發(fā)布時(shí)間：2020-04-05 09:56

【摘要】：背景與目的對(duì)氧磷酶--1(PON-1)目前被認(rèn)知為是一種存在于循環(huán)中的酯酶和內(nèi)酯酶,主要作用是運(yùn)載高密度脂蛋白,并參與脂質(zhì)代謝的諸多重要步驟。近年來(lái),很多國(guó)內(nèi)外研究詳細(xì)描述了 PON-1蛋白質(zhì)分子在動(dòng)脈粥樣硬化中的機(jī)制,而脂質(zhì)代謝紊亂是諸多疾病發(fā)生發(fā)展的始動(dòng)環(huán)節(jié),鈣化性主動(dòng)脈瓣狹窄疾病(Calcific Aortic Valve Disease,CAVD)也不例外。諸多研究提到PON-1與CAVD的病變程度有關(guān),但沒(méi)有給出詳實(shí)的描述。本次研究的目的是檢測(cè)主動(dòng)脈瓣組織中是否存在PON-1,并詳細(xì)說(shuō)明瓣膜鈣化與PON-1水平的關(guān)系。資料和方法收集118例鈣化性主動(dòng)脈瓣狹窄(Calcific Aortic Valve Stenosis,CAVS)患者作為實(shí)驗(yàn)組,根據(jù)2006年ACC/AHA心臟瓣膜病指南將實(shí)驗(yàn)組按照跨瓣最大前向血流速度(Vmax)進(jìn)一步分為輕度狹窄組(Vmax≤300cm/s)包含39例患者,中度狹窄組(300cm/sVmax≤400cm/s)包含38例患者,重度狹窄組(Vmax400cm/s)包含41例患者;同時(shí)根據(jù)術(shù)中所見(jiàn)主動(dòng)脈瓣葉數(shù)量情況,將實(shí)驗(yàn)組患者分為先天性主動(dòng)脈瓣二葉式畸形組(包含55例患者)和三葉式主動(dòng)脈瓣組(包含63例患者);另采集35例未患有鈣化性主動(dòng)脈瓣狹窄的患者作為對(duì)照組。實(shí)驗(yàn)所用的主動(dòng)脈瓣組織來(lái)源于病人術(shù)后常規(guī)病理標(biāo)本,取一部分主動(dòng)脈瓣組織經(jīng)過(guò)一系列清潔、沖洗處理后于-80℃保存,另一部分存放于4%的福爾馬林溶液中備用。我們應(yīng)用免疫組織化學(xué)染色法對(duì)主動(dòng)脈瓣組織中的PON-1蛋白分子進(jìn)行定性檢測(cè),用ELISA酶聯(lián)免疫吸附法對(duì)其進(jìn)行定量檢測(cè)。采患者肘前靜脈血進(jìn)行血液化驗(yàn)從而收集相關(guān)的血生化指標(biāo),利用心臟超聲評(píng)估主動(dòng)脈瓣狹窄的程度,通過(guò)入院病歷信息獲得患者的基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。所有數(shù)據(jù)均用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,采用單因素方差分析法對(duì)三組之間的PON-1值的差異性進(jìn)行比較,采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)法進(jìn)行兩組之間的差異性比較,采用Pearson相關(guān)法對(duì)所有病歷資料的PON-1與跨瓣最大前向血流速度(Vmax)進(jìn)行相關(guān)性進(jìn)行分析。結(jié)果1.實(shí)驗(yàn)組在吸煙史比例、低密度脂蛋白含量(LDL-C)、跨瓣最大前向血流速度(Vmax)和最大跨瓣壓差方面明顯高于對(duì)照組(P0.05);而在高密度脂蛋白含量(HDL-C)和左心室射血分?jǐn)?shù)(LVEF)方面明顯低于對(duì)照組(P0.05)。2.主動(dòng)脈瓣組織中存在PON-1蛋白分子,且實(shí)驗(yàn)組主動(dòng)脈瓣組織中PON-1的含量明顯低于對(duì)照組。實(shí)驗(yàn)組PON-1濃度為64.56-175.00nmol/L(124.31±19.67nmol/L),對(duì)照組PP0N-1濃度為193.06-296.3nmol/L(243.81±44.21 nmol/L),P0.001。PON-1含量在先天性主動(dòng)脈瓣二葉式畸形狹窄者和三葉式主動(dòng)脈瓣狹窄者之間并無(wú)明顯差異(120.56±18.18nmol/L vs 124.56±16.70 nmol/L,P=0.711)。3.輕度、中度狹窄組之間的PON-1含量并無(wú)明顯差異(130.67±15.14noml/L vs 129.10±9.90noml/L,P=0.592),但該二者與重度狹窄組之間存在明顯差異(P0.001)。4.對(duì)于整個(gè)研究群體而言,主動(dòng)脈瓣組織中PON-1的水平與跨瓣最大前向血流速度呈負(fù)相關(guān)(R=0.55)。結(jié)論1.在主動(dòng)脈瓣瓣葉組織中檢測(cè)到PON-1分子,且PON-1含量與鈣化性主動(dòng)脈瓣狹窄之間呈負(fù)相關(guān)關(guān)系。2.PON-1水平明顯減低表明主動(dòng)脈瓣已鈣化狹窄到一定水平,因此PON-1可能成為衡量CAVS嚴(yán)重程度的指標(biāo)之一。
【圖文】：

