本文關(guān)鍵詞：探索DDAVP聯(lián)合IL-4對(duì)巨噬細(xì)胞LPCAT和PAF-AH mRNA的表達(dá)影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的探索DDAVP聯(lián)合IL-4對(duì)RAW264.7細(xì)胞系(小鼠單核巨噬瘤細(xì)胞)LPCATmRNA和PAF-AH mRNA的表達(dá)影響。方法本實(shí)驗(yàn)共分為四組,即RAW264.7細(xì)胞系接受4種不同的培養(yǎng)方法,共培養(yǎng)12.5小時(shí),然后提取細(xì)胞總mRNA。IL-4+DDAVP組:先用含IL-4(10 ng/ml)的高糖DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)RAW264.7細(xì)胞12小時(shí),然后用含DDAVP(100ng/ml)的高糖DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)30min,提取細(xì)胞總mRNA。DDAVP組:先用高糖DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)RAW264.7細(xì)胞12小時(shí),然后用含DDAVP(100ng/ml)的高糖DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)30min,提取細(xì)胞總mRNA。IL-4組:先用含有IL-4(10 ng/ml)的高糖DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)RAW264.7細(xì)胞12.5小時(shí)后,然后提取細(xì)胞總mRNA�？瞻讓�(duì)照組:先用高糖DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)RAW264.7細(xì)胞12.5小時(shí)后,提取細(xì)胞總mRNA。將各組mRNA逆轉(zhuǎn)錄成cDNA,應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)細(xì)胞LPCAT mRNA和PAF-AH mRNA的表達(dá)水平。表達(dá)水平=(Etarget)CTcontrol-CTsample)/(Eref)CTcontrol-CTsample),CTcontrol為actin的擴(kuò)增循環(huán)數(shù),CTsample所測(cè)產(chǎn)物PAF-AH、LPCAT mRNA的擴(kuò)增循環(huán)數(shù),Eref為actin mRNA的擴(kuò)增效率,Etarget為所測(cè)產(chǎn)物PAF-AH、LPCAT mRNA的擴(kuò)增效率。應(yīng)用SPSS 17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,計(jì)算每組6個(gè)樣本的C±s,進(jìn)行方差分析,兩組間比較采用LSD t檢驗(yàn)以及Dunnett T3 t檢驗(yàn),P0.05。結(jié)果四個(gè)實(shí)驗(yàn)組RAW264.7細(xì)胞LPCAT mRNA表達(dá)水平分別為:IL-4+DDAVP組為1.23±0.41,DDAVP組為0.77±0.35,IL-4組為0.95±0.42,空白對(duì)照組為0.70±0.23,方差分析結(jié)果為,F=2.58,方差齊,LPCAT mRNA在四個(gè)實(shí)驗(yàn)組中差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。四個(gè)實(shí)驗(yàn)組PAF-AH mRNA表達(dá)水平分別為:IL-4+DDAVP組為0.54±0.34,DDAVP組為0.30±0.15,IL-4組為0.30±0.11,空白對(duì)照組為0.44±0.34,方差分析結(jié)果為,F=1.237,方差齊,四個(gè)實(shí)驗(yàn)組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論DDAVP聯(lián)合IL-4可能促進(jìn)巨噬細(xì)胞LPCAT mRNA的表達(dá)。
【關(guān)鍵詞】：DDAVP IL-4 LPCAT PAF-AH 血友病A
【學(xué)位授予單位】：華北理工大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R554.6
【目錄】：

• 摘要4-5
• Abstract5-10
• 引言10-12
• 第1章 實(shí)驗(yàn)研究12-29
• 1.1 材料與方法12-14
• 1.1.1 細(xì)胞、試劑及儀器12
• 1.1.2 實(shí)驗(yàn)分組及處理12-13
• 1.1.3 細(xì)胞培養(yǎng)13
• 1.1.4 細(xì)胞總RNA提取及cDNA合成13
• 1.1.5 RT-PCR檢測(cè)LPCAT及PAF-AH mRNA表達(dá)水平13-14
• 1.1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理14
• 1.2 結(jié)果14-18
• 1.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)結(jié)果14-15
• 1.2.2 擴(kuò)增曲線和溶解曲線圖示15-16
• 1.2.3 藥物刺激對(duì)四組細(xì)胞LPCAT mRNA的表達(dá)水平的影響16-17
• 1.2.4 藥物刺激對(duì)四組細(xì)胞PAF-AH mRNA的表達(dá)水平的影響17
• 1.2.5 藥物刺激對(duì)四組細(xì)胞PAF-AH mRNA和LPCAT mRNA的表達(dá)水平的影響的統(tǒng)計(jì)圖17-18
• 1.3 討論18-24
• 1.3.1 FⅧ的細(xì)胞來(lái)源19-20
• 1.3.2 FⅧ與vWF的關(guān)系20
• 1.3.3 DDAVP和vWF的關(guān)系20-22
• 1.3.4 PAF的代謝22-24
• 1.4 結(jié)論24
• 參考文獻(xiàn)24-29
• 第2章 綜述 DDAVP及其治療出血類疾病的研究進(jìn)展29-45
• 2.1 DDAVP化學(xué)結(jié)構(gòu)29-30
• 2.2 藥物動(dòng)力學(xué)、藥理作用及其機(jī)制30-32
• 2.2.1 藥物動(dòng)力學(xué)30
• 2.2.2 藥理作用30-31
• 2.2.3 藥理作用機(jī)制31-32
• 2.3 DDAVP給藥方式32
• 2.4 DDAVP的用量32-33
• 2.5 DDAVP副作用及預(yù)防33-34
• 2.6 血友病A34-38
• 2.6.1 血友病A的遺傳學(xué)方面的進(jìn)展34-35
• 2.6.2 血友病A分子病理學(xué)方面的進(jìn)展35-36
• 2.6.3 血友病A的臨床表現(xiàn)36-37
• 2.6.4 血友病A的DDAVP治療37-38
• 2.7 血管性血友病38-40
• 2.7.1 發(fā)病原因以及遺傳學(xué)方面的研究進(jìn)展38
• 2.7.2 分子病理學(xué)方面的研究進(jìn)展38-39
• 2.7.3 臨床表現(xiàn)39-40
• 2.7.4 DDAVP的治療40
• 2.8 DDAVP在其他方面的應(yīng)用40-41
• 2.9 總結(jié)41-42
• 2.9.1 優(yōu)點(diǎn)41
• 2.9.2 缺點(diǎn)41-42
• 2.9.3 DDAVP在國(guó)內(nèi)的應(yīng)用42
• 參考文獻(xiàn)42-45
• 結(jié)論45-46
• 致謝46-47
• 導(dǎo)師簡(jiǎn)介47-49
• 作者簡(jiǎn)介49-50
• 學(xué)位論文數(shù)據(jù)集50

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