本文關(guān)鍵詞： 腹主動脈瘤 丹參酮ⅡA 基質(zhì)金屬蛋白酶 促炎因子 氧化應(yīng)激 Toll樣受體 髓樣分化因子88 核因子κB　出處：《南京大學(xué)》2015年博士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：第一部分 彈力蛋白酶誘導(dǎo)大鼠腹主動脈瘤模型的建立與改進目的：建立符合要求的腹主動脈瘤動物模型從而給本研究建立基礎(chǔ)。方法：首先按文獻報道建立彈力蛋白酶誘導(dǎo)的大鼠腹主動脈瘤模型。用50只S-D大鼠,隨機分成5組,分別接受生理鹽水及彈力蛋白酶(0.1U/μL、1U/μL、10U/μL、 100U/μL)灌注30分鐘造模,B超監(jiān)測腹主動脈內(nèi)徑變化并于造模術(shù)后28天取標本,明確最適造模濃度。再用30只S-D大鼠,隨機分成3組,以最適濃度灌注不同時間(1min,10min,30min),B超監(jiān)測腹主動脈內(nèi)徑變化并于造模術(shù)后28天取標本,明確最適造模濃度。結(jié)果：在成功建立大鼠腹主動脈瘤基礎(chǔ)上,得出改進后生理鹽水組存活率為100%,其余各組均為90%,生理鹽水及0.1U/μL彈力蛋白酶灌注組的成瘤率為0,而1U/μL、10 U/μL、100 U/μL灌注組成瘤率為100%,在建立腹主動脈成功組中,灌注濃度與腹主動脈擴張程度無關(guān)(P=0.136及P=0.261)。在以1 U/μL彈力蛋白酶灌注時,30min組存活率為90%,其余兩組存活率為100%,1min組成瘤率為70%,10mmin與30min組為100%,灌注時間越長,腹主動脈擴張越明顯(P=0.000及P=0.007)。結(jié)論：本研究以1U/μL濃度的彈力蛋白酶灌注大鼠腹主動脈10min建立腹主動脈瘤動物模型技術(shù)上是可行的,同時可提高存活率和減少不必要的浪費,可為后續(xù)實驗提供穩(wěn)定高效平臺。第二部分 丹參酮ⅡA對大鼠腹主動脈瘤的干預(yù)和效果目的：研究丹參酮ⅡA對實驗性大鼠腹主動脈瘤的抑制作用。方法：SD雄性大鼠36只隨機平均分成實驗組、對照組、空白組。實驗組與對照組予胰彈力蛋白酶灌注腎下段腹主動脈,空白組予生理鹽水灌注。實驗組自造模前1天起全程腹腔內(nèi)注射2mg/d (10ml)丹參酮ⅡA,對照組與空白組予等量生理鹽水腹腔內(nèi)注射。術(shù)前7天和術(shù)后第7、14、21、28 d使用多普勒超聲測量動脈瘤最大處內(nèi)徑并測量動脈收縮壓。術(shù)后28 d取腹主動脈觀察組織學(xué)變化并通過免疫組化、ELISA法、Western blot法、RT-PCR方法進行分析。結(jié)果：術(shù)后28 d實驗組腹主動脈瘤直徑較對照組明顯減小(TanⅡA vs control, 0.23±0.023 vs 0.31±0.038, t=5.62, p0.001),但各組血壓手術(shù)前后無明顯變化(p值分別為0.226,0.287,0.304)。實驗組標本彈性纖維含量明顯高于對照組(Tan ⅡA vs control,14.6±3.3 vs 7.6±2.6, t=5.09, p0.001),管壁結(jié)構(gòu)較完整保存。實驗組基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)-2與MMP-9在mRNA轉(zhuǎn)錄(TanⅡA vs control, MMP-2,1.52±0.44 vs 2.14±0.54 t=2.76,p=0.007; MMP-9,1.35±0.44 vs 2.76±0.77, t=5.48,P=0.001)和蛋白質(zhì)表達水平上均較對照組明顯下降(TanⅡA vs control, MMP-2,1.85±0.27 vs 3.61±0.31, t=13.18, p 0.001; MMP-9,2.28±0.23 vs 3.84±0.28, t=13.30, p0.001), TIMP-1與TIMP-2在轉(zhuǎn)錄水平得到明顯提升(TanⅡA vscontrol, TIMP-1,0.93±0.26 vs 0.48±0.18, t=4.34, p0.001; TIMP-2,3.11±0.58 vs 0.41±0.17,t=13.42,p0.001),同時單核細胞趨化蛋白-1(MCP-1)、白介素-6(IL-6)、誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(iNOS)、8-羥化鳥苷酸(8-OHdG)、8-異前列腺素(8-isoprostane)表達則明顯較對照組明顯減少(Tan ⅡA vs control, MCP-1, 0.68±2.45 vs 0.39±1.55, t=9.67,p0.001; IL-6,48.3±9.7 vs 144.2±13.9, t=17.59, p0.001; iNOS,0.52±3.24 vs 1.22±4.37,t=12.19,p0.001; 8-OHdG,1.60±0.21 vs 2.46±0.27, t=7.83, p0.001; 8-isoprostane, Tan ⅡA vs Control,13.38±3.27 vs 28.84±5.53,t=7.51, p0.001;), IL-1β和TNF-α的mRNA水平得到顯著提升(Tan Ⅱ Avs control, IL-1β,0.73±0.19 vs 1.35±0.22, t=6.59, p0.001; TNF-α,0.68±0.19 vs 2.07±0.36, t=10.69,p0.001)。結(jié)論：從大體結(jié)果中得出丹參酮ⅡA可以顯著抑制腹主動脈瘤的擴張,從細胞水平可見丹參酮ⅡA保護血管平滑肌細胞,從分子水平上表明丹參酮ⅡA可以抑制MMP-2和MMP-9的表達,抑制TIMP-1和TIMP-2的轉(zhuǎn)錄水平,減弱MCP-1和IL-6的表達,降低IL-1β和TNF-α的轉(zhuǎn)錄,弱化炎癥反應(yīng),減少iNOS的合成,減輕氧化應(yīng)激損傷,導(dǎo)致8-isoprostane和8-OHdG生成減少。第三部分丹參酮ⅡA與MyD88依賴性TLR-4通路在抑制腹主動脈瘤中的關(guān)系目的：探索丹參酮ⅡA與是否對髓樣分化因子88(MyD88)依賴性Toll樣受體(TLR)-4通路抑制實現(xiàn)抑制實驗性大鼠腹主動脈瘤擴張。方法：雄性SD大鼠(每組12只)隨機分為三組：Tan ⅡA組、對照組和空白組。Tan IIA組和對照組經(jīng)主動脈內(nèi)灌注彈性蛋白酶誘導(dǎo)腹主動脈瘤,假手術(shù)組灌注生理鹽水。Tan IIA組大鼠給予Tan IIA(2mg/只/天)。灌注后24d,采集腹主動脈樣本,使用RT-PCR, Western blot、免疫組化和免疫熒光方法進行評價。結(jié)果：取標本后的多種檢測方法共同表明丹參酮ⅡA干預(yù)使得在對照組出現(xiàn)高強度強烈表達的TLR-4、MyD88、磷酸化核因子KB(pNF-KB)和磷酸化IκBα(pIκBα)在實驗組中表達顯著減少(TLR-4,0.82316±0.22vs 1.14120±0.29, t=-2.62,p=0.017; MyD88,0.63919±0.26 vs 0.99909±0.22, t=-3.17, p=0.006; pNF-∈B,1.51225±0.40 vs 2.92694±0.49, t=-6.71, p0.001; pIicBa,1.07369±0.16 vs 1.31090±0.18, t=-2.95, p=0.008)。結(jié)論：MyDS8依賴性TLR-4信號通路激活NF-∈B導(dǎo)致多種致病蛋白高表達,在腹主動脈瘤病理過程中起到重要作用,丹參酮ⅡA抑制這條通路,顯著降低通路蛋白表達,最終實現(xiàn)抑制腹主動脈瘤擴張的效果。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：南京大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R543.16

