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HDAC3在H9C2細胞缺血再灌注損傷中的表達及干預機制

發(fā)布時間:2019-07-11 14:16
【摘要】:目的探討組蛋白去乙;3(HDAC3)在大鼠H9C2心肌細胞缺血再灌注損傷中的表達及其部分機制研究。方法將H9C2細胞分為以下3組:正常對照組、缺血/再灌注(I/R)組、I/R+曲古霉素(TSA)組。MTT法檢測細胞增殖活力;檢測培養(yǎng)液中乳酸脫氫酶(LDH)水平;Western blot法測定細胞內(nèi)HDAC3蛋白表達水平;實時熒光定量PCR檢測HDAC3 mRNA表達情況。結果 MTT法檢測結果顯示:與正常對照組比較,I/R組、I/R+TSA組抑制率均顯著提高,并且I/R組顯著高于I/R+TSA組;I/R組LDH活性明顯高于正常對照組,I/R+TSA組顯著低于I/R組;Western blot檢測顯示:I/R組、I/R+TSA組HDAC3的表達明顯高于正常對照組,I/R+TSA組顯著低于I/R組;實時熒光定量PCR檢測I/R組、I/R+TSA組HDAC3的mRNA表達明顯高于正常對照組,I/R+TSA組顯著低于I/R組。結論HDAC3表達上調可能在H9C2細胞缺血再灌注損傷中起到重要作用。
文內(nèi)圖片:MTT法檢測細胞活性1:正常對照組;2:I/R組;3:I/R+TSA組;與正常對照組:*P<
圖片說明: x±s表示,組間比較采取兩樣本t檢驗,多組均數(shù)比較應采用方差分析,檢驗水準P<0.05差異有統(tǒng)計學意義。2結果2.1MTT結果顯示與正常對照組相比,I/R組細胞增殖活性明顯降低(t=4.38,P<0.05),I/R+TSA組增殖活性明顯低于正常對照組(t=3.84,P<0.05),但高于I/R組,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見圖1。2.2LDH含量檢測與正常對照組(24.52±2.34)相比,I/R組(75.13±5.22)細胞培養(yǎng)液LDH含量明顯增高(t=6.35,P<0.05),I/R+TSA組明顯低于I/R組(53.23±3.86)(t=3.76,P<0.05),差異有統(tǒng)計學意義。見圖2。圖1MTT法檢測細胞活性1:正常對照組;2:I/R組;3:I/R+TSA組;與正常對照組:*P<0.05;與I/R組比較:#P<0.05圖2細胞LDH活性檢測1:正常對照組;2:I/R組;3:I/R+TSA組;與正常對照組:*P<0.05;與I/R組比較:#P<0.052.3Westernblot檢測結果與正常對照組相比,I/R組細胞HDAC3蛋白表達顯著升高(t=6.23,P<0.05),I/R+TSA組明顯低于I/R組(t=5.06,P<0.05),差異有統(tǒng)計學意義。見圖3。2.4qRT-PCR檢測HDAC3mRNA的表達與正常對照組比較,I/R組中HDAC3mRNA表達明顯增加(t=10.13,P<0.05),而I/R組中HDAC3蛋白表達高于I/R+TSA組(t=7.85,P<0.05),差異有統(tǒng)計學意義。見圖4。3討論本研究通過檢測心肌細胞增殖活性、細胞外LDH含量證實了缺血再灌注對心肌細胞活力的影響。結果顯示I/R組、I/R+TSA組細胞增殖活力明安徽醫(yī)科大學學報ActaUniversitatisMedicinalisAnhui2017May;52(5)·675·
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圖片說明: ?s藊±s表示,組間比較采取兩樣本t檢驗,多組均數(shù)比較應采用方差分析,檢驗水準P<0.05差異有統(tǒng)計學意義。2結果2.1MTT結果顯示與正常對照組相比,I/R組細胞增殖活性明顯降低(t=4.38,P<0.05),I/R+TSA組增殖活性明顯低于正常對照組(t=3.84,P<0.05),但高于I/R組,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見圖1。2.2LDH含量檢測與正常對照組(24.52±2.34)相比,I/R組(75.13±5.22)細胞培養(yǎng)液LDH含量明顯增高(t=6.35,P<0.05),I/R+TSA組明顯低于I/R組(53.23±3.86)(t=3.76,P<0.05),差異有統(tǒng)計學意義。見圖2。圖1MTT法檢測細胞活性1:正常對照組;2:I/R組;3:I/R+TSA組;與正常對照組:*P<0.05;與I/R組比較:#P<0.05圖2細胞LDH活性檢測1:正常對照組;2:I/R組;3:I/R+TSA組;與正常對照組:*P<0.05;與I/R組比較:#P<0.052.3Westernblot檢測結果與正常對照組相比,I/R組細胞HDAC3蛋白表達顯著升高(t=6.23,P<0.05),,I/R+TSA組明顯低于I/R組(t=5.06,P<0.05),差異有統(tǒng)計學意義。見圖3。2.4qRT-PCR檢測HDAC3mRNA的表達與正常對照組比較,I/R組中HDAC3mRNA表達明顯增加(t=10.13,P<0.05),而I/R組中HDAC3蛋白表達高于I/R+TSA組(t=7.85,P<0.05),差異有統(tǒng)計學意義。見圖4。3討論本研究通過檢測心肌細胞增殖活性、細胞外LDH含量證實了缺血再灌注對心肌細胞活力的影響。結果顯示I/R組、I/R+TSA組細胞增殖活力明安徽醫(yī)科大學學報ActaUniversitatisMedicinalisAnhui2017May;52(5)·675·
【作者單位】: 安徽醫(yī)科大學第二附屬醫(yī)院心胸外科安徽醫(yī)科大學心血管病研究中心
【基金】:國家自然科學基金項目(編號:81570295) 安徽省科技攻關項目(編號:1501041148) 安徽省高校自然科學研究項目(編號:KJ2015A320)
【分類號】:R54

【參考文獻】

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【共引文獻】

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【二級參考文獻】

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本文編號:2513225

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