本文關(guān)鍵詞：運動預(yù)適應(yīng)對力竭大鼠心肌TNF-α介導(dǎo)的凋亡通路的影響　出處：《河北大學(xué)》2016年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

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【摘要】：目的:力竭運動可致心肌損傷,嚴(yán)重者發(fā)生猝死,這類事件并不少見,是運動醫(yī)學(xué)、軍事醫(yī)學(xué)及臨床醫(yī)學(xué)面臨的共同課題。以往研究多集中在對力竭后心肌損傷的藥物治療,仍缺乏有效的預(yù)防措施。目前已公認(rèn)缺血預(yù)適應(yīng)(ischemic preconditioning,IP)可通過反復(fù)多次短暫缺血使心臟在隨后持續(xù)的缺血損傷中得到保護(hù),使人們從對細(xì)胞直接保護(hù)研究轉(zhuǎn)向?qū)?nèi)源性保護(hù)機制研究。運動預(yù)適應(yīng)(exercise preconditioning,EP)作為IP的一種特殊形式,即通過運動誘導(dǎo)機體的自身保護(hù),從而提高心肌耐受缺血缺氧的能力。最近研究表明心肌細(xì)胞凋亡是力竭后心肌損傷的細(xì)胞生物學(xué)基礎(chǔ),力竭運動使Bax/Bcl-2比值增高,促進(jìn)Fas蛋白表達(dá),決定心肌細(xì)胞進(jìn)入細(xì)胞凋亡的執(zhí)行期,繼而由TNF-α、NF-KB、Fas-L等引發(fā)一系列復(fù)雜的細(xì)胞信號傳導(dǎo)途徑最終導(dǎo)致細(xì)胞凋亡,其中半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Cysteinyl aspartate specific proteinase,Caspase)相關(guān)凋亡信號通路發(fā)揮重要作用。EP具有心肌保護(hù)作用,但EP是否通過抑制心肌細(xì)胞凋亡從而發(fā)揮保護(hù)作用及其在心肌細(xì)胞凋亡時對細(xì)胞內(nèi)信號傳導(dǎo)通路的影響尚不清楚。本研究擬在建立大鼠EP和力竭運動損傷模型的基礎(chǔ)上,從細(xì)胞凋亡角度研究EP對心肌TNF-α和Caspase蛋白酶表達(dá)的影響,探討EP心肌保護(hù)效應(yīng)是否通過影響TNF-α介導(dǎo)的凋亡通路發(fā)揮作用,進(jìn)一步了解EP對心肌的保護(hù)作用的分子機制,同時為運動預(yù)適應(yīng)對力竭后心肌損傷的防治提供新的實驗依據(jù)。方法:1.雄性SD大鼠48只,隨機分成4組:安靜對照組、力竭運動組、短期運動預(yù)適應(yīng)組、長期運動預(yù)適應(yīng)組(n=12)。除安靜對照組,其余各組以尾部負(fù)重大鼠3%體重的方式進(jìn)行游泳訓(xùn)練。安靜對照組:常規(guī)飼養(yǎng)3天,不游泳;力竭運動組:參照Thomas力竭標(biāo)準(zhǔn),常規(guī)飼養(yǎng)3天后進(jìn)行一次游泳運動,直至力竭。短期運動預(yù)適應(yīng)組:標(biāo)準(zhǔn)參照Lennon方法建立,每天進(jìn)行間歇性游泳運動1次,每次1小時,要求游泳15分鐘,休息5分鐘,重復(fù)3次,持續(xù)3天,然后與力竭組進(jìn)行一次力竭游泳運動;長期運動預(yù)適應(yīng)組:參照Margonato方法建立,每天進(jìn)行間歇性游泳運動1次,運動方式同短期,持續(xù)3周(6天/周),然后進(jìn)行一次力竭游泳運動。安靜對照組直接取材,各組于力竭運動后30分鐘取材。2.取大鼠心肌組織作病理切片,經(jīng)he染色,光鏡下觀察其顯微結(jié)構(gòu)。3.采用elisa方法檢測血清中缺血修飾白蛋白(ima)、肌酸激酶同工酶(ck-mb)、肌鈣蛋白i(ctni)的含量。4.采用dna原位末端標(biāo)記(tunel)法觀察心肌細(xì)胞的凋亡反應(yīng)。5.采用熒光定量pcr方法檢測大鼠心肌組織中tnf-α、caspase-8、caspase-9、caspase-3基因的表達(dá)水平。6.采用westernblot方法檢測大鼠心肌組織中tnf-α、caspase-8、caspase-9、caspase-3蛋白的表達(dá)水平。結(jié)果:1.大鼠心肌顯微結(jié)構(gòu)安靜對照組心肌結(jié)構(gòu)完整,肌纖維排列整齊、無斷裂,間質(zhì)無水腫,可見橫紋;力竭組心肌細(xì)胞腫脹明顯,可見肌纖維斷裂、排列紊亂,間質(zhì)纖維增生、水腫;短期、長期運動預(yù)適應(yīng)組偶見肌纖維斷裂,輪廓較清楚,間質(zhì)水腫較輕,而且長期運動預(yù)適應(yīng)組相比于短期更接近對照組。2.