【摘要】：目的探討miR-451對心肌細(xì)胞缺氧再復(fù)氧損傷的保護作用及其心肌細(xì)胞高遷移率族蛋白1(HMGB1)表達(dá)變化。方法培養(yǎng)乳鼠心室肌細(xì)胞,制備缺氧再復(fù)氧模型,并隨機分為對照組(Con組)、缺氧再復(fù)氧組(AR組)、AR+Ad-GFP組(空病毒組)、AR+Ad-miR-451組(miR-451上調(diào)組)、AR+Ad-asmiR-451組(miR-451下調(diào)組)。檢測五組心肌細(xì)胞存活率、凋亡率以及HMGB1 mRNA、HMGB1和激活細(xì)胞凋亡蛋白酶3(caspase-3)表達(dá)水平。利用熒光素酶檢測法在HEK293細(xì)胞中進(jìn)一步確認(rèn)miR-451對HMGB1作用靶點。結(jié)果與Con組比較,AR組、空病毒組、miR-451上調(diào)組、miR-451下調(diào)組心肌細(xì)胞存活率降低、凋亡率增高,心肌細(xì)胞HMGB1 mRNA、HMGB1、激活caspase-3表達(dá)增高(P均0.05)。與AR組比較,Ad-miR-451組心肌細(xì)胞存活率增高、凋亡率降低,心肌細(xì)胞HMGB1 mRNA、HMGB1、激活caspase-3表達(dá)降低(P均0.05)。miR-451識別HMGB1 mRNA的3'端非編碼區(qū)并以此為作用靶點抑制HMGB1表達(dá)。結(jié)論上調(diào)miR-451對心肌細(xì)胞缺氧再復(fù)氧損傷有保護作用,此作用是通過miR-451抑制HMGB1 mRNA表達(dá)而實現(xiàn)的。
[Abstract]:Objective to investigate the protective effect of miR-451 on myocardial anoxia and reoxygenation injury and the change of high mobility group protein 1 (HMGB1) expression in cardiac myocytes. Methods the rat ventricular myocytes were cultured and the model of anoxic reoxygenation was prepared and divided into control group (group Con), anoxic reoxygenation group (group AR), AR+Ad-GFP group (air virus group), AR+Ad-miR-451 group (miR-). 451 up regulation group), group AR+Ad-asmiR-451 (miR-451 down-regulation). The survival rate, the rate of apoptosis and the expression of HMGB1 mRNA, HMGB1 and activated protease 3 (caspase-3) were detected in the five groups. The target of miR-451 to HMGB1 was further confirmed by luciferase detection in HEK293 cells. The results were compared with the Con group, AR group, and the empty virus group. In the up regulation group of miR-451, the survival rate of myocardial cells decreased, the rate of apoptosis increased, the myocardial cells HMGB1 mRNA, HMGB1, and the activation of Caspase-3 expression increased (P 0.05). Compared with the AR group, the survival rate of cardiac myocytes in the Ad-miR-451 group increased, the apoptosis rate decreased, the cardiomyocyte HMGB1 mRNA, HMGB1, the activation of the expression decreased (0.05). The non coding region of the 3'terminal of GB1 mRNA is used as a target to inhibit the expression of HMGB1. Conclusion up regulation of miR-451 has a protective effect on myocardial anoxia and reoxygenation damage. This effect is achieved through the inhibition of the expression of HMGB1 mRNA by miR-451.
【作者單位】： 武漢大學(xué)人民醫(yī)院;
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助項目(81370308)
【分類號】：R542.2

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本文編號：2144162