天堂国产午夜亚洲专区-少妇人妻综合久久蜜臀-国产成人户外露出视频在线-国产91传媒一区二区三区

PBMC分泌的miR-4306通過VEGFA調(diào)控人冠狀動脈內(nèi)皮細胞的遷移和增殖

發(fā)布時間:2018-11-06 19:30
【摘要】:研究背景:人外周血單核細胞(Peripheral blood mononuclear cell,PBMC)分泌的微顆粒(Microparticles,MP)參與冠心病發(fā)病機制(脂質(zhì)代謝紊亂、炎癥免疫反應等)中所涉及的多種病理生理途徑。我們的前期研究發(fā)現(xiàn),冠心病患者PBMC來源的MP(PBMC-MP)中的miR-4306表達較健康人明顯增加,但PBMC-MP中的miR-4306與冠心病的病情關(guān)系及miR-4306對人冠狀動脈內(nèi)皮細胞(Human coronary artery endothelial cells,HCAECs)的作用及機制仍不清楚。目的:本研究旨在探討冠心病患者PBMC-MP中miR-4306與冠心病的病情關(guān)系及miR-4306對HCAECs的作用及機制。方法:1.臨床實驗分組:血液標本分別來自對照人群(健康人)和冠心病人群。分組如下:對照組、單支病變組、多支病變組;對照組、擇期PCI組、急診PCI組。2.細胞實驗分組:根據(jù)不同實驗目的,分為PBMC-MP對照組、PBMC-MP擇期PCI組、PBMC-MP急診PCI組;Control組、miR-4306mimics組;Control組、miR-4306 inhibitor組。3.采取實驗對象全血9 ml,提取PBMC-MP,流式細胞術(shù)證實MP是否來源于PBMC。qRT-PCR檢測健康人和冠心病患者PBMC-MP中miR-4306的表達水平。4.雙熒光素酶報告基因測試miR-4306對SLC16A2基因和VEGFA基因是否有靶向調(diào)控作用。5.免疫熒光證實hcaecs是否吞噬mp,qrt-pcr檢測不同時間段hcaecs吞噬mp后mir-4306的表達水平。westernblot、乳酸試劑盒、transwell小室、cck8分別檢測hcaecs吞噬mp后slc16a2和vegfa的蛋白表達水平、hcaecs的乳酸代謝、遷移和增殖能力。6.用negativecontrol,hsa-micro-4306-mimics,micrornainhibitorn.c,hsa-micro-4306-inhibitor分別轉(zhuǎn)染hcaecs,qrt-pcr檢測hcaecs中mir-4306的表達水平。westernblot、乳酸試劑盒、transwell小室、cck8分別檢測hcaecs的slc16a2和vegfa的蛋白表達水平、乳酸代謝、遷移和增殖能力。結(jié)果:1.與對照組相比,單支病變組和多支病變組pbmc-mp中的mir-4306表達明顯增加(p0.05和p0.01),且多支病變組中mir-4306的表達明顯高于單支病變組(p0.05)。與對照組相比,擇期pci組和急診pci組pbmc-mp中mir-4306的表達增加(p0.05和p0.01),且急診pci組中mir-4306的表達明顯高于擇期pci組(p0.01)。2.雙熒光素酶報告基因測試結(jié)果表明hsa-mir-4306對slc16a2基因和vegfa基因有中度靶向調(diào)控作用。3.hcaecs于12~24h和24~36h兩個時間段吞噬mp能力最強,并且hcaecs吞噬mp后mir-4306的表達于12h突然增加,于36h達到最高峰值后開始下降。4.slc16a2蛋白表達在pbmc-mp對照組、pbmc-mp擇期pci組和pbmc-mp急診pci組之間無明顯差異(p0.05),同時hcaecs的乳酸代謝值在三組間無明顯變化(11.47±0.72 mM、13.4±0.53 mM、14.2±0.39 mM,P0.05)。PBMC-MP擇期PCI組中VEGFA蛋白的表達明顯低于PBMC-MP對照組(P0.05);與PBMC-MP對照組相比,PBMC-MP擇期PCI組中HCAECs的遷移能力明顯下降(P0.05),HCAECs的增殖能力于24~48 h時下降最顯著(P0.05)。5.與各自對照相比,miR-4306 mimics組和miR-4306 inhibitor組可明顯增加和降低HCAECs中miR-4306的表達(P0.01和P0.01),同時抑制和上調(diào)SLC16A2和VEGFA蛋白的表達(P0.01和P0.01;P0.05和P0.05)。與各自對照組相比,miR-4306 mimics組和miR-4306 inhibitor組的乳酸代謝能力沒有差別(乳酸代謝值分別為12.86±0.29 mM,11.43±0.41 mM,P0.05;12.14±0.18 mM,13.57±0.57 mM,P0.05)。與各自對照相比,miR-4306 mimics組和miR-4306 inhibitor組分別降低和增加HCAECs的遷移能力(P0.01和P0.01),不改變HCAECs的增殖能力(P0.05和P0.05)。結(jié)論:1、miR-4306抑制HCAECs中靶基因VEGFA的蛋白表達,降低HCAECs的遷移和增殖能力;miR-4306抑制HCAECs中靶基因SLC16A2的蛋白表達,但對HCAECs的乳酸代謝沒有影響。2、與健康人相比,冠心病患者PBMC-MP中miR-4306表達增加,并且與冠脈病變的嚴重程度和病情急緩呈正相關(guān)。
[Abstract]:......
【學位授予單位】:川北醫(yī)學院
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2017
【分類號】:R541.4

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前5條

1 陳偉偉;高潤霖;劉力生;朱曼璐;王文;王擁軍;吳兆蘇;李惠君;顧東風;楊躍進;鄭哲;蔣立新;胡盛壽;;《中國心血管病報告2015》概要[J];中國循環(huán)雜志;2016年06期

2 許苗苗;沈偉;施海明;;單核細胞在冠心病發(fā)生和發(fā)展中的作用研究進展[J];中華心血管病雜志;2016年04期

3 陳偉偉;高潤霖;劉力生;朱曼璐;王文;王擁軍;吳兆蘇;李惠君;鄭哲;蔣立新;胡盛壽;;《中國心血管病報告2014》概要[J];中國循環(huán)雜志;2015年07期

4 楊壽娟;張穎;劉寅;;冠心病患者外周血中miRNA-21的表達水平及其臨床意義[J];中國應用生理學雜志;2015年02期

5 王虹;林英忠;陸紅梅;周瑩;羅程;陸山河;趙林;劉斐;;ST段抬高型心肌梗死患者循環(huán)微RNA-92a表達的研究[J];中國危重病急救醫(yī)學;2011年12期

,

本文編號:2315245

資料下載
論文發(fā)表

本文鏈接:http://www.sikaile.net/yixuelunwen/xxg/2315245.html


Copyright(c)文論論文網(wǎng)All Rights Reserved | 網(wǎng)站地圖 |

版權(quán)申明:資料由用戶33d05***提供,本站僅收錄摘要或目錄,作者需要刪除請E-mail郵箱bigeng88@qq.com