邐山東大學(xué)碩士學(xué)位論文（２）實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組的組織樣本在１０倍、２０倍、４０倍鏡下對(duì)比觀察，見(jiàn)在同等倍鏡下，實(shí)驗(yàn)組組織樣本中Ｐ０Ｎ－１的染色稀疏、欠規(guī)則，而對(duì)照組樣本中ＰＯＮ－１染色致密、排列有序。（見(jiàn)圖２）逡逑實(shí)驗(yàn)組邐對(duì)照組逡逑

４．瓣葉組織中Ｐ０Ｎ－１蛋白分子的定置檢測(cè)逡逑采用酶聯(lián)免疫吸附法（ＥＬＩＳＡ）對(duì)主動(dòng)脈瓣組織中Ｐ０Ｎ－１分子進(jìn)行定量檢測(cè)，逡逑本實(shí)驗(yàn)采用的ＥＬＩＳＡ邋Ｋｉｔ標(biāo)準(zhǔn)曲線如圖３，在此曲線下檢測(cè)并計(jì)算得實(shí)驗(yàn)組Ｐ０Ｎ－１逡逑濃度范圍為邋６４．邋５６－１７５．邋００邋ｎｍｏｌ／Ｌ，均值為邋１２４．邋３１邋士邋１９．邋６７ｎｍｏｌ／Ｌ，對(duì)照組邋Ｐ０Ｎ－１逡逑濃度范圍邋１９３．邋０６－２９６．邋３ｎｍｏｌ／Ｌ，均值為邋２４３．邋８１±４４．２１邋ｎｍｏｌ／Ｌ，邋ＰＣ０．００１，具逡逑有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，說(shuō)明對(duì)照組瓣膜內(nèi)Ｐ０Ｎ－１水平明顯高于鈣化組。（見(jiàn)表３、圖４－Ａ）逡逑１１８例實(shí)驗(yàn)組患者中有５５例屬先天性主動(dòng)脈瓣二葉式畸形，占比４６．邋６％，有逡逑６３例屬三葉式主動(dòng)脈瓣，占比５３．邋４％，兩組之間的Ｐ０Ｎ－１含量并無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異逡逑（１２０．邋５６±１８．邋１８ｎｍｏｌ／Ｌ邋ｖｓ邋１２４．邋５６±１６．邋７０邋ｎｍｏｌ／Ｌ，，邋ｐ二０．邋７１１）。（見(jiàn)表邋３、圖逡逑４－Ｂ）逡逑１．２０００邐Ｐａｒａｍｅｔｅｒ逡逑Ｒ￡：0邋州７邐＾逡逑３邋！．0000邐Ｗ？ｙｃｌ？ｉ９ｔｈ邐？５０逡逑，邐ＣｏｉＫｅｎｔｒａｔｉｏｎ邋Ｃｏｎｖｅｒｓｉｏｎ邐Ｕｎ？？ｒ逡逑＾邐．．
【學(xué)位授予單位】：山東大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類(lèi)號(hào)】：R543.1

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5 趙敏;崔s

本文編號(hào)：2614866