【摘要】：動脈粥樣硬化(Atherosclerosis,AS)及其并發(fā)癥是導致人類死亡的“頭號殺手”,也是心血管疾病的主要危險因素之一。大量研究表明,動脈粥樣硬化是一種復雜的多因素慢性炎性血管疾病,其中血管平滑肌細胞(Vascular Smooth Muscle Cell;VSMC)的異常增殖是其關(guān)鍵因素。因此,靶向治療平滑肌細胞的異常增殖已經(jīng)成為治療動脈粥樣硬化的熱點。小核糖核酸(microRNA;miRNA)是長度約為22個核苷酸的小的非編碼核糖核酸。miRNA是一種高效且特異的基因調(diào)節(jié)因子,可調(diào)節(jié)靶蛋白并參與基本的生物過程(包括細胞分化,增殖,凋亡和細胞信號傳導途徑),在基因的轉(zhuǎn)錄后調(diào)節(jié)中起重要作用。小窩蛋白-1(Caveolin-1;Cav-1)能夠在抑制腫瘤的生長,調(diào)節(jié)肺泡的呼吸作用,介導胞吞作用與信號等方面起重要作用。但是Cav-1在SD大鼠VSMC中的作用還尚未見相關(guān)報道。為了探究Cav-1蛋白在大鼠VSMC中的作用,本實驗培養(yǎng)并鑒定SD大鼠平滑肌原代細胞,應用SiRNA干擾Cav-1的表達確定Cav-1對細胞增殖起負調(diào)控作用。通過TargetScan預測,Cav-1與miR-204-5p之間有相互作用。研究報道中指出,microRNA-204-5p(miR-204-5p)是調(diào)節(jié)細胞增殖的重要因子,在人類乳腺腫瘤,小鼠乳腺腫瘤以及淋巴瘤中都具有調(diào)節(jié)腫瘤細胞增殖的作用,在內(nèi)皮細胞中,也體現(xiàn)了凋亡相關(guān)的作用。然而,miR-204-5p是否會在VSMC中起作用,以及如何通過特定的靶基因來調(diào)節(jié)VSMC的功能,這些問題還有待于進一步的研究。為了進一步探究miR-204-5p與Cav-1的相關(guān)性及在VSMC中的作用,轉(zhuǎn)染miR-204-5p模擬物與抑制劑,檢測相關(guān)基因與蛋白的表達水平,檢測細胞活性,周期,凋亡以及關(guān)鍵通路蛋白的表達。建立SD大鼠AS模型并測定基因與蛋白水平。上述實驗證明,miR-204-5p靶向大鼠VSMC中的Cav-1,且降低Cav-1蛋白的表達、影響VSMC增殖活性、促進增殖信號通路蛋白PPI3K/PI3K的表達。初步解析了miR-204-5p及其靶基因Cav-1調(diào)控VSMC功能的作用機制,為miR-204-5p靶向Cav-1調(diào)控大鼠VSMC的相關(guān)功能提供了理論基礎。
【圖文】：

可以看見斑塊內(nèi)膜的表面破潰，有裂開，組織脫落和糜爛損細胞中釋放，形成血栓和腫塊。此時，患者會產(chǎn)生不穩(wěn)定型和猝死等癥狀[11, 12]。動脈粥樣硬化的治療方式是心血管疾病領域重大的課題之一療法、藥物療法、飲食療法、納米療法、抗炎性療法、以及療法等都是減輕或治療不同病因動脈粥樣硬化病征的良好方化和移植后動脈硬化的特征都是血管平滑肌細胞(VSMC)的的積累。平滑肌細胞異常增殖，是動脈粥樣硬化已知的一種針對平滑肌細胞增殖的治療方法是有探索意義的。

ha 切割成為前體 miRNA (pre-miRNA)。在最初的剪切后，pre-miRN蛋白 exportin-5 的作用下由核內(nèi)轉(zhuǎn)到胞質(zhì)中，然后由另一種 RNar 進一步切割產(chǎn)生成熟的 miRNA。這些成熟的 miRNA 與其他蛋白質(zhì) RISC (RNA-induced silencing complex) 復合體，，從而引起靶 mRN或者翻譯抑制[70]。miRNA 與靶 mRNA 的互補程度可能決定了 mRNA化被阻斷的機制。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)完全互補或接近完全互補可以誘導 RISA 的降解，部分互補可以通過阻斷核糖體對 mRNA 的信號通路來A 的翻譯。由于每個 miRNA 都有數(shù)百或數(shù)千個 mRNA 靶點，因此它編碼基因組的一大部分。miRNA-coding 基因的調(diào)控是有重要作用的，可以參與任何類型的病理生理過程和途徑，如 b 細胞生存(miR-1-16-1)， b 細胞譜系的命運(mir-181)，大腦模式(mir-430)，胰腺細胞胰(mir-375)，脂肪細胞發(fā)展(mir-145)細胞增殖控制(mir-125-b 和 let-7)，存(let-7 家族)。
【學位授予單位】：吉林大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2019
【分類號】：R543.5

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