【摘要】：目的:研究SMO抑制劑(Jervine)對MDS細(xì)胞株MUTZ-1作用效果,囊括對Shh通路活性、細(xì)胞增殖、凋亡、周期、基因水平、蛋白水平的影響。方法:應(yīng)用CCK8法檢測加入不同濃度Jervine前后MDS細(xì)胞株MUTZ-1的增殖變化。應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)檢測加入不同濃度Jervine前后MDS細(xì)胞株MUTZ-1的凋亡及周期的變化。應(yīng)用Western blot法檢測Jervine作用于MDS細(xì)胞株MUTZ-1前后Shh信號通路效應(yīng)蛋白Bcl2、CyclinDl的蛋白水平的變化。應(yīng)用熒光實時定量PCR法檢測正常人細(xì)胞及MUTZ-1細(xì)胞株SMO基因表達水平,及Jervine作用于MDS細(xì)胞株MUTZ-1前后Shh通路中Smo、Gli1的基因表達水平。結(jié)果:MUTZ-1加入Jervine后MUTZ-1細(xì)胞增殖率有不同程度下降、MUTZ-1細(xì)胞凋亡率有不同程度的上升。加入不同濃度Jervine后G1期細(xì)胞所占比重增多,S期細(xì)胞減少,表明Jervine可使MUTZ-1細(xì)胞周期阻滯于G1期,抑制了細(xì)胞的增殖。加入Jervine后Smo、Gli1基因表達水平及Bcl2、CyclinDl蛋白水平有所下降,Jervine在基因水平、蛋白水平都可以抑制Shh信號通路的相關(guān)基因。結(jié)論:SMO抑制劑作用于MDS細(xì)胞株MUTZ-1后,抑制細(xì)胞的增殖,增加其凋亡率,下調(diào)Shh信號通路下游靶基因表達。Shh信號的活化參與了MDS的發(fā)生、發(fā)展,Shh信號通路的活化對MDS發(fā)生及發(fā)展起重要作用。SMO抑制劑可抑制Shh信號通路相關(guān)基因的表達,證實了SMO抑制劑對Shh信號通路的抑制作用,進而為骨髓增生異常綜合征治療提供了一個新的思路。
【圖文】：

圖2 MUTZ-1細(xì)胞株與正常人SMO基因表達比較Fig.2 Comparison of SMO gene expression between mutz-1 cell line and normal subje SMO抑制劑對MUTZ-1細(xì)胞生長的影響用 CCK8 法檢測 MUTZ-1 細(xì)胞加入 SMO 抑制劑(Jervine)后增殖率，以不制劑細(xì)胞作為對照組。對照組增殖率為100%，加入1um Jervine增殖率為93.入 5um Jervine 增殖率為 87.9%，加入 10um Jervine 增殖率為 78.8%。各個對照組相比均有統(tǒng)計學(xué)意義，p＜0.001。三個濃度相比：P＜0.001。表明不制劑濃度對細(xì)胞增殖率有不同程度抑制，，隨著抑制劑濃度加大增殖率有明。表明 SMO 抑制劑可抑制 MUTZ-1 細(xì)胞的生長。

圖3不同濃度SMO抑制劑對MUTZ-1細(xì)胞生長的影響Fig.3 Effects of SMO inhibitors at different concentrations on mutz-1 cell growthO 抑制劑對 MUTZ-1 細(xì)胞凋亡率、周期的影響MUTZ-1凋亡率的影響流式檢測 MUTZ-1 細(xì)胞加入 SMO 抑制劑(Jervine)前后凋亡率，以不加抑制劑為對照組。不加抑制劑凋亡率為 3.29%，加入 1umJervine 凋亡率為 5.74%，加 Jervine 凋亡率為 10.77%，加入 10um Jervine 凋亡率為 17.89%。各個濃度同相比均有統(tǒng)計學(xué)意義，p＜0.001。三個濃度相比：P＜0.001。顯示細(xì)胞凋亡率vine 劑量成正相關(guān)。表6加入不同濃度SMO抑制劑MUTZ-1細(xì)胞凋亡率的變化Table 6 Changes of apoptosis rate of MUTZ-1 cells with different concentrations of SMOinhibitor were added組別 凋亡率
【學(xué)位授予單位】：新疆醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號】：R551.3

【參考文獻】

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本文編號：2609789