大鼠血清生化指標(biāo)比較(1)與安靜對照組相比,力竭組、短期運動預(yù)適應(yīng)組和長期運動預(yù)適應(yīng)組血清ima、ck-mb含量均明顯升高,有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05),力竭組和短期運動預(yù)適應(yīng)組血清ctni明顯升高,有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05),而長期運動預(yù)適應(yīng)組升高不明顯,無統(tǒng)計學(xué)差異。(2)與力竭組相比,長期運動預(yù)適應(yīng)組血清ima、ck-mb、ctni含量均明顯下降,有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05),短期運動預(yù)適應(yīng)組血清ck-mb、ctni明顯下降,有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05),而ima下降不明顯,無統(tǒng)計學(xué)差異。3.大鼠心肌細(xì)胞凋亡情況經(jīng)tunel染色后正常細(xì)胞核呈藍(lán)色,凋亡細(xì)胞核呈棕色。結(jié)果顯示對照組(13.17±3.43%)大鼠心肌組織存在少數(shù)散在的細(xì)胞凋亡;力竭組(44.38±6.13%)大鼠心肌組織出現(xiàn)大量細(xì)胞凋亡,明顯高于對照組,有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05);短期(36.14±3.16%)、長期運動預(yù)適應(yīng)組(25.83±5.12%)與力竭組相比凋亡明顯減少,有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05),長期運動預(yù)適應(yīng)組較短期運動預(yù)適應(yīng)組減少更明顯,有統(tǒng)計學(xué)意義(p0.05)。4.心肌組織中tnf-α、caspase-8、caspase-9、caspase-3mrna的表達(dá)水平(1)與安靜對照組相比,除長期運動預(yù)適應(yīng)組的Caspase-9外,其余各組心肌TNF-α、Caspase-8、Caspase-9、Caspase-3mRNA表達(dá)量均明顯升高,有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。(2)與力竭組相比,除短期Caspase-3外,短期、長期運動預(yù)適應(yīng)組大鼠心肌TNF-α、Caspase-8、Caspase-9、Caspase-3mRNA含量明顯降低,有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),長期運動預(yù)適應(yīng)組比短期下降更明顯,有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。5.心肌組織中TNF-α、Caspase-8、Caspase-9、Caspase-3蛋白的表達(dá)水平(1)與安靜對照組相比,力竭組和短期運動預(yù)適應(yīng)組大鼠心肌TNF-α、Caspase-8、Caspase-9、Caspase-3蛋白明顯升高,有統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05),長期運動預(yù)適應(yīng)組升高不明顯,無統(tǒng)計學(xué)差異。(2)與力竭組相比,短期運動預(yù)適應(yīng)組大鼠心肌TNF-α、Caspase-8、Caspase-9、Caspase-3下降不明顯,無統(tǒng)計學(xué)意義,而長期運動預(yù)適應(yīng)組明顯下降,有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:1.力竭運動可致心肌損傷,運動預(yù)適應(yīng)可減輕力竭運動后心肌損傷。2.心肌細(xì)胞凋亡參與力竭運動致心肌損傷的機制,力竭運動激活TNF-α介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡信號通路,上調(diào)Caspase蛋白酶,從而誘導(dǎo)心肌細(xì)胞凋亡。3.運動預(yù)適應(yīng)可通過抑制TNF-α介導(dǎo)的凋亡信號通路,減少心肌細(xì)胞凋亡,從而發(fā)揮保護(hù)心肌作用。4.短期運動預(yù)適應(yīng)與長期運動預(yù)適應(yīng)可不同程度的抑制心肌細(xì)胞凋亡,長期運動預(yù)適應(yīng)的作用更強。
【學(xué)位授予單位】：河北大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R541.6

