【摘要】：目的本文報道一種基于復合酶消化法進行改良的大鼠胸主動脈血管平滑肌細胞的分離方法。方法采用膠原酶、胰肽酶復合酶對胸主動脈進行初步消化去除內(nèi)外膜、再對中膜進行二次消化釋放血管平滑肌細胞。結(jié)果細胞分離后貼壁生長,多具梭形形態(tài),呈現(xiàn)典型的"峰-谷"生長狀態(tài),1周可進行傳代;多種收縮型血管平滑肌細胞的分子標記基因均在所分離培養(yǎng)的細胞中高表達;超過95%的細胞為alpha smooth muscle actin(α-SMA)和myosin-II顯著陽性。結(jié)論本分離方法簡捷易行、重復性好,所得細胞活性佳、純度高,可確保短時間內(nèi)獲得大量收縮型血管平滑肌細胞。
[Abstract]:Aim to report a modified method for isolation of vascular smooth muscle cells from rat thoracic aorta based on complex enzyme digestion. Methods the internal and external membrane of thoracic aorta was preliminarily digested by collagenase and tryptidase complex enzyme, and vascular smooth muscle cells were released by secondary digestion of the middle membrane. Results the cells were adherent to the wall and grew in fusiform shape, showing a typical "peak-valley" growth state for one week, and the molecular marker genes of many constrictive vascular smooth muscle cells were highly expressed in the isolated and cultured cells. More than 95% of the cells were alpha smooth muscle actin (偽 -SMA) and myosin-II positive. Conclusion this method is simple, reproducible, and has high activity and purity, which can ensure the production of a large number of constrictive vascular smooth muscle cells in a short time.
【作者單位】： 西南交通大學材料先進技術(shù)教育部重點實驗室;西南交通大學材料科學與工程學院;
【基金】：國家自然科學基金(編號:81371675,81330031)
【分類號】：R54

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