發(fā)布時(shí)間：2018-02-27 17:21

  本文關(guān)鍵詞： 低氧性肺動(dòng)脈高壓 低氧誘導(dǎo)因子α Brm蛋白 內(nèi)皮細(xì)胞　出處：《中國(guó)病理生理雜志》2017年04期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：目的:本研究擬探討低氧誘導(dǎo)因子1α(HIF-1α)在低氧誘導(dǎo)的血管內(nèi)皮細(xì)胞Brm表達(dá)上調(diào)中的作用及機(jī)制,為低氧性肺動(dòng)脈高壓的防治提供理論依據(jù)。方法:在內(nèi)皮細(xì)胞中過(guò)表達(dá)或siRNA干擾HIF-1α的表達(dá),并給予1%低氧處理24 h后,運(yùn)用螢光素酶報(bào)告基因檢測(cè)方法檢測(cè)Brm啟動(dòng)子的轉(zhuǎn)錄活性,運(yùn)用RT-qPCR檢測(cè)Brm的mRNA表達(dá)水平,運(yùn)用Western blot檢測(cè)Brm的蛋白表達(dá)水平。運(yùn)用ChIP技術(shù)檢測(cè)低氧條件下HIF-1α與Brm啟動(dòng)子區(qū)域的結(jié)合變化情況。結(jié)果:過(guò)表達(dá)HIF-1α可顯著上調(diào)Brm的啟動(dòng)子活性、mRNA及蛋白表達(dá),而siRNA干擾HIF-1α可顯著抑制Brm的啟動(dòng)子活性、mRNA及蛋白表達(dá),ChIP實(shí)驗(yàn)揭示低氧可顯著增強(qiáng)HIF-1α與Brm啟動(dòng)子的結(jié)合。結(jié)論:低氧上調(diào)內(nèi)皮細(xì)胞中Brm的表達(dá)依賴HIF-1α的轉(zhuǎn)錄調(diào)控作用。
[Abstract]:Aim: to investigate the role and mechanism of hypoxia inducible factor-1 偽 (HIF-1 偽) in the up-regulation of Brm expression in cultured vascular endothelial cells induced by hypoxia. Methods: overexpression of HIF-1 偽 in endothelial cells or siRNA interference with HIF-1 偽 expression were observed after treatment with 1% hypoxia for 24 h. The transcriptional activity of Brm promoter was detected by luciferase reporter gene assay, and the mRNA expression level of Brm was detected by RT-qPCR. Western blot was used to detect the expression of Brm protein, and ChIP technique was used to detect the binding changes of HIF-1 偽 and Brm promoter region under hypoxia. Results: overexpression of HIF-1 偽 could significantly up-regulate the expression of HIF-1 偽 and protein in Brm promoter. However, siRNA interference with HIF-1 偽 could significantly inhibit the expression of Brm promoter activity mRNA and protein. The experiment showed that hypoxia could significantly enhance the binding of HIF-1 偽 to Brm promoter. Conclusion: hypoxia upregulated the expression of Brm in endothelial cells dependent on the transcriptional regulation of HIF-1 偽.
【作者單位】： 第三軍醫(yī)大學(xué)高原軍事醫(yī)學(xué)系病理生理學(xué)與高原病理學(xué)教研室;第三軍醫(yī)大學(xué)高原軍事醫(yī)學(xué)系全軍高原醫(yī)學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;第三軍醫(yī)大學(xué)高原軍事醫(yī)學(xué)系高原特需藥品與衛(wèi)生裝備研究室;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(No.81501626) 軍隊(duì)重大項(xiàng)目(No.AWS14C007) 國(guó)家科技部“973”項(xiàng)目(No.2012CB518201)
【分類號(hào)】：R544.1

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10 胡娟;鄧貴福;胡媛Y

本文編號(hào)：1543599