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1 Wainwright CL;韓征平;房祥;;預(yù)適應(yīng):心臟抗缺血的自我保護(hù)反應(yīng)[J];國外醫(yī)學(xué).心血管疾病分冊;1993年04期

2 李政圣;孫宗全;;降鈣素基因相關(guān)肽預(yù)適應(yīng)心肌保護(hù)作用的實驗研究[J];長江大學(xué)學(xué)報(自科版);2006年09期

3 王強;聞劍飛;施洪飛;;運動預(yù)適應(yīng)心肌保護(hù)作用機制研究綜述[J];合肥師范學(xué)院學(xué)報;2010年06期

4 余國膺;;人有無預(yù)適應(yīng)?[J];國外醫(yī)學(xué)情報;1996年11期

5 鄭斌;熱休克蛋白與晚期預(yù)適應(yīng)[J];醫(yī)學(xué)綜述;2000年06期

6 劉宏雁,呂國蔚,王維忠;小鼠腦內(nèi)甘氨酸含量在缺氧預(yù)適應(yīng)中的變化(英文)[J];生理學(xué)報;2001年06期

7 馬世玉;預(yù)適應(yīng)對血管內(nèi)皮細(xì)胞的保護(hù)作用[J];國外醫(yī)學(xué)(內(nèi)科學(xué)分冊);2002年05期

8 孫星星;楊建棟;張博;李志超;;缺氧預(yù)適應(yīng)小鼠缺氧耐受性、運動耐力及肺功能的改變[J];中國臨床康復(fù);2005年43期

9 馬力;張常喜;謝春毅;;中醫(yī)藥預(yù)適應(yīng)研究進(jìn)展[J];中西醫(yī)結(jié)合心腦血管病雜志;2008年07期

10 呂國蔚;預(yù)適應(yīng)研究的現(xiàn)狀與前景[J];神經(jīng)科學(xué);1996年02期

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1 賈凌云;王憲;;鈣網(wǎng)蛋白參與了人肺Ⅱ型上皮細(xì)胞缺氧預(yù)適應(yīng)的保護(hù)效應(yīng)[A];第六屆全國自由基生物學(xué)與自由基醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會議和海峽兩岸自由基生物學(xué)與自由基醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會議論文集[C];2004年

2 范有明;高鈺琪;;低壓缺氧晚期預(yù)適應(yīng)小鼠海馬差異表達(dá)基因的篩選及鑒定研究[A];第六次全國缺氧和呼吸病理生理學(xué)術(shù)會議論文摘要匯編[C];2003年

3 張清俊;先宏;叢建波;李彤;辛益妹;吳可;詹皓;張建中;孫存普;;重復(fù)+Gz條件下小鼠機體多臟器NO含量的變化及茶多酚的防護(hù)作用[A];第五屆全國自由基生物學(xué)與自由基醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)討論會論文摘要匯編[C];2000年

4 馬世玉;向繼洲;吳基良;馬業(yè)新;;內(nèi)源性一氧化氮介導(dǎo)脂質(zhì)胞壁酸預(yù)適應(yīng)對人冠脈內(nèi)皮細(xì)胞再復(fù)氧損傷的作用[A];中華醫(yī)學(xué)會心血管病分會第八次全國心血管病學(xué)術(shù)會議匯編[C];2004年

5 黃柏勝;劉發(fā)益;周p，

本文編號：1313337