【摘要】：研究背景—微血栓是動脈血栓和心肌梗死發(fā)生發(fā)展中的重要起始環(huán)節(jié)。微血栓破壞微血管環(huán)境并增加了心衰、心律不齊和死亡的發(fā)生概率。血小板異常活化被認(rèn)為是微血栓形成的首要因素。然而,血小板活化在缺血性微栓塞中的作用機(jī)制尚不清楚。哺乳動物雷帕霉素靶點(Mammalian target of rapamycin,m TOR)對于細(xì)胞的增殖和代謝十分重要,其主要通過活化AGC激酶,包括Akt,血清/糖皮質(zhì)激素誘導(dǎo)蛋白激酶(Serum/glucocorticoid induced kinase,SGK)和蛋白激酶C(protein kinase C,PKC),對營養(yǎng)物質(zhì)、應(yīng)激以及活性氧(reactive oxygen species,ROS)產(chǎn)生應(yīng)答,發(fā)揮功能。本研究中發(fā)現(xiàn)在缺血缺氧誘導(dǎo)的微栓塞中,Sin1作為m TORC2復(fù)合體中重要組分,正向調(diào)控整合素介導(dǎo)的信號通路以及低氧應(yīng)答中的血小板活化。研究方法和結(jié)果—我們研究發(fā)現(xiàn)在收集的接受非體外循環(huán)心臟不停搏冠狀動脈旁路移植手術(shù)(off-pump coronary artery bypass grafting,OPCABG)的心�；颊唛]塞冠脈遠(yuǎn)端的血小板內(nèi),m TORC2下游底物Akt S473位磷酸化水平顯著上調(diào)。并且Akt S473位上游重要調(diào)控分子Sin1 T86位磷酸化程度也呈較高水平。重要的是,在61例STEMI心梗病人的血小板內(nèi)Sin1和Akt磷酸化水平上調(diào)的程度與PCI術(shù)后無復(fù)流事件的發(fā)生有較高的相關(guān)性(相對Akt S473磷酸化水平:OR值為3.62,95%置信區(qū)間為1.75-7.48,P0.01;相對Sin1 T86磷酸化水平:OR值為2.12,95%置信區(qū)間為1.30-3.46,P0.01)。由此,我們構(gòu)建了血小板Sin1特異性敲除小鼠和Sin1 T86位磷酸化缺陷的小鼠,以研究心梗事件中血小板的活化機(jī)制。我們發(fā)現(xiàn)Sin1 T86位發(fā)生磷酸化可調(diào)控m TORC2介導(dǎo)的下游信號以及整合素αIIbβ3介導(dǎo)的外向內(nèi)信號通路。在低氧狀態(tài)下,Sin1通過部分抑制SOD2和Sirt3的水平而調(diào)控血小板ROS的產(chǎn)生。更重要的是,在小鼠心臟左前降支結(jié)扎模型中,血小板Sin1缺失顯著地降低了小鼠心肌缺血所誘導(dǎo)的微血管栓塞和心臟功能障礙。研究結(jié)論—綜上所述,我們的研究首次揭示了Sin1在調(diào)控血小板活化中的關(guān)鍵作用。血小板Sin1可能是有效預(yù)防缺氧誘導(dǎo)的心肌梗死重要的潛在治療靶點。
【學(xué)位授予單位】：上海交通大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號】：R54
【圖文】：

Figure 4. MP-Sin1-/-mice exhibited圖 4.巨核細(xì)胞/血小板 Sin1 缺失小鼠心梗后呈mTORC1/2 抑制劑 PP242 處理后的 Akt S473 和小板 Akt，Sin1，Rictor 和 mTOR 表達(dá)水平。（C）各組小鼠數(shù)目為 15 只。（D）MP-Sin1-/-和 Sin1況。（E）MP-Sin1-/-小鼠 LAD 手術(shù)后第三天的照組 Sin1f/f小鼠 (n=5, P<0.01)。（F）MP-Sin

Figure 6. Sin1 regulates platelet activation sign圖 6. Sin1 通過整合素介導(dǎo)的外向內(nèi)信號途徑U46619 和 ADP 刺激下，Sin1 缺失的血小板聚集和 ADP 刺激下，Sin1f/f和 Sin1-/-血小板內(nèi) Akt SThrombin 刺激下，Sin1f/f與 Sin1-/-血小板結(jié)合血小板在固相纖維蛋白原上的鋪展。隨機(jī)選取血小板在 Thrombin 刺激下的栓塊收縮。分別在對栓塊收縮效率進(jìn)行

Figure 7. Sin1 amplifies αIIbβ3-mediate圖7. Sin1調(diào)控放大αIIbβ3介導(dǎo)的Akt S473和PDK1 抑制劑 OSU03012 以及 Akt 抑制劑 MK2隨機(jī)選擇并拍攝三個血小板鋪展視野進(jìn)行統(tǒng)計OSU03012 以及 MK2206 處理后，在固相纖維板鋪展視野進(jìn)行統(tǒng)計分析。（C）經(jīng) DMSO、O以及人的血小板在鋪展?fàn)顟B(tài)下 Akt S473

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2 劉杰,張克勤,黃純?nèi)?王陸軍,張文賢,高京生,王仕軍;缺氧復(fù)合肺微栓塞對大鼠肺含水量的影響[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報;1988年05期

3 高京生;羅德成;田景亮;王仕軍;;缺氧復(fù)合肺微栓塞對大鼠肺含水量的影響[J];中國應(yīng)用生理學(xué)雜志;1989年02期

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本文編號：2796900