05),單純低氧組與低氧+鞣花酸組大鼠相比較,低氧+鞣花酸組大鼠肺組織MDA含量明顯下降(p0.05),常氧組大鼠與常氧+鞣花酸組大鼠肺組織MDA含量差異無統(tǒng)計學意義(p0.05)。6.與常氧組肺動脈平滑肌細胞相比,低氧組肺動脈平滑肌細胞ROS明顯增高(p0.05),低氧+鞣花酸組肺動脈平滑肌細胞ROS水平與單純低氧組肺動脈平滑肌細胞相比明顯下降(p0.05)。7.與常氧組相比較,低氧組大鼠肺動脈平滑肌細胞的p38MAPK和ERK1/2蛋白的表達水平明顯升高(p0.05),與單純低氧組相比,低氧+鞣花酸組大鼠肺動脈平滑肌細胞p38MAPK和ERK1/2蛋白的表達水平明顯明顯下降(p0.05)。
【學位單位】:廣西醫(yī)科大學
【學位級別】:碩士
【學位年份】:2019
【中圖分類】:R544.1
【部分圖文】:

鞣花酸,大鼠,常氧,低氧處理


3結(jié)果.鞣花酸對缺氧肺動脈高壓大鼠右心室收縮壓及肥厚指數(shù)的影.1 根據(jù)各組實驗數(shù)據(jù)顯示,低氧處理4周后,低氧處理組大壓(RVSP)明顯比常氧組大鼠及常氧+鞣花酸組高(p<0.05)PBS液組大鼠 RVSP明顯比低氧+鞣花酸組大鼠高(p<0.05與常氧+鞣花酸組大鼠相比,RVSP差異沒有統(tǒng)計學意義(p>-1。

鞣花酸,蛋白表達,血管,大鼠


圖1-2.鞣花酸對缺氧肺動脈高壓大鼠右心肥厚指數(shù)影響Figure1-2.Effect of ellagic acid on right heart hypertwith hypoxic pulmonary hypertension注:*p<0.05 與常氧組相比較,#p<0.05 與缺氧組相比較.鞣花酸對缺氧肺動脈高壓大鼠血管平滑肌細-SMA)表達影響。氧環(huán)境下肺動脈平滑肌細胞的過度增殖是缺氧性肺要病理基礎。肺動脈平滑肌過度增殖,導致肺血管的重構(gòu)。α-SMA 蛋白是平滑肌特異性蛋白,可通過血管的變化。觀察各組大鼠肺組織染色切片發(fā)現(xiàn),常酸組大鼠相比較,肺血管結(jié)構(gòu)物明顯變化。單純低組相比,肺血管中膜增厚明顯。低氧+鞣花酸組大鼠較,肺血管中膜厚度明顯下降。見圖2-1。

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圖1-2.鞣花酸對缺氧肺動脈高壓大鼠右心肥厚指數(shù)影響2.Effect of ellagic acid on right heart hypertoxic pulmonary hypertension.05 與常氧組相比較,#p<0.05 與缺氧組相比較對缺氧肺動脈高壓大鼠血管平滑肌細影響。動脈平滑肌細胞的過度增殖是缺氧性肺。肺動脈平滑肌過度增殖,導致肺血管-SMA 蛋白是平滑肌特異性蛋白,可通過。觀察各組大鼠肺組織染色切片發(fā)現(xiàn),常比較,肺血管結(jié)構(gòu)物明顯變化。單純低血管中膜增厚明顯。低氧+鞣花酸組大鼠中膜厚度明顯下降。見圖2-1。

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本文編號:2833125


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