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前8條

1 楊征;邱敏;;丹參酮ⅡA的心血管作用及機制研究進展[J];中國動脈硬化雜志;2011年04期

2 張玉靜;楊星林;任長杰;;丹參酮ⅡA對心血管影響研究的進展[J];臨床薈萃;2009年18期

3 劉志民;孫亮亮;;氧化應(yīng)激在糖尿病發(fā)病機制中作用的認識[J];內(nèi)科理論與實踐;2007年03期

4 劉長建;商_";劉昭;;腹主動脈瘤的藥物治療研究進展[J];中國血管外科雜志(電子版);2010年04期

5 張萌濤;錢亦華;唐安琪;;丹參酮ⅡA藥理作用的研究進展[J];醫(yī)學(xué)綜述;2010年17期

6 張民;張驊;徐鵬;蘇仁意;;丹參酮ⅡA的藥理作用研究進展[J];醫(yī)藥導(dǎo)報;2008年10期

7 鄭曉蕾;盧德趙;;丹參酮ⅡA抗動脈粥樣硬化作用的研究進展[J];浙江中醫(yī)雜志;2011年10期

8 楊萍;賈鈺華;李杰;李麗君;周鳳華;;Study of Anti-Myocardial Cell Oxidative Stress Action and Effect of Tanshinone IIA on Prohibitin Expression[J];Journal of Traditional Chinese Medicine;2010年04期

相關(guān)博士學(xué)位論文 前1條

1 劉芳;1.Keap1和p65蛋白相互作用及其作用機制研究 2.Mayven不同截短體原核表達載體的構(gòu)建、表達和純化[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2008年

，

本文編號：1548159